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2007年05月31日

孙长凯，孙晶，范明，丁爱石，尹琳，邬伟，王小同

中国临床药理学与治疗学2006, Jan; 11(1): 95-98，-0001，（）：

-1年11月30日

目的：观察新银杏叶提取物(nGBE)在不同给药模式下对谷氨酸所致海马神经元毒性作用的影响。方法：采用CO2超临界萃取的方法制备nGBE，建立新生Wistar大鼠原代培养的海马神经元谷氨酸毒性模型，采用台盼蓝染色、程序性细胞死亡检测技术及乳酸脱氢酶测定的方法，观察预处理与急救两种给药模型下nGBE的神经保护作用，并与MK2801急性给药相比较。结果：nGBE在两种给药模式下均能不同程度地提高细胞存活率，降低凋亡率，减少LDH漏出量。其中预处理的效果明显优于急救给药处理，但均弱于MK2801组。结论：银杏叶制剂按其现有的临床给药途径即用于脑血管病的急救治疗，就其抗兴奋毒性机制而言，作用较弱，但如果我们将其用于高危人群的预防干预可能有更大价值。

海马神经元，大鼠，兴奋毒性，细胞培养，细胞凋亡

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2007年05月31日

【期刊论文】NO介质在大鼠红藻氨酸诱导癫痫发作中的作用

孙长凯，孙艺平，范明，韩大跃，赵杰，宫德正

中国应用生理学杂志2003; 19 (2)/Chin J Appl Physiol 2003; 19 (2)，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：进一步探讨脑内一氧化氮(NO)介质(NO或NO衍生物)在复杂部分性及全身强直阵挛性癫痫发作中的作用。方法：采用红藻氨酸(KA)诱导大鼠癫痫发作，以NO合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NNA)或NO前体L-精氨酸(L-Arg)予以预处理，观察其癫痫发作行为及海马结构内NO含量(NO2-/NO3-)的变化。结果：给予大鼠惊厥剂量KA(10 mg/kg), 15min时出现湿狗样抖动(WDS), 1～3h出现全身痉挛；经L-NNA(50 mg/kg)或L-Arg(40 mg/kg)预处理的大鼠，注射相同剂量的KA后，其癫痫行为发生明显变化，L-NNA预处理的大鼠癫痫发作行为明显加重，表现为全身痉挛的潜伏期缩短、时间延长、死亡率提高；L-Arg预处理的大鼠癫痫发作行为减弱，WDS和全身痉挛的潜伏期均延长，发作程度减轻、时间缩短,观察时间内无一例死亡。KA给药后30min海马结构内的NO2-/NO3- 含量迅速增多，7d时仍持续增高；与NS预处理组相比，经L-Arg预处理的动物，KA给药后3h及3d，其NO2-/NO3-浓度升高明显。结论：兴奋诱导性癫痫发作过程中内源性NO介质的变化可能具有重要的抗发作作用。

一氧化氮， L-硝基精氨酸， L-精氨酸，红藻氨酸，癫痫

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2007年05月31日

【期刊论文】噬菌体肽库中筛选NMDA受体抗原表位

孙长凯，康晓楠，范明，薛沿宁，邵宁生，赵杰，韩大跃，施广霞

生物化学与生物物理进展/Prog. Biochem. Biophys. 2003；30 (4)，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

为了获得人N-甲基-天冬氨酸受体(NR)主亚基(NR1)M3-M4环B细胞表位，以人NR1分子M3-M4环单克隆抗体MAB363淘筛噬菌体展示随机12肽库，对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析。从30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTNPSTWQPIL”(克隆1)，原核表达的NR1 M3-M4环可以与克隆1竞争结合MAB363。固相合成5个表位探针短肽，发现其中只有R(22)LRNPSKD可以与M3-M4环竞争结合抗体，将NPS三个氨基酸残基逐一敲除，缺失N或NP的合成肽和M3-M4环竞争抗体的能力减弱，缺失NPS的合成肽完全没有竞争能力，证明MAB363的表位为NPS，S可能是关键性残基。上述结论为免疫干预防治兴奋毒性脑损害策略的实施提供了一个重要线索和依据。

噬菌体展示， B细胞表位， NMDA受体

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2007年05月31日

【期刊论文】N-甲基-D-门冬氨酸受体重组肽抗血清对谷氨酸兴奋毒性导致神经元坏死和凋亡的保护作用

孙长凯，康晓楠，朱克，范明，丁爱石，马清钧，石成华，赵杰，韩大跃，王耀山，施广霞，包礼平

中华神经科杂志2003年10月第36卷第5期/Chin J Neurol, October 2003, Vol. 36, No. 5，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的观察N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR, NR)主亚基(NR1)M3M4环重组肽自身抗血清对不同浓度谷氨酸诱导的神经元死亡的保护作用。方法用NR1 M3M4环重组肽免疫Balb/C(H-2d)小鼠制备抗血清，用锥虫蓝染色法和原位末端标记(TUNEL)法观察抗血清对原代培养海马神经元兴奋毒性坏死和凋亡的保护效应。结果在高浓度谷氨酸(500 μmol/L)条件下，阳性抗血清可以使神经元坏死减少16%; 在低浓度谷氨酸(50 μmol/L)作用下，阳性抗血清保护可使神经元凋亡率减少13%。结论 NMDAR重组肽自身免疫抗血清具有抗兴奋毒性作用，这一结论为免疫防治兴奋毒性脑损伤策略的建立提供了坚实的体外基础。

受体， N-甲基-D-天冬氨酸，肽类，谷氨酸，自身免疫，神经元，细胞凋亡

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2007年05月31日

【期刊论文】银杏叶提取物对锂-匹罗卡品癫痫大鼠海马结构c-Fos蛋白表达的影响

孙长凯，刘建丰，张天华，周慧玲

脑与神经疾病杂志2005年第13卷第6期，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：研究银杏叶提取物(GBE)对癫痫的干预作用及其对癫痫大鼠海马结构c-Fos蛋白表达的影响。方法：采用锂一匹罗卡品癫痫(LPS)大鼠模型。观察动物行为改变，应用免疫组化方法观察海马结构c-Fos蛋白的表达。结果：GBE对该模型癫痫发作的预防有效率和治疗有效率分别为94. 44%和35, 48%。与LPS组相比，GBE预处理组的4级以上发作率和发作分级明显下降；站立发作潜伏期延长。注射匹罗卡品后3小时，生理盐水对照组、GBE单独给药组和GBE预处理组大鼠海马结构c-Fos蛋白表达阴性。LPS组和GBE急性给药组大鼠海马结构c-Fos蛋白达阳性。结论：GBE预处理和急性给药两种给药模式均有一定的抗LPS作用，前者明显优于后者。GBE抗LPS作用的机制可能与GBE能抑制海马结构c-Fos蛋白表达有关。

银杏叶提取物，癫痫， c-fos，锂-匹罗卡品，海马结构

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