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王嘉福, 姜天重, 徐涤平, 方雨玲, 李刚明, 杨宜生
,-0001,():
-1年11月30日
应用间接血凝(IHA)试验和环状沉淀试验对湖北、湖南、河南、江西和辽宁等省送检的病料中分离的猪源致病性链球菌63株进行了血清学分群鉴定,两法的结果是一致的。鉴定出c群40株,D群8株,E群11株,R群4株。采用以上两法对鄂、湘、赣、豫等4省的20个猪场随机抽样的414份不同猪群的血清进行链球菌群特异性抗体检测,在IHA法中的阳性率:c群52.90%,D群14.73%,E群18.36%,R群4.35%,环状沉淀试验中以上四群的阳性率分别为46.145,12.08%,1473%和3.14%。两种方法的总符合率为84.22%。
猪源链球菌, 分群鉴定, 血清学调查
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【期刊论文】贵州地方猪种种UCP3基因多态性与肉质性状的相关性分析
王嘉福, 胡倩, , 冉雪琴*
,-0001,():
-1年11月30日
解耦联蛋白3(uncouphllg proteill 3,uCP3)是调节能量和脂肪代谢的重要因子。以商品猪(杂交猪)为对照,采用sscP方法对贵州地方猪品种糯谷猪和萝卜猪的ucP3基因进行了多态性分析。结果表明:3个猪群体中,都检测到了3种基因型(从、BB、AB),X2独立性检验结果显示,3种基因型在3个群体间的分布不一致,糯谷猪和萝卜猪以AB基因型为主,杂交猪以BB基因型占优势,杂交猪与地方猪种之间的差异显著(P<0.01);对纯合基因型的ucP3基因片段进行克隆测序。证实从基因型中ucP3基因外显子6编码区第842位碱基发生了单碱基突变(T—c),导致编码的氨基酸从苏氨酸突变为甲硫氨酸。进一步分析3种基因型与胴体和内质性状之间的相关性,证明AB基因型个体的内质最优,贵州地方猪种的大理石纹、肌内脂肪含量和嫩度3项指标显著优于商品猪(p<0.01),因此推测ucP3基因与贵州地方猪种的肉质性状具有相关性,可能是贵州地方猪种肉质性状的候选基因。
肉质性状, ucP3基因, sscP, 胴体, 猪
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【期刊论文】贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆及原核表达水
王嘉福, 代新兰., 冉雪琴, 王嘉福.**
China Poultru Vol.30 No.72008,-0001,():
-1年11月30日
采用特异性引物自贵州黑羽乌骨鸡胃部组织克隆了Ghrelin的基因,基因全长12330bp,含有4个外显子,3个内含子。采用RT—PcR技术,获得了Ghrelin cDNA版式段(563bp),Il序列分析推测,通过可变剪切可产生两mRNA,cDNA编码区与基因组中的编码区完全一致。黑羽乌骨鸡Ghrelin基因与已知鸡种比较有13~18个碱基不同,相似性为99.1~99/3%,但其氨基酸序列完全一样,表明禽类 Ghrelin。多肽高度保守。将其 Ghrehn编码区亚克隆到原II核表达载44kpTYBll中,经序列测定碱基序列正确,获得重组质:pTYBll/G。在IPTG的诱导下,重组质粒在大肠杆菌ER2566中获得表达。当ODm=0.5,IPTG浓度1mmol/L,诱导5小l时的表达量最高,融合蛋白占细胞总蛋白40%。采用几质结合的预装柱对表达产物进行l纯化,产率约为5 mg/L培养液。
乌骨鸡, Ghrelin基因, 原核表达
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王嘉福, 林尖兵, 杜智勇, 覃成, 冉雪琴*
,-0001,():
-1年11月30日
骨形态发生蛋白15(bone m0Iphogenetic pmlein 15,BMPl5)基因是控制Belclare和carIlbridge等绵羊的高繁殖力主效基因,BMPl5蛋白中单个氨基酸的改变直接影响绵羊的产卵率和产羔数。采用RFLP和SsCP技术检测BMPl5基因中绵羊高繁殖力突变类型FecXc和FecXc在贵州白山羊中的分布。结果表明,在贵州白山羊样品中没有检测到BMPl5基因的FecXc突变,说明该突变在贵州白山羊中的自然发生率非常低;在贵州白山羊高产母羊和公羊中检测到BMPl5的FecXb突变,以杂合的AB基因型存在,低产母羊中没有检测到该突变,提示BMPl5基因的Fecxb突变可能是影响贵州白山羊繁殖力的因素之一。
贵州白山羊, 繁殖力, BMP15基因
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王嘉福, SupatATTATHOM
,-0001,():
-1年11月30日
重组质粒psC66d(Cry IAb601)转化大肠杆菌DH5a后,接种TCB培养基,经SDSPAGE电泳和电镜分析,晶胞蛋白基因在大肠杆菌细胞中得到高效表达,表达产物分子量约130KD,在细菌细胞中形成卵圆形包涵体。比较了重组菌株在不同培养基中的生长及晶胞蛋白的表达水平,结果说明重组茵株在IB及2×YT培养基中的生长及表达均较低,在TcB培养基中细菌生长良好,晶胞蛋白高效表达,表达量可达细菌总蛋白的63.4%,较出发菌株GH9601增加17.8倍。测定了纯化的晶胞蛋白对4种鳞翅目昆虫的杀虫活性。
苏芸金杆茵, 重组DNA, 杀虫晶胞蛋白, 表达
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