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【期刊论文】灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠脏器影响的实验研究*
王一飞, 杜彬, 钟雪云, 熊盛, 张传海, 刘新建, 刘石生, 张美英, 李久香, 陆家海, 万卓越, 鄢心革, 郑焕英, 范江林
中国病理生理杂志,2004,20(7):1187~1189,-0001,():
-1年11月30日
目的:探讨灭活SAILS冠状病毒疫苗对小鼠是否有损伤作用。方法:用灭活SARS冠状病毒分别免疫BALB/c和C57BL/6小鼠;ELISA法检测小鼠血清中抗SARS冠状病毒抗体水平;免疫8周后取小鼠各脏器,观察其病理形态学改变。结果:免疫8d后,小鼠血清中就可检测到特异的Ig,M、IgG抗体;组织切片染色观察,可见少数小鼠肺及肝组织出现轻度损伤,其他脏器未见病变。结论:SAILS冠状病毒灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体,同时没有造成严重的器官损伤。这将为SARS疫苗进入临床研究打下基础。
严重急性呼吸综合征; 冠状病毒; 疫苗, 灭活; 小鼠
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王一飞, 冉延超, 王一飞△, 熊盛, 张美英, 黄文韬, 罗林波, 刘秋英
中国病理生理杂志,2004,20(6):954~959,-0001,():
-1年11月30日
目的:为提高表达量,简化纯化工艺,获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白,构建带有6×His纯化标签的原核表达载体,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法:将抑癌基因nm23-H/从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE40中;梯度变化表达条件获得产物高表达;镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白;Western blot鉴定产物的免疫原性;HPLC测定产物的激酶活性;鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果:pQE-40中亚克隆的nm23-H/序列无误;目的蛋白最高表达量可达49.6%;纯化的表达产物能与天然NDPK-A的多克隆抗体特异结合;酶比活为472U/rag;具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论:表达质粒-nm23HI能高效表达重组人NDPK-A,纯化工艺简便,产物活性与天然NDPK-A无异。
核苷二磷酸激酶, 肿瘤抑制蛋白质类
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【期刊论文】BALB/C小鼠对不同佐剂SARS灭活疫苗的早期免疫反应①
王一飞, 熊盛, 刘新建, 张美英, 张传海, 刘石生, 冉延超, 杨红宇李久香
BALB/C小鼠对不同佐剂SAILS灭活疫苗的早期免疫反应第6期,-0001,():
-1年11月30日
目的:研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后,小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法:灭活的SARS冠状病毒F69株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍,制备灭活疫苗。接种6周龄SPF级BALB/C小鼠。定时采血,分析小鼠外周血中CD4 、CD8 T细胞亚群动态变化,同时测定鼠血清中特异性IsG抗体及抗体的病毒中和活性。结果:由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后,CIM 、CD8 T细胞百分比升高或无明显改变,CIM/CD8比值无显著性改变。其中,寸鲁一佳剂疫苗免疫小鼠的CIM T细胞百分比升高较明显,且在一段时间内,维持在一个较高的水平;铝佐剂疫苗免疫小鼠后,未观 到明显 I‘细胞亚群改变;而cpG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8 T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是种爰茁均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IsG抗体,并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第3-4天,3种佐剂抗体滴度分别为1∶12800、1∶3200和1∶1600,中和效价分别为1∶2560、1∶960和1∶320。结论:SARS灭活疫苗接种小f 可诱导较强的体液免疫反应,同时轻度上调CD4+、CD8+T细胞活性,程度因佐剂而异。
SARS, 灭活疫苗, T细胞亚群, IgG抗体, 中和活性
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