目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TMF-α）A基因多态性与广东地区汉族人群散发性阿尔茨海默病（SAD）发病易感性的关系。方法：采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）方法，检测44例SAD病人及45例正常老年人（对照组）TNF-α基因的TNF-Α1及TNF-α2等位基因频率。按比值比（odds ratiom OR）作疾病关联分析。结果；SAD病人TNF-α2基因频率为0.182，明显高于对照组的0.078（OR=2.635，P=0.039）；而SAD病人TNF-α1基因频率为0.818，明显低于对照组的0.922（OR=2.635，P=0.039）。结论：广东地区汉族人群中，TNF-α基因多态性与SAD有关联，TNF-α2等位基因与SAD的易感性有关，TNF-α1等位基因对SAD有保护作用。

【目的】探讨Persephin对6-羟基多巴（6-OHDA）损伤神经干细胞的保护作用。【方法】用RT-RPR法从人胚胎脑获得Persephin Cdna，构建重组Persephin腺病毒。用Western blot方法分Persephin基因的表厉害。Hoechst染色和流式劝胞术测定6-羟基多巴对神经干细胞调亡的诱导作用。【结果】从人胎脑成功克隆了人Persephin Cdna，构建了其腺病毒载体。Western blot证实重组Persephin腺病毒在神经干细胞中的表达，表达的Persephin可抑制6-羟其多巴诱导的神经干细胞调亡。【结论】Persephin对6-羟其多巴诱导的神经干细胞且有保护作用

目的 探讨帕金森病（PD）患者基础血浆泌乳素（prolactin，PRL）水平及与PD伴随的痴呆及抑郁的关系。方法 测定167名在我院休检的正常老（正常对照组）及113例PD患者（PD组）基础血浆PRL水平，并采用汉密钝抑郁量表（HAMD）简明知能状况评价量表（MMSE）把PD患者分别划为痴呆组和非痴呆给及伴发抑郁组和非抑郁组，同时筛选取同期我科收治的阿尔茨默病（AD）患者20例及心理门诊治疗的功能性抑郁症患者50例（功能性抑郁组）。分别比较各组的PRL水平。结果 PD组者的基础血浆PRL平均水平为（9.44±3.97）μg/L，与正常对照组[（9176±5.17）μg/L]比较均无统计学差异；PD伴发痴呆组平均PRL水平为[（5.26±4.90）μg/L]，明显低于PD非痴呆组[（10.19±4.19）μg/L]及AD组[（7.85±4.25）μg/L]。结论 PD患者出现痴呆时其基础血浆PRL水平降低。PD患者可能有DA、Ach、5-HT能神经递质平衡的紊乱。

目的：构建人胰岛素样生长因子腺病毒表达载体，并观察其在C17.2神经干细胞的表达。方法：实验于2004-03/11在中山在学附属第二医院林百欣医学中心完成。将胰岛素样生长因子克隆往复制缺陷性腺病毒穿梭质粒得到含水量胰岛素样生长因子的腺病毒穿梭质粒，再与腺病骨架质一在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组得到含胰岛素样生长因子的整合质料，在HEK293A细胞中包装加膜，聚合酶链反应鉴定，大量扩增病毒。将含目的基因的病毒转染C17.2神经干细胞，原位杂交检测胰岛素样生长因子mRNA，蛋白印迹检测胰岛素样生长因子蛋白的表达，酶联名疫吸附实验检测胰岛素样生长因子蛋白的表达曲线。结果：经酶切鉴定及聚合酶链反应鉴定证实腺病毒载体构建正确。原位杂交检测到胰岛素样生长因子Mrna，蛋白印迹分析检测到胰岛素样生长因子蛋白在转染了重组腺病毒的C17.2神经干细胞内表达。酶联免疫吸附实验结果显示胰岛素样生长因子蛋白在病毒转染5～d达高峰，13d仍高于转染前。结论：成功构建了含胰岛素样生长因子的重组腺病毒载体，转染了该腺病毒C17.2神经干细胞可稳定表达胰岛素样生长因子。

背景：记忆力下降是放射性脑病早期的主要临床表现，已有许多人认为神经节苷酯在神经修复中对记忆功能具有改善作用。目的：研究神经节苷酯对鼠脑放射性损伤后空间学习记忆能力减退的影响。设计：以动物为观察对象的随机对照实验。单位：中山大学第二附属医院的神经科和放射科。材料：实验于2001-03/2002-05在中山在学附属第二医院实验室完成。选取SD大鼠80只，分为空白对照组、神经节苷酯治疗组、生理盐水治疗组、未干预组，20只/组。 干预：神经节苷酯治疗组、生理盐水治疗组、未干预组大鼠麻醉后头部拉嫒 60Coγ射线照射，7Gy/次，1次/d，连续照射6d，总剂量42Gy。空白对照组麻醉后不予照射。接受照射的3组每天射后隔1h给药，神经节苷酯治疗组腹腔注射神经节苷酯30mg/kd；生理盐水治疗组注射等量的生理盐水，1次/d，连续6d；空白对照组和未干预组不给药。评固：①照射结束后采用Morris水迷宫的定位航行实验，通过记录大鼠录找平台所需时间（潜伏期）来测定大鼠对水迷宫的学习记忆能力。②采用窨搜索实验，通过记录大鼠在120s内搜索平台的路线图，测量其平台象限不游泳距离占总距离的百分经，从而测定大鼠学会寻找平台后，对平空间位置记忆的能力。③迷宫试验结束后将神经节苷酯治疗组、生理盐水治疗组、未干邓在组大鼠断头取脑，观察各组大鼠的脑组织病理改变。结果：①各组第4天起潜伏期渐趋平稳，第5天时神经节苷酯治疗组录找平台潜伏期（13.6±1.4）s，短于生理盐水治疗组和未干预组[（17.1±2.9）]，（15.8±2.2）s，p<0.05]。②神经节苷酯治疗组和空白对照组能依靠空间搜索录找平台，运动轨迹多位于原平台所在象限中。神经节苷酯治疗组平台象限游泳距离百分比高于生理盐水治疗组神经元轻度变性，部分细胞呈空泡变性，出现细胞皱缩，染色质浓缩，核边聚，星形细胞数量减少；未干预组病理改变与生理盐水治疗组基本相似；神经节苷酯治疗组部分神经元出现胞体变小，胞浆红染等变性改变，但数量、核皱缩、核边聚、空泡现象较前两组少。结论：放射性脑损伤使大鼠的学习记忆能力明显下降，神经节苷酯治疗可减速轻照射后脑组织病理改变，对放射所致的空间学习记忆能力减退有明显改善作用。

目的 探讨重组腺病毒介导血管内皮生长因子（VEGF）165基因治疗对缺氧状态下对神经干细胞调亡的作用。方法 体外培养C17.2神经干细胞，建立神经细胞缺氧模型。将携带人类VEGF基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞，Westerm-blotting分析VEGF蛋白的表达，并用流式细胞术测定细胞调亡率的变化。Hoechst33342染色荧光显微镜观察调亡小体。结果 转染pAdCMVVEGF165的C17.2神经干细胞成功表达VEGF蛋折；缺氧后神经干细胞调亡率为（19.98±0.55）%，而转染pAdCMVVEGF165的后细胞亡率为（10.38±0.48）%（p<0.1)，转染pAdCMVVEGF165+VEGF反义寡核酸经干细胞调亡率为（19.07±0.64）%，与对照组无显著差异（p>0.05）。结论 腺病毒介导的VEGF165基因能高效表达VEGF；外源性VEGF对C17.2神经干细胞具有抗调亡作用，能够提高C17.2神经干细胞对缺氧的耐受性，有利于神经干细胞的生存。

背景：帕金森病患者脑内黑质多巴胺能神经元变性异致芳香族氨基酸脱羧酸（aromatic L-amino acid decarboxylase, AADC）活性水平的降低及波动是产生帕金森患者临床症状和在L-dopa替代治疗时“症状波动”等不良反应出现的重要原因之一。目的：探讨AADC基因脑内移植对帕金森病的治疗作用及其在左旋多巴治疗过程中的地位，并控讨阳离子脂质体介导的基因治疗方法的有效性。设计：2×析因设计。地点和材料：中山在学附属第二医院林百欣医学研究中心，材料主要包括人嗜铬细胞瘤组织，Trlzol，真核表达载体质粒Pcdna3，阳离子脂质体，6-OHDA，阿补吗啡，AADC单克隆抗体，SD大鼠。干预：使用基因克隆、亚克隆技术构建Pcdna3-AADC真核表达框图体将帕金病模型的SD大鼠随机分为实验组与对照组，分别以Pcd-NA3-AADC重组体和Pcd-NA3空载体进行阳离子脂质体包裹后，注射浓度的L-dopa进行治疗。采用免疫组化方法确定AADC的表达。主要观察指标：①AADC基因脑内移植后两组大鼠的旋转行为。②采用一定浓度的L-dopa进行治疗对大鼠旋转行为的影响。结果：①阳离子脂质体包裹的Pcd-NA3-AADC重组体脑内注射扣，在3，7，14，21，38d时大鼠的旋转行为获得了一定的改善（p>0.05），分别改善了56.0%，62.6%，49.4%，36.3%，27.4%，以1周时最为明显，在第5周时，其旋转行为则于移植前无明显差异p>0.05）。②使用同等浓度的左旋多巴（L-dopa，10mg/kg体质量·d）冶疗后，在上述相同的时间点时，实验组较对照组明显改善模型大鼠的旋转行为（p>0.05），以1周时最为明显，其旋转行为改善达93.4%，在第5周时，两组间差异无显著意义（p>0.05）。③免疫组化方法确定AADC在纹状体区的稳定表达。结论：增加脑内AADC基因表达可有效改善帕金森病大鼠的旋转行为，并可增加L-dopa冶疗效果，有助在低剂量上长期维持L-dopa的疗效；阳离子脂质体介导师的裸基因脑内移植技术为基因治疗帕金森病提供一种手段。

背景：目前国内外关于放射性脑损伤动物模型的研究均处于探索中，尚未形成成熟的模型制作方法。目的：建立急性放射性脑损伤的鼠模型，为进一步研究放射性脑损伤正确有效的预防措施提供实验依据。设计：以实验动物为研究对象，随机对照观察研究。单位：一所大学医院动物实验室。材料：实验于2001-06/2002-08在中山大学附属第二医院实验室完成。SD大鼠60只，体质量（300±30）g，雌雄各半，空白对照组20只，实验组40只。方法：SD大鼠头部接受60Coγ射线照射，7Gy/次，1次/d，连续照射6d，总剂量42Gy。照射结束后每日观察大鼠摄食、饮水量及次数，自主活动情况，有无出现神经系统症状与体征，每周检查并记录大鼠头部照射区毛发与皮肤情况、体质量变化，照射结束后第3，7，14，30天断头取脑，行病理组织学检查。主要观察指标：①一般情况观察。②照射后脑组织病理改变。结果：照射第3天起即出现每日摄食、饮水量减少；照射第1，2天，自主活动较对照组增多，第3天起活动渐减少；无异常神经系统体征；随观察时间延长体质量增长较对照组慢，但差异无显著性意义；所有大鼠均于照射后约2周时出现照射野轻度脱毛；照射后出现脑组织神经元变性坏死。结论：该模型制作方法切实、可靠，较好地模拟放射性脑损伤的过程，可用于预防或减轻谢谢治疗对脑组织损伤的实验研究。

【目的】初步鉴定C17.2神经干细胞的特性并研究不同浓度6-羟基多巴对C17.2神经干细胞毒性及NURR1基因对C17.2神经干细胞的保护作用。【方法】免疫组化检测神经干细胞特异抗原nestin，X-gal染色检测LacZ基因的表达，流式细胞仪检测剂量为0.02、0.04、0.06g/L6-羟基多巴在添加含有NURR1基因的重组复制缺陷病毒前后诱发神经干细胞的坏死和调亡。【结果】C17.2神经干细胞nestin抗原染色阳性，绝大部分细胞呈X-gal染色阳性，0.02g/L时6-羟基多巴以诱导神经干细胞调亡为主，随着剂量增加，细胞坏死增多，0.06g/L时则以神经干细胞的坏死为主，NURR1基因过表达能明显减少神经干细胞的坏死和调亡。【结论】C17.2神经干细胞具有明显的特性，6-羟基多巴诱发的C17.2神经干细胞调亡或坏死与其剂量有关，NURR1基因对神经干细胞有保护作用。