目的：探讨上皮型钙黏附素（E-cadherin， E-cad）在肠型和弥漫型胃癌中的表达情况及其对疾病发生、治疗和预后评估的意义。方法：采用免疫组化S-P法对30例正常胃或胃炎粘膜上皮组织、30例散发性肠型胃癌组织和30例遗传性弥漫型胃癌组织中E-cad表达情况进行研究。结果：正常或胃炎上皮组织中E-cad全部为阳性表达，表达均匀，散发性肠型胃癌和遗传性弥漫型胃癌组织中E-cad表达均明显减低（P<0.05），表达阳性率分别为63%（19/30）和23%（7/30）。散发性肠型胃癌中E-cad的表达与临床分期相关（P<0.05），遗传性弥漫型胃癌中E-cad的表达与疾病临床分期无关（P>0.05）。结论：散发性肠型胃癌E-cad表达降低，呈断续性或者胞浆异位性表达，并与临床分期相关，可能对肠型胃癌的预后评估和治疗具有指导意义。E-cad在遗传性弥漫型胃癌中表达降低更为明显，大部分癌组织中呈现表达缺失，但与分期无关， E-cad表达缺失在遗传性弥漫型胃癌发病的早期可能具有重要作用。

目的：观察依西美坦（优可依）治疗绝经后晚期乳腺癌的疗效和不良反应。方法：173例晚期乳腺癌患者进入研究，2例因自然绝经不足1年而被剔除，故可评价疗效者171例，可评价不良反应者173例。患者口服依西美坦25mg，每天1次，连续4周为1周期。结果：可评价疗效的171例患者中，完全缓解（CR）4例（2.3%），部分缓解（PR）40例（23.4%），总有效率（CR+PR）25.7%；病情稳定（SD）90例（52.6%），临床获益69例（40.4%），病情进展（PD）37例（21.6%）。依西美坦对初治患者的有效率为33.8%（25/74），复治患者为18.1%（17/94），两者差异有显著性（P=0.0197）。对不同转移部位的有效率依次为:软组织32.8%（40/122）、骨23.9%（11/46）、内脏12.4%（11/89），三者之间差异有显著性（P=0.002）。依西美坦的有效率在不同的年龄、绝经时间、无病间期和受体来源于不同阶段病情的患者中，差异均无显著性（P>0.05）。可评价不良反应的173例患者中，胃部不适31例（17.9%），乏力31例（17.9%），恶心24例（13.9%），面部潮热19例（11.0%），烦躁10例（5.8%），其他反应及实验室指标异常的发生率均< 5%。结论：依西美坦能有效治疗绝经后晚期乳腺癌，药物不良反应轻微，患者耐受性良好。

目的：研究肝脏良恶性疾病患者血浆循环核酸p53基因突变，探讨其突变检测诊断肝癌的可行性和价值。方法：肝脏疾病患者61例，其中原发性肝癌36例，良性组为肝血管瘤、肝囊肿和乙型肝炎肝硬化患者共25例，提取血浆DNA，采用PCR扩增p53基因外显5&6，7和8（E5&6，E7和E8），用变性高效液相色谱法（DHPLC）对产物进行突变筛选。结果：肝恶性肿瘤患者36例血浆提取的DNA扩增出E5&6，E7和E8例数分别为10，36和35，良性组对应为0，6和4例。DHPLC检测到4/36例E5&6突变，12/36例E7突变，未检测到E8突变，良性组检测到2/25例E7突变。结论：良恶性组间扩增阳性率有明显差异（P<0.05），p53基因突变与乙型肝炎感染有关，HBsAg+肝癌患者p53基因突变率明显高于HBsAg2肝癌患者（P<0.05），循环核酸p53突变检测有望成为肝癌高危人群特别是乙型肝炎感染和携带者预警或早期诊断的参考指标。

原发性肝癌（HCC）是居全世界恶性肿瘤发病率第5位，每年死亡人数100万，在亚洲和中非地区发病率为20～28/10万，北欧、北美和澳大利亚为< 5/10万。过去20年内，美国发病率由114/10万上升到214/10万。目前，大部分进展期肝癌患者缺乏有效的治疗手段，总的生存率仅为3%～5%[1]。近年来，随着对肿瘤生物学认识的逐步深入以及分子生物学及细胞生物学的迅速发展，为肝癌的综合治疗提供了许多新的手段，其中生物免疫治疗显示了令人鼓舞的前景。

目的：将肝细胞癌（HCC）患者树突状细胞（DCs）与肝癌细胞HepG2融合制备瘤苗，检测其体外诱导同源T细胞产生特异性抗HepG2的免疫效应。方法：以血细胞分离机分离富集HCC患者外周血单个核细胞（PBMCs），应用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子（rhGM2CSF）、白细胞介素24（rhlL24）体外诱导培养DCs；聚乙二醇融合DCs与肝癌细胞HepG2，MTT法测定融合细胞（DCs/HepG2）刺激同源T淋巴细胞增殖分化能力，细胞毒性实验检测DCs/HepG2诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL对HepG2的特异性杀伤作用。结果：融合细胞DCs/HepG2高表达成熟DC表面分子，其中CD8390.4%，CD80 87.7%，CD86 84.4%，HLA2DR 98.5%；其刺激同源T淋巴细胞增殖的能力显著高于HepG2和DCs；DCs/HepG2活化的CTL对HepG2具有显著杀伤作用，其杀伤率为（63.5±4.6）% （效靶比例为20:1）。结论：HCC患者外周血DC融合HepG2细胞可有效诱导同源T淋巴细胞产生特异性抗HCC免疫效应，可能成为HCC免疫治疗的有效途径。

Dendritic cell (DC) vaccination with the use of total tumor RNA provides the potential to generate a polyclonal immune response to multiple known and unknown tumor antigens without HLA restriction. Our study evaluated this approach as potential immunotherapy for patients with hepatocellular carcinoma (HCC). Immature DCs generated from peripheral blood mononuclear cells of patients with HCC were transfected with HepG2-GFP (HepG2 cells transfected stably with plasmid pEGFP-C3) cells total RNA. Transfected, matured DCs were used to stimulate autologous T cells. Results revealed that DCs transfected with HepG2-GFP cells total RNA expressed EGFP when observed by Xow cytometry. Compared with those before transfection, the expressions of membrane molecules were increased dramatically, and interleukin-12p70 release in the supernatant was elevated signiWcantly. SpeciWc T cells generated by DCs transfected with HepG2-GFP total RNA recognized HLA-matched HepG2 cell lines speciWcally. These Wndings indicate that these RNA-transfected DCs successfully generate speciWc T cells that speciWcally recognize HCC cells. Total tumor RNA-pulsed DCs may have potential as an adjuvant immunotherapy for patients with HCC.

目的：探讨GFP作为标记观察肝癌细胞RNA转染DCs效果的可行性及肿瘤细胞RNA转染DCs制备疫苗的可行性。方法：绿色荧光蛋白质粒载体pGFP2C3稳定转染肝癌细胞HepG2，Trizol法提取筛选后细胞HepG2-GFP总RNA；分离肝癌患者外周血单核细胞体外诱导DCs细胞，总RNA转染DCs，荧光显微镜下观察转染效果，流式细胞仪检测转染前后DCs表型变化； EL ISA法检测转染前后上清中IL212变化情况；MTT法检测效应细胞对靶细胞的杀伤率。结果：pGFP2C3稳定转染肝癌细胞HepG2后可得到稳定表达GFP的细胞HepG2-GFP，荧光显微镜下呈绿色荧光；总RNA转染的DCs荧光显微镜下呈绿色荧光，CD80（13.2%上升至86.7%），HLA2DR（38.9%上升至97.9%），CD83（0.9%上升至97.1%），CD86（31.2%上升至92.5%）表达明显升高，上清IL212分泌量ng/L显著增高（61.3±8.1→287.4±29.3，P<0.05）；诱导的CTL能够对肝癌细胞株HepG2起特异性杀伤作用。结论：GFP可以作为肿瘤细胞RNA转染树突状细胞的观察标记，肿瘤细胞RNA转染DCs可作为一种有效的肿瘤疫苗。

目的：分析青年胃癌的发病特点和病理特征与中老年胃癌的不同特点，为青年胃癌的预防和治疗提供理论依据。方法：对我院1983202 /2003202收治的1839例患者资料进行筛选和研究，对患者性别、发病年龄和病理学类型与分布进行统计分析，并评价遗传因素在胃癌发病中的作用。结果：青年胃癌以弥漫型多见（40.49%），病理分型多为低分化腺癌、黏液细胞癌和印戒细胞癌，恶性程度高，女性发病年龄更低，男女性比例接近。具有家族遗传背景或遗传性胃癌患者中青年发病者多于中老年（39/189 vs 69/1454，P<0.0001；16/189vs 21/1454，P<0.0001），男性更易受遗传因素影响。结论：青年胃癌以高度恶性弥漫型为主，发病呈上升趋势，且与遗传背景有一定的相关性。

目的：以AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的树突状细胞（DC），诱导DC产生特异性抗肝癌免疫，观察其对肝癌细胞的杀伤。方法：采用化疗和集落刺激因子动员肝癌患者外周血造血干细胞，血细胞分离机采集CD34+造血干细胞，IL24、GM2CSF联合TNF2α刺激CD34+细胞分化为DC。通过脂质体转染的方法将携带人AFP基因质粒pEGFP-AFP转染树突状细胞，MTT法检测对人肝癌细胞HepG2的特异性杀伤。结果：经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起，高表达CD11C，CD80，CD86。转染AFP基因后可见到转染细胞表达绿色荧光蛋白，细胞化学染色胞质内可见到红色颗粒。MTT法检测AFP基因转染后的DC可诱发特异性CTL反应杀伤HepG-细胞，AFP基因转染组、空载体组和对照组的杀伤率分别为（92.0±3.5）%，（75.5±4.1）%和（72.9±3.4）%，转染组与空载体组和对照组间存在显著性差异（P<0.05）。结论：AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的DC可诱导特异性CTL反应杀伤肝癌细胞。