目的：探讨体外定向诱导胚胎干细胞（ESC）发育为造血干细胞（HSC）的方法。方法：将小、鼠E14胚胎干细胞在含于细胞生长因子（SCF）和血管内皮生长因子（VEGF）的甲基纤维素培养基上首先诱导发育为胚胎体（EB），再将EB置于均含SCF、VEGF、IL-3、IL-6及促红细胞生成素（EPO）的3各不同培养体系中定向分化为HSC，并观察HSC表面标志性抗原、造血集落形成及瑞氏-姬姆萨染色的结果。结果：经两阶段诱导ESC分化为HSC，发现在甲基纤维半固体培养体系中HSC发育缓慢，分化14d后CD34+/Sca-1+细胞数量最高为（31.5+-4.7）%；而在骨髓基质细胞饲养层上HSC发育缓慢较快，细胞数量较多，分化第10dCD34+/Sca-1+细胞数即达到峰值，为（47.8+-6.3）%；骨髓基质细胞饲养层+胎肝基质细胞上清培养体系中HSC发育同样迅速，所产生的CD34+/Sca-1+细胞数量在3个体系中最高，为（53.6+-7.2）%。经瑞氏-姬姆萨染色证实上述细胞为早期造血细胞，均有形成各系造血细胞集落的能力。结论：使用骨髓基质饲养层+胎肝基质细胞上清培养体系及SCF、VEGF、IL-3、IL-6及EPO等细胞因子，通过阶段诱导分化，可从小鼠ESC获得较高比例的HSC。