夏焕章
1.微生物次级代谢产物生物合成基因的研究。2.组合生物合成研究。3.微生物药物菌种选育和发酵工艺研究。
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- 姓名:夏焕章
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- 担任导师情况:
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学术头衔:
博士生导师
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学科领域:
微生物学
- 研究兴趣:1.微生物次级代谢产物生物合成基因的研究。2.组合生物合成研究。3.微生物药物菌种选育和发酵工艺研究。
夏焕章,博士,教授,博士生导师。1987年沈阳药学院微生物制药专业本科毕业,获学士学位并留校任教;1990~1996年中国协和医科大学攻读硕士和博士学位,1996年获博士学位。1997年破格晋升为副教授,2002年晋升为教授,2004年批准为博士生导师。曾任沈阳药科大学生物制药系主任、制药工程学院副院长,现任教务处副处长。辽宁省教学名师,辽宁省“百千万人才工程”千人层次人选,辽宁省普通高等学校优秀青年骨干教师,辽宁省精品课程“生物技术制药”负责人,辽宁省示范本科专业生物工程专业负责人。中国微生物学会分子微生物学与生物工程专业委员会委员,辽宁省生物与医药研究开发专家咨询委员会委员,辽宁省生物技术协会专家委员会委员,沈阳药科大学学报、中国抗生素杂志、国外医药抗生素分册、微生物学杂志编委。
长期担任国家生命科学与技术人才培养基地、生物工程专业的生物技术制药课程的教学工作,主讲生物技术制药、生物新药研发与产业化、基因工程等课程。先后主持了国家高技术研究发展计划(863计划)、国家自然科学基金、教育部博士点基金、辽宁省自然科学基金、沈阳市科学技术计划项目和企业合作项目。已在国内外发表学术论文30多篇。主编教材《生物技术制药》(第二版)(国家级“十一五”规划教材,面向二十一世纪教材,首批生物技术和生物工程专业规划教材),参编了《生物技术制药》(第一版)、《生物技术制药概论》、《现代药物设计学 》、《现代微生物发酵及技术教程》等教材。
研究方向:1.微生物次级代谢产物生物合成基因的研究。主要从事克隆与次级代谢产物有关的生物合成基因的克隆、表达,基因工程菌的构建,基因工程菌发酵及代谢调控的研究。2.组合生物合成研究。利用基因组合生物合成技术构建产生新化合物的工程菌,筛选新药。3.微生物药物菌种选育和发酵工艺研究。利用生物技术手段选育优良的抗生素产生菌菌种,对发酵工艺进行优化,提高已有抗生素的产量,降低成本;提高有效成份量,抑制无效成份的产生,改善质量。
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夏焕章, 李天伯, 胡洋*, 王以光**
生物工程学报, 2005, 21(1): 26~29,-0001,():
-1年11月30日
hMR-1为本实验室首次克隆发现的一个人类新基因,是一种和三种肌肉收缩蛋白及多种细胞信号蛋白具有相互作用的膜蛋白。经与鼠基因组数据库进行同源分析后设计合成引物,利用RT-PCR技术从小鼠C57BIJ6J脾脏T淋巴细胞总RNA中反转录得到鼠源MR-I基因(mMR-1),提交GenBank,收录号(AY299972)。序列分析证明其与人源MR-1基因(hMR-1)同源性为90.1%。构建表达载体pPIC9-mMR-1电转化Pichia pastoris GS115,筛选得到整合分泌表达mMR-1蛋白的重组酵母菌株。表达目的蛋白分子量25kD,诱导5d时产量达到50mg/L,通过Westem blot验证了表达产物的正确性。本研究为进一步研究新基因MR-1的生物学功能奠定了基础。
MR-1, 克隆与表达, 毕赤酵母
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夏焕章, Yu Du, * Tianbo Li, * Yiguang G. Wang, Huanzhang Xia
CURRENT MICROBIOIOGY Vol.49(2004)99-107,-0001,():
-1年11月30日
Streptomyces tenebrarius H6 produces a variety of aminoglycoside antibiotics. such as apramycin, tobramycin, and kanamycin B. Primers were designed according to the highly conserved sequences of the dTDP-glucose-4,6-dehydratase genes, and a 0.6-kb PCR product was obtained from S. tenebrarius H6 genomic DNA. With the 0.6-kb PCR product as a probe, a BamHI 7.0-kb fragment was isolated. DNA sequence analysis of the 7.0-kb fragment revealed four ORFs and an incomplete ORF. In search of databases, the deduced product of one ORF (orfE) showed 62% identity to the dTDP-glucose-4,6-dehydratase, StrE of S. griseus. Three other ORFs (orfGl, orfG2, and orfGrVD showed 55%. 62%, and 42% similarities, respectively, to glycosyltransferase from Clostridium acetobutylicum and mannosyl-transferase from Xanthomonas axonopodis pv. citri str. 306 and glycosyltransferase from Pseudomonas putida KT2440. Upstream of the orfE was an incomplete ORF, and the deduced product showed 56u/。similarity to dTDP-4-dehydrorhamnose, StrL from S. griseus. The function of the orfE gene was studied by targeted gene disruption. The resulting mutant failed to produce tobramycin and kanamycin B, but still produced apramycin, suggesting that the orjE gene and linked gene cluster are essential for the biosynthesis of tobramycin and kanamycin B in S. tenebrarius H6.
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【期刊论文】黑暗链霉菌安普霉素生物合成基因aprG的克隆和功能研究
夏焕章, 王新路, 夏焕章*, 程杉, 张小波
中国抗生素杂志,2004,29(5):260~299,-0001,():
-1年11月30日
从安普霉索产生菌S. tenebrarius H6总DNA中已克隆得到8.2kb的安普霉索抗性基因连锁片段。对距离抗性基因下游4.5kb的SacI-Sau3AI片段进行测序分析,发现了一个新的891bp开放阅读框架。推测其编码为296个氨基酸的蛋白质。经BLASTX程序分析,没有发现与之同源的基因,是一个新基因,该基因命名为aprG。构建基因阻断穿梭载体pSPU58,经接合转移导入S. tenebrarius H6,筛选单交换阻断变株,并用Southern blot验证阻断变株的aprG已经被破坏。经发酵分析,阻断变株不再合成安普霉素,表明aprG与安普霉素生物合成直接相关。
黑暗链霉菌, 安普霉素, 生物合成基因, 基因阻断
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夏焕章, 刘晓辉, 任丹, 熊宗贵
微生物学杂志,2003,23(1):4~5,-0001,():
-1年11月30日
经多轮筛选获辑了1株妥布霉素耐药安普霉素敏感的芽袍杆菌。利用该菌与枯草杆茵63501混合作为栓定菌,从妥布霉素和安昔霉素二组分产生菌中快速筛选到了单组分妥布霉素产生菌。
黑暗链霉菌, 妥布霉素, 快速筛选
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夏焕章, 吴胜
微生物学报,2002,42(2):182~185,-0001,():
-1年11月30日
研究了黑暗链霉菌的基因转移系统,探索丁通过PEC-介导的原生质体转化、接合转移向黑暗链霉菌中转人外源DNA的可能性。多次尝试用质粒pU702转化黑暗链霉菌9904原生质体均未成功。对原牛质体进行“热处理”后转化、利用单链DNA转化等都不能将质粒导人黑暗链霉菌中,表明黑暗链霉菌对外源DNA有很强的限制修饰作用。利用接合转移将具有oriT的大肠杆菌。链霉菌穿梭质粒pH2132转人大肠杆菌ET12567(pU28002)中,获得供体苗ET12567(pUZSOa2,pH7132)。将供体菌与预萌发的黑暗链霉菌9904的孢子进行接台转移,成功地将pHZ132转入黑暗链毒菌9904中。质粒pH2132经黑暗链霉菌自身修饰后也可转入黑暗链霉菌9904菌株的原牛质体中,转化率约为10 3/μg DNA(pH7132)
黑暗链霉菌, 转化, 接合转移
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夏焕章, 吴胜
生物工程进展,2002,22(1):91~94,-0001,():
-1年11月30日
本文介绍了用于链霉菌基因转移的各种方法,涉及原生质体转化、电穿孔、接合转移和噬茵体转导,对影响链霉菌基因转移的各种因素进行了分析。
链霉菌, 原生质体转化, 电穿孔, 接合转移, 噬菌体转导
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【期刊论文】黑暗链霉菌原生质体制备、再生及其DNA转化条件的研究
夏焕章, 吴胜, 程杉
沈阳药科大学学报,2001,18(3):213~216,-0001,():
-1年11月30日
利用CP培养基培养黑暗链霉菌(Streptomyces tenebrarius)9904,采用二级培养即首先在37℃培养48h,然后按10%的转种量转种于新鲜的培养基中,同时补加2%日甘氨酸,28℃培养20h,收获的菌丝体对溶菌酶敏感。在适宜的酶解条件下可形成4.62×10 9/mL原生质体,再生率为18%。利用经修饰的质粒DNA转化冻存的原生质体获得成功,转化率为10 3~10 4/μgDNA。
黑暗链霉菌, 原生质体形成和再生, 转化
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【期刊论文】链霉菌Streptomyces tenebrarius H6中与抗生素有关的糖生物合成基因的克隆
夏焕章, 李天伯, 尚广东, 王以光*
生物工程学报,2001,17(3):331,-0001,():
-1年11月30日
Streplomyces tenebrarius H6 produces a complex of aminuglycoside antibioties. such as apramycin, tohramycin and kanamycin B etc. To study the apramycin hiosyrthetic genes the genomic library from the Streptonyces tencbrarius H6 was estahlished using E. coLi Strepiomyces shuttle vector pKC505 by in vitro packing. The prolbability of finding a specific gene from the litirary composed of 3000 colcnies was over 99.9%. Accurding ro thc highly conserved sequence of the genes involved in 6-de-oxyhexose biosynLhesis, primers were dcsiened and 0.6kb fragment homologous to strE gene was obtained by PCR.30 positive cLones were found from the genmnic librarv of S. tennbrarius H6 with the 0.6kb fragment as a probe. Overlapped regions were localized by Southern hybridization and pulative sugar relaled biosynthciic gene cluster uas mapped hy restriction enzyjne digcstions. An ORF or dTDP-ducosc-4, 6-dehydratase gene consisted of I, 132bp. designatcd as aprE, was obtained and submitted to GenBank under the accession number of AF306787. A DNA sequence hiehly homologous to strLcoding dTDP-4-dehydrorhamnose reductase was found linked with aprE gene.
黑暗链霉菌, dTDP-葡萄糖-4, 6-脱水酶基因, 糖牛物合成基因
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【期刊论文】麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因在大肠杆菌中的表达*
夏焕章, 王以光
微生物学报,1998,38(2):81~85,-0001,():
-1年11月30日
用PCR法扩增麦迪霉素产生菌酮基还原酶(MKR)基因,得到约0.8kb的DNA片段,扩增片段重组到利用依赖T7RNA聚合酶的高效表达载体pT7-7中,在大肠杆菌中表达出28.9kD的蛋白质。表达的蛋白质具有生物活性。
麦迪霉素, 酮基还原酶基因, PCR, 大肠杆菌, 基因表达
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