通过构建携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体，获得可供转染的滴度，为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础。方法：根据线粒体细胞色素C氧化酶设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链，插入到pENTR/U6质粒缺口末端，连接在质粒上生成含RNAi盒的pENTR/U6载体；通过重组作用将pENTR/U6载体的RNAi盒重组到pLenti6/BLOCK-iT-Dest载体上，构建含U6启动子、靶序列和P0lⅢ终止子表达框的MTCOX-I shRNA表达重组体；经脂质体导入293FT细胞，包装成慢病毒，收集病毒上清并检测其滴度。Western blotting检测干扰后细胞内线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结果：将目的序列成功连接到载体上，并经测序分析证实载体构建成功；成功包装成高滴度的慢病毒。Western blotting检测结果证实构建的MTCOX-I shRNA表达重组体可显著抑制线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结论：成功构建了携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体。

目的：探讨鼻咽癌组织中MMP-9、CD44v6蛋白表达与鼻咽癌侵袭转移和患者预后的关系。方法：采用免疫组化LSAB法检测l00例存档、石蜡包埋鼻咽癌组织中MMP-9、CD44v6蛋白表达，并分析其与各临床指标和患者总生存率之间的关系。结果：鼻咽癌组织中MMP-9蛋白表达阳性率为85.0％(85/1O0)，其中(+)23.0％，(++)53.0％，(+++)9.0％。CD44v6蛋白表达阳性率63.5％(60/96)，其中(+)37.5％，(++)8.3％，(+++)16.7％。MMP-9表达(+++)的鼻咽癌患者总生存率显著低于MMP-9表达(-)、(+)、(++)的患者。CD44v6表达为(-)、(+)、(++)、(+++)的各组鼻咽癌患者之间的总生存率无差异。鼻咽癌组织中MMP-9和CD44v6表达与患者年龄、性别、T分期、N分期及92’分期无关。结论：鼻咽癌组织中MMP-9、CD44v6蛋白表达与患者年龄、性别、颈淋巴结转移无关。MMP-9蛋白表达强阳性提示患者预后差。

背景与目的：在人体液中可以检测到多种与肿瘤转移相关的因子，有文献报道这些因子与肿瘤分期、预后有关。本研究检测鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者血清可溶性因子VEGF、CD44s、MMP-3表达水平，探讨其与肿瘤l临床分期和预后的关系。方法：采用双抗体夹心ELISA法对46例无转移NPC患者、20例局部复发和／或器官转移的NPC患者和l8例健康者外周血中VEGF、CD44S、MMP-3水平进行测定。结果：局部复发和／或远处转移的NPC患者血清VEGF平均水平[(791.7±560.5)ng/L]显著高于健康对照组[(424.6±l97.1)ng/L]和无转移NPC 组[(429.0±249.7)ng/L]；而健康组与无转移NPC组患者VEGF平均水平差异无显著性。初治患者中，T4期患者血清VEGF水平显著高于Tl～T3期；初渝NPC患者治疗前血清VEGF≥600ng/L与<600ng/L两组，治疗后2年无复发生存率有显著性差异(37.5％ vs 83.9％)。有转移NPC患者血清MMP-3水平[(28．8±l5.5)μg/L]显著高于健康组[(16.2±l1.1)μg/L]和无转移组[(19.8±l1.6)μg/L]，健康组与无转移组患者MMP-3水平无显著性差异：治疗前血清MMP-3水平≥25μg/L与<25μg/L的初治NPC患者，治疗后2年无事件生存率无显著性差异。NPC患者血清CD44s水平显著高于健康对照组，但有转移与无转移NPC患者之间无显著性差异；治疗前血清CD44s浓度≥600μg/L与<600μg/L的初治NPC患者，治疗后2年无事件生存率无差异。结论：NPC患者血清VEGF≥800ng/L或MMP-3≥30μg/L，提示可能已发生局部复发和／或远处转移；初治无远处转移NPC患者血清VEGF水平与原发病灶进展有关，札清VEGF≥600ng/L预示治疗后2年无病生存率低。

目的 分析原发性肝细胞癌(HCC)1号染色体短臂(1p)上10个位点等位基因杂台子丢失(LOH)，以期寻找1P上可能存在的与HCC发生有关的肿瘤抑制基因的缺失区域。方法 用聚合酶链反应(PCR)方法分析38倒HCC的1号染色体短臂l0叶、位点微卫星多态性标记的LOH。所有患者均做HBV5项检测和HCV血清抗体的ELISA法检测。结果 在84.2％(32／38倒)的HCC组织中捡出染色体1P片段的LOH，其中1p31区的DIS186，1p35区的D1S482，和lp36区的DIS243，DIS170。DIS160和DIS165等6个位点发生高频率LOH(>40％)。结论 本组HCC染色体1p等位基因丢失区域主要集中在lp31和lp35-lp36区。这两个区域内可能存在多个与HCC发生有关的肿瘤抑制基因。