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2009年03月20日

【期刊论文】基于超声波下淀粉纳米颗粒作载体的基因转导

刘选明, 刘俊, 刘选明*, 肖苏尧, 童春意, 唐冬英, 赵李剑

高等学校化学学报,2005,26(4):634~637,-0001,():

-1年11月30日

摘要

报道了多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒(PLL-StNP)在超声波介导下作基因载体的研究,实验发现:DNA-PLL-StNPs 复合物经过超声波处理不同的时间后的电泳分析显示,结合的DNA受到保护,其生物学性质没有改变;将pIRGFP质粒DNA-PLL-StNPs复合物与COS 27细胞混合,在120W和40kHz的超声波强度下处理2min,细胞表达绿色荧光蛋白的比率最大,达到70%。这种基于超声波下淀粉纳米颗粒作载体的基因转导方法可被广泛应用于动物转基因技术和人类基因治疗,同样可被广泛应用于植物转基因技术。

纳米颗粒, 基因载体, 超声波, 基因转导

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2009年03月20日

【期刊论文】低能N+辐照拟南芥诱导基因组DNA碱基变异分析*

刘选明, 常凤启, 李银心, 贾庚祥, 马晶晶, 刘公社**, 朱至清**

中国科学(C辑),2003,33(2):117~124,-0001,():

-1年11月30日

摘要

用低能N+离子束注入拟南芥后获得的稳定突变体T80Ⅱ作为实验材料,对突变体植株进行了RAPD标记,并将T80Ⅱ和对照部分RAPD特异条带进行克隆测序和DNA序列分析。结果显示、在可分辨的总计397个RAPD条带中,T80Ⅱ株系中有52个条带表现出差异,包括条带的缺失和增加,条带变异率为13.1%;克隆的T80Ⅱ序列中,平均每16.8个碱基出现1个碱基变异位点,表现出较高频率的碱基突变。碱基突变类型包括碱基的颠换、转换、缺失、插入等。在检测到的275个碱基突变中,主要是单碱基置换(97.09%),碱基缺失或者插入的比例较小(2.91%)。在碱基置换中,转换的频率(66.55%)高于颠换的频率(30.55%)。此外,构成DNA的4种碱基均可以被离子束辐照诱发变异,而且每一种碱基都可以被其他3种碱基所替换,但是胸腺嘧啶(T)的辐射敏感性要高于其他3种碱基。通过分析突变碱基周边序列,对低能N+离子注入拟南芥突变体引发的碱基突变热点进行了讨论。

离子束, 诱变, 拟南芥, RAPD, 碱基变异, 序列分析

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2009年03月20日

【期刊论文】低能N+注入诱导拟南芥变异及突变体特异表达cDNA克隆*

刘选明, 常凤启, 李银心, 刘公社**, 朱至清**

自然科学进展,2003,13(3):259~262,-0001,():

-1年11月30日

摘要

低能N+离子注入拟南芥引起处理当代(M0)种子的萌发率降低,并且降低的幅度随剂量的升高而增大。较高剂量离子处理的M2代植株中出现了较明显的表型变异,包括黄化、半致死、形态变异以及开花结实性状的改变等。对M2代植株进行随机引物扩增多态性DNA(RAPD)分析的结果表明,离子注入处理的拟南芥中有RAPD条带的缺失或增加,且变化频率与离子注入的剂量相关,而对照未发现有明显变化。80次剂量处理的M1代植株中有一株特别矮小,为典型的矮化变异体。以它的一个稳定的M6代矮化突变体T80II为材料,用PCR增效的减法杂交技术,构建减法文库,克隆特异表达的cDNA片段,其中1个712bp的片段与GRF基因有部分同源性。

低能离子束 拟南芥 变异 cDNA 减法文库

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2009年03月20日

【期刊论文】Studies of poly-L-lysine-starch nanoparticle preparation and its application as gene carrier

刘选明, XIAO Suyao, LIU Xuanming, TONG Chunyi, LIU Jun, TANG Dongying & ZHAO Lijian

Science in China Ser. B Chemistry 2005 Vol.48 No.2 162-166,-0001,():

-1年11月30日

摘要

Anion starch nanoparticle (StNP) with a diameter of 50 nm was prepared in wa-ter-in-oil microemulsion, with soluble starch as raw materials and POCl3 as crosslinking agent. PLL-StNP was prepared by linking poly-L-lysine (PLL) on the surface of StNP. At the same time, the size of PLL-StNP and its stability in aqueous solution were checked by AFM. The analysis of plasmid DNA binding, DNase I enzymatic degradation, toxicity and transfection were done. We discovered that PLL-StNP may be used as non-virus nanoparticle gene carrier. And we devel-oped the method of preparing PLL-StNP gene carrier and used it in cell transfection. As non-virus gene carrier, PLL-StNP has some advantages, such as large load of DNA, high transfection effi-ciency, low cell toxicity and biodegradability.

anion starch nanoparticle,, poly-L-lysine,, non-virus gene carrier,, cell transfection.,

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2009年03月20日

【期刊论文】RiT DNA对盾叶薯蓣的遗传转化及薯蓣皂甙元产生的影响

刘选明, 刘俊, 秦玉芝, 赵小英, 唐冬英, 赵李剑

天然产物研研与开发,2005,17(1):05~10,-0001,():

-1年11月30日

摘要

利用农杆菌介导法成功地将RiT DNA转入药用植物盾叶薯蓣,产生了毛状根,经分子信标探针检测农杆菌Ri质粒上的T DNA已整合进植物基因组中。研究建立了毛状根大量快速繁殖技术,基本技术要求为:1/2MS液体培养基,28℃培养温度,350lux弱光条件下有利于毛状根的增殖培养,提高生物量。HPLC测定结果显示,转基因获得的毛状根其薯蓣皂甙元的含量分别是微块茎、愈伤组织和植物体合成量的568倍、612倍和268倍。

RiT DNA, 盾叶薯蓣, 转化, 薯蓣皂甙元

合作学者

  • 刘选明 邀请

    湖南大学,湖南

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