目的 探讨细胞外基质对淋巴管新生的作用。方法 在Ⅰ型胶原蛋白凝胶中和Matrigel基膜基质凝胶上培养狗胸导管内皮细胞，相差倒置显微镜下观察内皮细胞形成的管状结构的形态，透射电镜下观察淋巴管样结构，用图像分析仪对管状结构作定量分析。结果 淋巴管内皮细胞在Ⅰ型胶原蛋白凝胶上生长成单层，但未见管状结构形成。在细胞上面覆盖上层凝胶后，内皮细胞发生形态变化，形成管状结构。肝素组的管状结构比对照组多，而肝素加bFGF组的管状结构比肝素组和bFGF组多。在Matrigel基膜基质凝胶上培养的内皮细胞向凝胶上层迁移，形成管状结构。管状结构较细，细胞较长。管状结构呈明显的牵拉状态。透射电镜下，淋巴管内皮细胞形成的管状结构具有毛细淋巴管的形态学特征。结论 狗胸导管内皮细胞在Ⅰ型胶原蛋白凝胶和atrigel基膜基质凝胶中形成毛细淋巴管样结构。细胞外基质对于淋巴管内皮细胞的形态变化、细胞迁移和淋巴管新生具有促进作用。

目的 研究血管内皮生长因子-C（VEGF-C）对于淋巴管内皮细胞增殖和迁移的作用，探讨VEGF-C促进淋巴管新生的机制。方法 从狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞。标记内皮细胞的VEGFR-3和F-肌动蛋白，在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察。用VEGF刺激后，计数增殖细胞和迁移细胞，测量细胞迁移距离，并与bFGF和VEGF-C的作用进行比较。结果 淋巴管内皮细胞表达VEGFR-3，静脉内皮细胞为阴性。bFGF 和VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖，VEGF-C的作用比bFGF强。与对照组相比，bFGF、VEGF和VEGF-C组引起迁移细胞的数目增多和迁移距离增大，VEGF-C的作用最强。在VEGF-C组的迁移细胞，F2肌动蛋白和应力纤维明显增多。结论 淋巴管内皮细胞特异性表达VEGFR-3，VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖和迁移，引起F-肌动蛋白的重组和应力纤维形成。

In this paper, a novel drug carrier for brain delivery, cationic bovine serum albumin (CBSA) conjugated with poly(ethyleneglycol)-poly(lactide) (PEG-PLA) nanoparticle (CBSA-NP), was developed and its effects were evaluated. The copolymers of methoxy-PEG-PLA and maleimide-PEG-PLA were synthesized by ring opening polymerization of d,l-lactide initiated by methoxy-PEG and maleimide-PEG, respectively, which were applied to prepare pegylated nanoparticles by means of double emulsion and solvent evaporation procedure. Native bovine serum albumin (BSA) was cationized and thiolated, followed by conjugation through the maleimide function located at the distal end of PEG surrounding the nanoparticle's surface. Transmission electron micrograph (TEM) and dynamic light scattering results showed that CBSA-NP had a round and regular shape with a mean diameter around 100 nm. Surface nitrogen was detected by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), and colloidal gold stained around the nanoparticle's surface was visualized in TEM, which proved that CBSA was covalently conjugated onto its surface. To evaluate the effects of brain delivery, BSA conjugated with pegylated nanoparticles (BSA-NP) was used as the control group and 6-coumarin was incorporated into the nanoparticles as the fluorescent probe. The qualitative and quantitative results of CBSA-NP uptake experiment compared with those of BSA-NP showed that rat brain capillary endothelial cells (BCECs) took in much more CBSA-NP than BSA-NP at 37 8C, at different concentrations and time incubations. After a dose of 60 mg/kg CBSA-NP or BSA-NP injection in mice caudal vein, fluorescent microscopy of brain coronal sections showed a higher accumulation of CBSA-NP in the lateral ventricle, third ventricle and periventricular region than that of BSA-NP. There was no difference on BCECs' viability between CBSA-conjugated and-unconjugated pegylated nanoparticles. The significant results in vitro and in vivo showed that CBSA-NP was a promising brain drug delivery carrier with low toxicity. D 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

骨形态发生蛋白-2B（MP-2）对心肌干细胞（CSCs）的分化起重要作用，其信号通过受体激活并经Smads、P38mapk 和PI-3K等3条信号通路转导，调节多种心肌转录因子的表达，进而诱导CSCs的终末分化。细胞内的BMP-2 信号途径与其它信号途径形成网络，调控机制精密而复杂。明确BMP-2 在CSCs 向心肌分化中的信号转导机制，将为临床应用CSCs 治疗心肌梗塞等疾病提供理论基础。

目的 研究人支气管肺淋巴结尘细胞和大鼠腹膜腔巨噬细胞吞噬碳粒后的凋亡和bcl22 表达，探讨巨噬细胞凋亡与淋巴结结构变化之间的关系。方法 取人支气管肺淋巴结，作石蜡切片和超薄切片，观察尘粒分布、凋亡尘细胞和组织结构变化。用TUNEL染色法和bcl22抗体标记法观察淋巴结内尘细胞和碳粒处理后的巨噬细胞的凋亡变化和bcl22表达。结果 成人淋巴结巨噬细胞的尘粒明显沉积，淋巴组织减少，胶原纤维增生，血管密度增加。在超薄切片上，尘细胞的细胞核固缩，出现空泡。淋巴结尘细胞和巨噬细胞吞噬碳粒后24h都出现TUNEL染色和bcl22抗体标记阳性细胞。分解尘粒和碳粒活跃的巨噬细胞，bcl22表达特别明显。结论 尘粒沉积引起人支气管肺淋巴结巨噬细胞的凋亡和凋亡抑制基因bcl22高表达，尘细胞凋亡与成人支气管肺淋巴结的结构变化有关。

心肌细胞被认为是终末分化细胞，损伤后不能再生。但最近研究发现，成人心脏中存在多能心肌干细胞（cardiac stem cell，CSC），CSC 能够再生为心肌。另外，全能胚胎干细胞（ES 细胞）、多能成体祖细胞（MAPC）和成体多能干细胞（aMSC）具有向心肌分化的潜力，可用于心肌损伤后的修复治疗。ES细胞和MAPC作为CSC的前体细胞，在心肌梗塞的干细胞移植治疗方面需经过向心肌谱系的提交过程。本文综述了干细胞向心肌谱系的提交、分化及其调控机制。

目的 研究透明质酸（HA）在单核细胞中的分布，HA受体CD44和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在单核细胞中的表达以及HA及其受体对单核细胞黏附和迁移的影响。 方法 用Percoll非连续密度梯度离心法分离狗外周血单核细胞，然后用免疫荧光染色法标记单核细胞的HA、CI）44和ICAM-1。通过用透明质酸酶（HAase）消化细胞表面的HA、在培养皿底面和细胞培养池膜上涂布HA和在培养液中添加HA，观察细胞表面的HA、底物HA和游离HA对细胞黏附和迁移的影响。以抗体阻断剂抑制CIM4或ICAM-1，研究HA受体的介导作用。 结果 单核细胞表面和细胞内存在HA，并表达CD，：M和ICAM-1。消化细胞表面HA后，黏附和迁移的单核细胞数减少。在培养皿底面和细胞培养池膜上铺HA，黏附和迁移的细胞数增加。培养液中加入HA，黏附和迁移的细胞数减少。阻断CI）44后。HA底物上黏附和迁移的细胞数减少，而阻断ICAM-1后黏附和迁移的单核细胞数无明显变化。结论 单核细胞内外分布有HA。单核细胞表面的HA和底物HA促进细胞的黏附和迁移，但游离HA阻碍单核细胞的黏附和迁移。CI）44介导HA对单核细胞黏附和迁移的作用。

目的 研究骨形态发生蛋白-2（BMP-2）对骨髓源性心肌干细胞（MCSC）向心肌分化的作用，探讨MCSC向心肌分化中的BMP-2信号转导机制。方法 从SD大鼠骨髓中筛选MCSC，用BMP-2诱导向心肌定向分化。RT.PCR检测诱导前后BMP-2受体BMPRIA和BMPRII、心肌早期转录因子Nkx2.5和GATA-4以及cTnT mRNA的表达。免疫细胞化学标记诱导后细胞cTnT和cx-43的表达。结果 用BMP-2诱导后，MCSC的形态和排列发生变化。RT-PCR检测结果显示，诱导前BMPRIA和BMPRII以及Nkx2.5和GATA-4呈低表达，诱导后1周表达增加，3～4周表达明显。cTnT mRNA在诱导前不表达，诱导后l周开始表达，3～4周表达明显。免疫细胞化学染色显示，cTnT和c-43从诱导后2周开始表达。3～4周cTnT表达增强，呈现密集的横纹样结构。cx-43在2周位于细胞膜下，3周分布于相邻细胞连接处，4周呈颗粒状密集分布于肌管的相邻细胞连接处。结论 BMP-2通过BMPRIA和BMPI的介导作用诱导MCSC分化为心肌细胞。

目的 研究5-氮杂胞苷诱导骨髓源性心肌干细胞（MCSC）向心肌分化过程中，心肌肌钙蛋白T（cTnT）的表达变化和超微结构。方法 从SD大鼠骨髓间充质干细胞（MMSC）中筛选MCSC，用5-氮杂胞苷诱导向心肌定向分化。取分化后不同时间的细胞作cTnT免疫细胞化学染色，并对结果进行图像分析。透射电镜下观察分化细胞的超微结构。取不同发育期和成熟期的sD大鼠心肌作对比研究。结果 用5.氮杂胞苷诱导后2周，细胞内开始表达cTnT；诱导后3周，eTnT表达增强，可见横纹样结构；诱导后4周，cTnT表达明显增强，横纹增多，但排列不规则。诱导后4周的细胞内出现心房粒，可见丰富的粗面内质网和糖原。胚胎11 d大鼠的心肌内，横纹样结构较少且排列不规则。新生大鼠心肌内横纹增多，排列较规则。1月龄和3月龄心肌的横纹样结构发达，排列规则。诱导分化后4周的细胞cTnT表达特征与胚胎11 d的心肌相似。结论 MCSC经5-氮杂胞苷诱导后可分化为心肌细胞，表现为未成熟心肌的结构和功能特征。