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2007年05月31日

【期刊论文】人N-甲基-D-门冬氨酸受体主亚基受体激活相关多肽的理化特性与抗原性分析

孙长凯, 赵杰, 李伍举, 冯健男, 刘淑红, 朱克, 王吉庆, 尹安民, 韩大跃, 张万琴, 姜潮, 姜长斌, 聂志余, 王耀山, 包礼平, 范明

中华医学杂志2002年1月10日第82卷第1期/Natl Med J China, January 10, 2002, Vol. 82, No. 1,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 分析人N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR)主亚基NR1a上两个受体激活相关多肽P1、P2的抗原性及其理化特性。方法 用GOLDKEY软件从蛋白质数据库中调出人NR1a分子的氨基酸序列,分别在其第一、第三跨膜域前后逆向、顺向截取151和144个氨基酸长度的多肽片段P1与P2,选取Hopp&Woods与Kyte亲水性、Janin表面可及性、Karplus-Schulz主链柔韧性及Welling抗原性等参数予以多参数分析,采用Prosite程序与Chou-Fasman方法比较其氨基酸位点与二级结构特征,以此为基础综合判定P1与P2片段的抗原位点并与已有的实验结果相比较。结果 P1、P2多肽片段上可能分别有6和7个8~15aa长序列具有良好的抗原性。P1相关序列主要分布于其氨基端,与配体结合关键氨基酸残基相距较远。P2上的相关序列分布较均匀,包含有受体激活重要相关位点或与配体结合关键氨基酸残基距离较近。P2片段的总体抗原性、亲水性与可及性均强于P1,尤以其近膜的15个残基为著。P1、P2多肽片段均含有一定数量的β-转角,但P1片段含有较多的半胱氨酸残基和无规卷曲,而P2片段则含有较多的芳香族残基并以α螺旋结构为主。结论 人NMDAR主亚基NR1a上的两个受体激活相关多肽P1、P2均具有一定数量的抗原位点,与P1相比较,P2可能更易成为NMDAR免疫干预的分子靶点。

神经免疫调节, 受体, 抗原, 氨基酸类

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2007年05月31日

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2007年05月31日

【期刊论文】NO介质在大鼠红藻氨酸诱导癫痫发作中的作用

孙长凯, 孙艺平, 范明, 韩大跃, 赵杰, 宫德正

中国应用生理学杂志2003; 19 (2)/Chin J Appl Physiol 2003; 19 (2),-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的:进一步探讨脑内一氧化氮(NO)介质(NO或NO衍生物)在复杂部分性及全身强直阵挛性癫痫发作中的作用。方法:采用红藻氨酸(KA)诱导大鼠癫痫发作,以NO合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NNA)或NO前体L-精氨酸(L-Arg)予以预处理,观察其癫痫发作行为及海马结构内NO含量(NO2-/NO3-)的变化。结果:给予大鼠惊厥剂量KA(10 mg/kg), 15min时出现湿狗样抖动(WDS), 1~3h出现全身痉挛;经L-NNA(50 mg/kg)或L-Arg(40 mg/kg)预处理的大鼠,注射相同剂量的KA后,其癫痫行为发生明显变化,L-NNA预处理的大鼠癫痫发作行为明显加重,表现为全身痉挛的潜伏期缩短、时间延长、死亡率提高;L-Arg预处理的大鼠癫痫发作行为减弱,WDS和全身痉挛的潜伏期均延长,发作程度减轻、时间缩短,观察时间内无一例死亡。KA给药后30min海马结构内的NO2-/NO3- 含量迅速增多,7d时仍持续增高;与NS预处理组相比,经L-Arg预处理的动物,KA给药后3h及3d,其NO2-/NO3-浓度升高明显。结论:兴奋诱导性癫痫发作过程中内源性NO介质的变化可能具有重要的抗发作作用。

一氧化氮, L-硝基精氨酸, L-精氨酸, 红藻氨酸, 癫痫

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2007年05月31日

【期刊论文】Spongiform encephalopathies in mainland China

孙长凯, Chang-Kai Sun, Xiao-Qin Chong, Yuan-Gui Huang

Volume 348, Number 9026 24 August 1996,-0001,():

-1年11月30日

摘要

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2007年05月31日

【期刊论文】噬菌体肽库中筛选NMDA受体抗原表位

孙长凯, 康晓楠, 范明, 薛沿宁, 邵宁生, 赵杰, 韩大跃, 施广霞

生物化学与生物物理进展/Prog. Biochem. Biophys. 2003;30 (4),-0001,():

-1年11月30日

摘要

为了获得人N-甲基-天冬氨酸受体(NR)主亚基(NR1)M3-M4环B细胞表位,以人NR1分子M3-M4环单克隆抗体MAB363淘筛噬菌体展示随机12肽库,对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析。从30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTNPSTWQPIL”(克隆1),原核表达的NR1 M3-M4环可以与克隆1竞争结合MAB363。固相合成5个表位探针短肽,发现其中只有R(22)LRNPSKD可以与M3-M4环竞争结合抗体,将NPS三个氨基酸残基逐一敲除,缺失N或NP的合成肽和M3-M4环竞争抗体的能力减弱,缺失NPS的合成肽完全没有竞争能力,证明MAB363的表位为NPS,S可能是关键性残基。上述结论为免疫干预防治兴奋毒性脑损害策略的实施提供了一个重要线索和依据。

噬菌体展示, B细胞表位, NMDA受体

合作学者

  • 孙长凯 邀请

    大连医科大学,辽宁

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