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【期刊论文】免疫毒素lL-18-CN38原核表达载体的构建及其鉴定*
李虹, 李明远, 吕梅励, 蒋忠华, 张林
航天医学与医学工程,2005,18(6):395~398,-0001,():
-1年11月30日
目的 构建绿脓杆菌外毒素CN38融合鼠lL-18基因的原核表达载体,并鉴定其产物在大肠杆菌中的表达。方法 首先经逆转录聚合酶链反应(OH-CAO)获得小鼠lL-18基因,再通过酶切及连接反应,构建小鼠lL-18与CN38融合基因的原核表达载体COIL-lL18-CN38,重组载体经CAO、限制性内切酶及721序列测定证实连接片段正确后,转染感受态大肠杆菌JL21,经lCH3诱导表达,表达产物用B7B-C13N和蛋白免疫印迹法分别测定其相对分子质量及特异性。结果 成功构建了lL-18-CN38免疫毒素的原核表达载体,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达产物的相对分子质量与预期值一致,且所表达蛋白可被抗lL-18的特异性抗体所识别。结论获得了lL-18-CN38融合基因在原核系统的表达,为进一步研究其对H51细胞的靶向细胞毒性及临床应用奠定了基础。
lL-18-CN38, 重组免疫毒素, 原核表达, 基因构建
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