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李华钟
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期刊论文
Streptoverticillium mobaraense谷氨酰胺转胺酶的表达、纯化和复性
食品与发展工业，2004，30（4）：71、81、91，-0001，（）：
以基因组DNA为模板，利用PCR技术从茂原轮链丝菌（Streptoverticilliummobaraense）中扩增得到产成熟谷氨酰胺转胺酶MTG的结构基因mtg，克隆于表达载体pQE230T，构建成lac启动子控制下的His6融合表达质粒pMTG，将此重组质粒转化到受体菌E. coli M15中。对质粒稳定性的研究表明，E. coli M15在无选择压的情况下，于37℃连续转接5次，质粒丢失率仅有24%，说明质粒基本稳定。重组菌经IPTG诱导，表达的重组谷氨酰胺转胺酶占菌体总蛋白的18%，经SDS2PAGE分析，表达的蛋白质的分子质量为38ku，与预期分子质量相符。表达产物主要以包涵体的形式存在。细胞经超声破碎，离心取包涵体溶于8mol/L的尿素中，然后通过Ni2NTA亲和柱分离纯化和稀释法复性。目的蛋白的纯度可达95%以上。比酶活为1013U/mg。
【免责声明】以下全部内容由[李华钟]上传于[2009年01月19日 11时21分11秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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