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刘选明, 刘俊, 刘选明*, 肖苏尧, 童春意, 唐冬英, 赵李剑
高等学校化学学报,2005,26(4):634~637,-0001,():
-1年11月30日
报道了多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒(PLL-StNP)在超声波介导下作基因载体的研究,实验发现:DNA-PLL-StNPs 复合物经过超声波处理不同的时间后的电泳分析显示,结合的DNA受到保护,其生物学性质没有改变;将pIRGFP质粒DNA-PLL-StNPs复合物与COS 27细胞混合,在120W和40kHz的超声波强度下处理2min,细胞表达绿色荧光蛋白的比率最大,达到70%。这种基于超声波下淀粉纳米颗粒作载体的基因转导方法可被广泛应用于动物转基因技术和人类基因治疗,同样可被广泛应用于植物转基因技术。
纳米颗粒, 基因载体, 超声波, 基因转导
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刘选明, 肖苏尧, 刘选明**, 童春义, 刘俊, 唐冬英, 赵李剑
中国科学B辑化学,2004,34(6):473~477,-0001,():
-1年11月30日
以可溶性淀粉为原料,利用反向微乳液法,加入交联剂三氯氧磷,制备了直径为50nm左右带负电荷的交联淀粉纳米颗粒。以该纳米颗粒为内核,经多聚赖氨酸修饰,得到了多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒(PLL-StNP)。对PLL-StNP进行了颗粒粒度、稳定性和电性的表征,并通过颗粒的体外细胞毒性检测、颗粒与DNA结合能力及细胞转染等方面的分析,发现多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒(PLL-StNP)有可能作为基因载体,在此基础上发展了多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒基因载体的构建与基因转染技术。作为非病毒基因载体,赖氨酸淀粉纳米颗粒具有基因装载量大、转染率高、细胞毒性低以及可生物降解等优点。
阴离子淀粉纳米颗粒 多聚赖氨酸 非病毒基因载体 基因转染
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【期刊论文】低能N+注入诱导拟南芥变异及突变体特异表达cDNA克隆*
刘选明, 常凤启, 李银心, 刘公社**, 朱至清**
自然科学进展,2003,13(3):259~262,-0001,():
-1年11月30日
低能N+离子注入拟南芥引起处理当代(M0)种子的萌发率降低,并且降低的幅度随剂量的升高而增大。较高剂量离子处理的M2代植株中出现了较明显的表型变异,包括黄化、半致死、形态变异以及开花结实性状的改变等。对M2代植株进行随机引物扩增多态性DNA(RAPD)分析的结果表明,离子注入处理的拟南芥中有RAPD条带的缺失或增加,且变化频率与离子注入的剂量相关,而对照未发现有明显变化。80次剂量处理的M1代植株中有一株特别矮小,为典型的矮化变异体。以它的一个稳定的M6代矮化突变体T80II为材料,用PCR增效的减法杂交技术,构建减法文库,克隆特异表达的cDNA片段,其中1个712bp的片段与GRF基因有部分同源性。
低能离子束 拟南芥 变异 cDNA 减法文库
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刘选明, 袁小川, 杨远柱, 赵小英, 林建中, 唐冬英, 赵李剑
生命科学研究,2005,9(2):139~144,-0001,():
-1年11月30日
以株-IS、SVIS、SVI4S为研究材料,分析这3种材料的胚乳a-淀粉酶活性、第二叶鞘及节间长度对赤霉素(GA3)反应,结果表明来源于株-IS的SVIS、SVI4S突变体的矮化变异与赤霉素信号传导途径无明显关系。此外,通过3种材料的基因组DNA和线粒体DNA的RARD 分析,发现矮秆突变体株系的基因组DNA和线粒体DNA都存在一定的变化,从而在DNA分子水平上进一步证实了SVIS和SVI4S突变体的遗传突变。其突变的生理机制与赤霉素信号传导途径无明显关系,很可能与赤霉素生物合成途径有关。
水稻, 矮杆突变体, 赤霉素, RAPD
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【期刊论文】RiT DNA对盾叶薯蓣的遗传转化及薯蓣皂甙元产生的影响
刘选明, 刘俊, 秦玉芝, 赵小英, 唐冬英, 赵李剑
天然产物研研与开发,2005,17(1):05~10,-0001,():
-1年11月30日
利用农杆菌介导法成功地将RiT DNA转入药用植物盾叶薯蓣,产生了毛状根,经分子信标探针检测农杆菌Ri质粒上的T DNA已整合进植物基因组中。研究建立了毛状根大量快速繁殖技术,基本技术要求为:1/2MS液体培养基,28℃培养温度,350lux弱光条件下有利于毛状根的增殖培养,提高生物量。HPLC测定结果显示,转基因获得的毛状根其薯蓣皂甙元的含量分别是微块茎、愈伤组织和植物体合成量的568倍、612倍和268倍。
RiT DNA, 盾叶薯蓣, 转化, 薯蓣皂甙元
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