中国科技论文在线

上传时间

2007年07月23日

【期刊论文】筛选后的巢蛋白阳性细胞流式鉴定及诱导分化

洪天配，王宏，胡江，李凌松，洪天配，李丽英

，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

31浏览
0点赞
0收藏
0分享
139下载
0

引用

上传时间

2007年07月23日

【期刊论文】人胚胎胰腺组织中Nestin 阳性细胞的分离、体外增殖与诱导分化

洪天配，张玲、洪天配、胡江、吴永华、李凌松

，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的从人胚胎胰腺组织中分离Nestin阳性细胞，进而研究该细胞的体外扩增和向胰岛内分泌细胞分化的能力。方法采用胶原酶消化法，从人胚胎胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇（islet-like cell clusters，ICCs）， ICCs经手工挑拣后接种，待形成单层上皮样细胞后，进行传代培养和诱导分化。利用逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫荧光染色及放射免疫分析（RIA）等方法，检测该细胞中分子标志物的表达，并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定。结果（1）上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力，可连续传代至少16代；（2）RT-PCR、免疫荧光染色分析显示，该细胞可表达干细胞的标志分子Nestin和ABCG2；（3）RT-PCR分析显示，在多种细胞因子和无血清的条件下，Nestin阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因-1（PDX-1）mRNA的表达，而Nestin和Neurogenin3（Ngn3）mRNA表达消失。RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。结论从人胚胎胰腺中分离得到的Nestin阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性，在体外具有很强的增殖能力，并可诱导分化为胰岛内分泌细胞。该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源。

胚胎，胰腺，胰腺干细胞，巢蛋白

71浏览
0点赞
0收藏
0分享
61下载
0

引用

上传时间

2007年07月23日

【期刊论文】Ghrelin抑制胰岛β细胞胰岛素释放的机制探讨

洪天配，李琳吴永华洪天配邓正照

，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的探讨ghrelin对小鼠胰腺β细胞株NIT-1细胞胰岛素释放的影响及其作用机制。方法 NIT-1细胞与不同浓度ghrelin和高浓度葡萄糖孵育后，放免法测定上清液胰岛素含量，RT-PCR法检测葡萄糖转运子2(GLUT2)、胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)、含两个跨膜区的内向整流钾通道(Kir6.2)及磺酰脲受体1(SUR1) 等基因的表达。NIT-1细胞与不同浓度ghrelin孵育不同时间后，MTT法检测细胞增殖情况。结果（1）10-9mol/L至10-7mol/L ghrelin呈剂量依赖性抑制NIT-1细胞高浓度葡萄糖刺激的胰岛素释放；（2）10-7mol/L ghrelin显著降低Kir6.2 mRNA的表达，但对GLUT2、PDX-1及SUR1 mRNA的表达无明显的效应；（3）Ghrelin对NIT-1细胞的增殖无显著影响。结论 Ghrelin可抑制胰岛β细胞高浓度葡萄糖刺激的胰岛素释放，该效应可能是由于下调ATP敏感性钾通道组成成分Kir6.2基因的表达所致。

Ghrelin，胰岛β细胞，胰岛素