背景与目的：有研究表明，在肺癌、乳腺癌等肿瘤组织中，肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)与肿瘤的预后呈负相关。然而在胃癌和部分结直肠癌的研究中得出了TAMs与预后呈正相关的结论。本研究旨在探讨TAMs对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)进展和预后的影响。方法：应用免疫组化技术检测60例鼻咽癌组织中TAMs标记物CD68的表达；分别培养正常巨噬细胞、鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2以及肺癌细胞株95D，将同浓度的3种癌细胞株的上清液加入同量的巨噬细胞中共培养1天，6天及加入LPS活化后继续培养1天，应用ELISA技术检测共培养后TAMs释放的细胞因子TNF-α和IL-10的表达。以与肺癌细胞株95D上清液共培养后的巨噬细胞作为阳性对照；正常巨噬细胞作为阴性对照。结果：鼻咽癌组织中TAMs高密度表达者的3年无瘤生存率(85.7％)明显高于低密度表达者(56.3％)(P=0.017)。与阳性对照组比较，接受鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2上清液刺激后的TAMs分泌TNF-α较少(73pg/m1,64pg/ml vs．7794pg/ml,P=O.001)，经LPS活化后明显增多(6905pg/ml,6788pg/ml vs.137pg/ml,P=O.001)；分泌IL-1O很少(1pg/ml,1pg/ml vs.94pg/ml,P=O.002)，经LPS活化后升高不明显(87pg/ml,99pg/ml vs.416pg/ml.P=0/O15)，与阴性对照组比较差异无显著性。结论：鼻咽癌组织中TAMs的密度与患者的预后呈正相关；与鼻咽癌细胞上清液共培养后TAMs分泌的细胞因子倾向于杀伤肿瘤细胞，促进机体的抗瘤免疫作用。

目的：建立1种检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因突变的荧光实时定量PCR的新方法，并探讨应用这种方法检测肺癌组织EGFR基因突变的临床应用价值。方法：通过自行设计探针及引物，应用荧光实时定量PCR方法，检测71例女性非小细胞肺癌患者的肺癌组织中EGFR基因的第19号和第21号外显子上的突变情况，并与直接测序法比较。结果：中国女性非小细胞肺癌的病人中EGFR基因的突变率为30％(21/71)；荧光实时定量PCR与直接测序法的特异度符合率是95％(20/21)，敏感度符合率是100％ ，检测时间为直接测序法的1/12，而且结果判读直观。结论：应用荧光实时定量PCR检测肺癌组织中的EGFR基因特定位点的突变是一种快速、可靠的方法，具有较高的临床应用价值。

通过构建携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体，获得可供转染的滴度，为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础。方法：根据线粒体细胞色素C氧化酶设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链，插入到pENTR/U6质粒缺口末端，连接在质粒上生成含RNAi盒的pENTR/U6载体；通过重组作用将pENTR/U6载体的RNAi盒重组到pLenti6/BLOCK-iT-Dest载体上，构建含U6启动子、靶序列和P0lⅢ终止子表达框的MTCOX-I shRNA表达重组体；经脂质体导入293FT细胞，包装成慢病毒，收集病毒上清并检测其滴度。Western blotting检测干扰后细胞内线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结果：将目的序列成功连接到载体上，并经测序分析证实载体构建成功；成功包装成高滴度的慢病毒。Western blotting检测结果证实构建的MTCOX-I shRNA表达重组体可显著抑制线粒体细胞色素C氧化酶I亚基的表达。结论：成功构建了携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体。

目的：探讨血浆EBV/DNA定量分析，在鼻咽癌早期诊断、临床分期、预后判断和监测放疗后转移复发中的临床意义。方法：采用荧光定量PCR方法定量检测经病理确诊为鼻咽癌的120例初治、90例放疗后随诊患者，其中包括60例放疗后持续缓解，30例远处转移和局部复发患者的血浆EBV/DNA含量。结果：初治、远处转移和局部复发的鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA检出率分别为96.0％、95.0％和100％，显著高于治疗后持续缓解鼻咽癌患者、健康时照者和非鼻咽癌的肿瘤患者；初治鼻咽癌患者各TNM 分期之间血浆EBV/DNA拷贝教有显著统计学差异，晚期患者(Ⅲ+IV)期血浆EBV/DNA 中位拷贝教显著高于早期患者(I+Ⅱ)期；初治患者治疗后已出现局部和远处转移者，治疗前血浆EBV/DNA 中位数显著高于尚未出现复发转移患者；初治患者治疗前血浆EBV/DNA≥40000 拷贝/ml与<40000拷贝/ml两个水平，患者22个月无复发生存率分别为46.1％和92.9％，有显著统计学差异；放疗后复发、转移鼻咽癌患者血浆EBV/DNA的中位拷贝数显著高于治疗后持续缓解患者。结论：采用荧光定量PCR方法检测鼻咽癌患者血浆中游离的EBV/DNA是一种敏感可靠的方法，对于鼻咽癌早期诊断、鉴别诊断、分期、判断预后、监剃治疗后复发和远处转移具有重要的临床意叉，有可能成为鼻咽癌的血清肿瘤标记物。

目的 研究肝癌17号和16号染色体特定区域等位基因杂合性丢失(LOH)发生情况，并探讨LOH与肝癌的临床病理和乙型、丙型肝炎病毒感染的关系。方法 用聚合酶链反应、微卫星多态性分析技术检测17号和16号染色体LOH。结果 17号染色体6个位点在至少个位点发生LOH的有31例(82％)，其中D17S520(17p12-13.3)和TP53(17p13.1)位点LOH频率大干50％；17q所选4个位点中，仅D17S795位点LOH频率大于30％(40％)。16号染色体5个位点在至少一个位点发生LOH的有26例(72％)，所选5个位点LOH率均大干50％，其中以D16S413(16q24)位点LOH率最高(71％)。P53基因的LOH与丙型肝炎病毒感染和肿瘤的大小有关；16号染色体LOH与肝癌的临床病理改变和乙型、丙型肝炎病毒感染无明显关系。结论 17号染色体，尤其是p53基固的LOH与肝短的发生有关，肝癌在染色体16q24区LOH率高，提示染色体17p和l6q24区可能存在多个与肝癌发生、发展相关的肿瘤抑制基因。