目的　分析黑龙江省Ⅰ型人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type 1，HIV-1）原代分离株包膜糖蛋白的变异性及表型特征。方法　从一名HIV 阳性但未发病的感染者外周血单个核细胞提取DNA，采用保守引物进行HIV 包膜直接克隆，进行序列分析及系统树分析。构建了一株带该包膜蛋白的伪病毒并利用表达CXCR4 和CCR5 的靶细胞进行了感染实验，观察该病毒包膜利用辅助受体的表型特征。结果 共获得2个有功能全长env克隆，分别命名为CHNHLJ03009c34（Gen2Bank 序列号为AY905493）和CHNHLJ03009c33。用全长env氨基酸序列与国内外分离株进行同源性比较分析发现，与分离株CHNHLJ03009c34 的包膜同源性最高的病毒为云南的HIV21 B'亚型分离株RL42，同源性为91.52%。系统发育分析结果表明，该株为泰国B'亚型，与云南分离株RL42的遗传距离最近。对包膜蛋白结构分析结果显示，分离株CHNHLJ03009c34包膜在抗原性和亲水性上与RL42没有明显差别。感染性检测结果显示该病毒只能感染U87. CD4. CCR5细胞，不能感染U87.CD4. CX2CR4 细胞。结论 本研究从黑龙江省一名HIV-1阳性者克隆到HIV-1 CHNHLJ03009病毒的包膜基因，该病毒属于B'亚型（泰国亚型），为R5亲嗜性毒株。该包膜基因克隆为首次报道的黑龙江分离株。