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孙晗笑

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期刊论文

vMIP-II肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达

孙晗笑利奕成朱彦彦钟瑛冯丽霞

暨南大学学报(自然科学版),2002,23(3):107~110,-0001,():

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摘要/描述

目的:构建病毒趋化因子(vMIP-Ⅱ)基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP-Ⅱ重组肽。方法:用 PCR法获得vMIP-Ⅱ基因片断,将其插入表达 载体pQE,构建重组表达载体pEh-vMIP。表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5d,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果:阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP-II重组肽,蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符(约8×103)的诱导表达条带,其表达量约占菌体总蛋白的20%。分析表明,vMIP-Ⅱ重组肽主要以可溶性形式表达。结论:用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量 vMIP-Ⅱ的成功,为进一步研究vMIP-Ⅱ的功能及应用奠定基础 ,也为同类小分子、易降解的肽类物提供基因工程表达方法。

【免责声明】以下全部内容由[孙晗笑]上传于[2009年10月10日 10时41分30秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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