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2005年03月31日

姚文兵，许敏*，吴梧桐，沈子龙

Journqal of China Pharmaceutical University 2000,31(6): 462～465，-0001，（）：

-1年11月30日

用均匀设计法对重组人干扰素“2b基因程菌的摇瓶发酵条件进行了优化，确定摇瓶培养基组成为：每升含蛋白胨10g、葡萄糖6g、酵母粉5g、Na2HPo46g、KH2Po42g、NH4Cl O.8g、NaCl 4g、CaCl2O.01g、Mgso4O.2g，发酵表达条件为：pH 6.9，温度37℃，IPTG诱导后表达时间为5h左右，装料量为20％。三批小试结果为：湿菌体平均产率18g/L，生物活性3.93×108Iu/L。发酵罐三批中试放大试验，湿菌体平均产率为29g/L，生物活性为6 68×108Iu/L发酵液。

重组人干扰素a-2b，基因表达，发酵条件

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2005年03月31日

【期刊论文】重组人干扰素α2b表达与分离纯化研究

姚文兵，姚文兵*，许敏，吴梧桐，沈子龙

中国药科大学学报，2001，32（2）：152～154，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的从湿菌体中分离纯化重组人干扰素α2b。方法采用（NH4）2SO4盐析2H3PO4处理2CM32离子交换层析2DE52离子交换层析2Sephadex G100凝胶层析等非亲和层析纯化方法。结果回收率约为30%，HPLC检验纯度达96%，每毫克蛋白比活力达1. 66×108 IU。结论分离纯化系统令人满意，回收率较高。

重组人干扰素α2b，分离，纯化，鉴定

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2005年03月31日

【期刊论文】重组干扰素α22a口腔粘贴片的研制*

姚文兵，沈子龙，高向东，吴梧桐

药物生物技术，2001，8（2）：152～155，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

报道了重组干扰素α-22a腔粘贴片的研制及稳定性研究。每1000片口腔粘贴片的配方为：干扰素（7×108 IU），羟丙甲基纤维素18g，羧甲基纤维素9g，卡波普27g，乳糖3511g，硬脂酸镁019g。稳定性研究表明，该品在4 ℃放置24 个月稳定,在室温下放置18个月，活性保留85%左右，而37℃放置2个月，活性仅下降30%，表明其具有比较好的开发与应用前景。

干扰素α22a，口腔粘贴片，稳定性

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2005年03月31日

【期刊论文】聚乙二醇修饰重组人干扰素a-2b修饰产物的初步分析研究

姚文兵，杨晓兵，吴梧桐

中国生化药物杂志，2003，24（6）：274～276，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的对聚乙二醇（PEG）修饰重组人干扰素a-2b（rhIFNa一2b）的修饰产物进行了初步分析研究。方法以单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯对rhIFNd-2b进行修饰，修饰产物以Superdex 75 Highload制备型凝胶色谱柱进行分离、纯化，SDS-PAGE鉴定各组分，采用Mariner电喷雾飞行时间质谱对单修饰IFNa-2b（mono-PEG-IFNa-2b）进行分析。结果分别获得了纯化的mono-PEG-IFNa-2b和多修饰IFNa-2b（polyr-PEG*IFNa-2b）。EsI-TOF质谱也证明mono-PEG-IFNa-2b分子量比rhIFNa-2b多5000左右；紫外光谱分析表明，PEG修饰产物的结构没有发生改变。结论获得了纯化的PEG修饰产物。

重组人干扰素a-2b，聚乙二醇，修饰，分离，纯化

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2005年03月31日

【期刊论文】聚乙二醇修饰干扰素α2b的稳定性研究

姚文兵，林碧蓉，沈子龙，吴梧桐

中国生化药物杂志，2001，22（6）：289～292，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的研究聚乙二醇修饰干扰素α2b的稳定性。方法以抗病毒活性为指标，考察单修饰干扰素α2b、多修饰干扰素α 2b和干扰素α2b的稳定性（4℃、25℃、37℃）、抗胰蛋白酶水解能力和37℃人血清稳定性。结果在4℃、25℃和37℃条件下，稳定性依次为多修饰干扰素α2b >单修饰干扰素α2b>干扰素α2b。抗胰蛋白酶水解试验表明：干扰素α2b在30min时抗病毒活性迅速降到原来的7.1%，单修饰干扰素α2b剩余50%，多修饰干扰素α2b仍保留71%。体外稳定性试验表明，在37℃人血清放置10h，干扰素α2b只保留35%，单修饰干扰素α2b保留71%，而多修饰干扰素α2b仍保留95%的抗病毒活性。结论聚乙二醇修饰可以增加干扰素α2b的稳定性，抗胰蛋白酶水解能力和37℃人血清稳定性。除了抗胰蛋白酶水解能力，修饰度的增加能够明显增强这种作用。

干扰素α2b，聚乙二醇修饰干扰素α2b，稳定性，抗病毒活性

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