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2007年04月29日

刘卫群，，王永亮，郭红祥，赵同金，周海梦，郭蔼光

中国生物化学与分子生物学报2006年2月/Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 22 (2): 111-116，-0001，（）：

-1年11月30日

从烟草品种本塞母氏中分离出2条DREB类转录因子基因, 分别命名为NbDREB1和NbDREB2。根据测序结果推导出的氨基酸序列分析显示，NbDREB1和NbDREB2都具有典型的AP2／EREBP转录因子家族EREBP亚族A类特征。酵母单杂交结果显示，它们都不具有激活功能。连接pGADT7反式激活载体形成融合基因表达结果显示，NbDREB1能与DRE顺式作用元件结合，NbDREB2则不能。比较NbDREB1和NbDREB2的AP2区，发现两者的第2和49位氨基酸残基不同。对NbDREB2的第2位氨基酸残基N点突变为Y，NbDREB2也显示出与DRE顺式元件结合的活性，表明烟草DREB转录因子的AP2区第2位氨基酸残基Y是识别及结合DRE顺式作用元件必需的氨基酸残基。

烟草，转录因子；AP2/， EREBP结构域；DRE顺式元件；关键氨基酸

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2007年04月29日

【期刊论文】The conserved Ala37 in the ERF/AP2 domain is essential for binding with the DRE element and the GCC box

刘卫群， Yang Liua， Tong-Jin Zhao，， Jing-Mei Liu， Wei-Qun Liu， Qiang Liua， Yong-Bin Yan， Hai-Meng Zhou

FEBS Letters 580 (2006) 1303-1308，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Four AP2/EREBP genes encoding putative ethyleneresponsive element binding factor (ERF)/AP2 domains were cloned from Brassica napus, and these genes could be induced by low temperature, ethylene, drought, high salinity, abscisic acid and jasmonate treatments. These four genes, named BnDREBIII-1 to BnDREBIII-4, were highly homologous and the 37th amino acid was the only difference among their ERF/AP2 domains. BnDREBIII-1 was demonstrated to be able to bind to both dehydration-responsive element and the GCC box and transactivate the expression of downstream genes, while BnDREBIII-4 could bind neither. Further results suggested that Ala37 might play a crucial role in the DNA binding or the stability of the ERF/AP2 domain.

BnDREBIII， Dehydration-responsive element， GCC box， ERF/， AP2 domain， Brassica napus

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2007年04月29日

【期刊论文】烟草DREB—like转录因子的克隆与鉴定

刘卫群，，王永亮，赵同金，周海梦，郭蔼光

农业生物技术学报/Journal of Agricultural Biotechnology 2006, 14(3): 376-380，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

在NCBI网站BLAST得到5个烟草表达序列标签(EST), 据此设计引物, 从烟草(Nicotiana benthamiana)品种本塞母氏中分离出2条DREB (dehydration—responsive element binding protein)-like转录因子基因, 分别命名为NbDREBI和NbDREB2。与相关AP2/EREBP类转录因子比对结果显示, NbDREBI和NbDREB2都具有典型的AP2/EREBP转录因子家族EREBP亚族A类AP2区特征, 并且都能在大肠杆菌(Escherichia coil)中表达。酵母单杂交结果显示, 都不具有激活功能。连接pGADT7反式激活载体进行酵母单杂交结果显示：NbDREBI能与DRE顺式作用元件结合, NbDREB2则不能, 表明NbDREBI为抑制型DREB类转录因子。比较NbDREBI和NbDREB2的AP2区发现：两者在第2位和第49位氨基酸处不同, NbDREBI为Y和K, NbDREB2为N和R。

烟草， DREB，克隆，酵母单杂交，反式激活

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2007年04月29日

【期刊论文】一种改进的烟草多酚氧化酶¨纯化方法

刘卫群，郭红祥，饶学明，于振行，周海梦

生物技术通讯/LETTERS IN BIOTECHNOLOGY Vol. 17, No. 2, Mar., 2006，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：选择不同的分离、纯化步骤并比对分析，筛选出纯化烟草中多酚氧化酶(PPO)的优化组合方案。方法：采用分段盐析、DEAE-Sephamse Fastflow和Sephadex G-150柱层析纯化PPO，通过测定和比较酶活性筛选最佳条件。结果：确定了最佳盐析浓度 (40％) 和柱层析条件，SDS-PAGE、FPIC以及动力学常数的检测结果表明，纯化出的蛋白质相对分子质量为42 000, Km为1.2 mmol/L，得到了纯化9l倍的烟草多酚氧化酶Ⅱ。结论：优化方案减少了有机溶剂分级沉淀、阳离子交换层析等步骤，使纯化过程大大缩短。

烟草，多酚氧化酶，分离，纯化

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2007年04月29日

【期刊论文】烤烟根系激素水平、GS、PMT对氮素形态的响应

刘卫群，郭红祥，岳俊勤，石永春

华北农学报2006, 21 (1): 72-75，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

通过水培试验, 探讨了不同氮素形态对烤烟苗期根系激素水平与氮代谢酶的影响。研究结果表明, 外源铵态氮对烤烟根系及叶片的谷氨酰胺合成酶(GS)具有一定的诱导作用, 饼肥浸提液对烤烟叶片GS有激活作用、对根系GS有抑制作用; 外源铵态氮对根系烟碱合成关键酶N-甲基腐胺转移酶(PMT)活性有激活作用; 不同氮素形态对根系激素的影响不同, 纯铵态氮处理的IAA含量最高, 纯硝态氮处理的ABA含量最高, 铵态氮与硝态氮l: l处理的ZR含量最高, 浸提液对IAA, ABA, ZR, IAA／ABA, ZR／ABA有明显的激活作用。

烤烟，根系，氮素形态，谷氨酰胺合成酶， N-甲基腐胺转移酶，激素

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