目的：为提高表达量，简化纯化工艺，获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白，构建带有6×His纯化标签的原核表达载体，优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法：将抑癌基因nm23-H/从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE40中；梯度变化表达条件获得产物高表达；镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白；Western blot鉴定产物的免疫原性；HPLC测定产物的激酶活性；鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果：pQE-40中亚克隆的nm23-H/序列无误；目的蛋白最高表达量可达49.6%；纯化的表达产物能与天然NDPK-A的多克隆抗体特异结合；酶比活为472U/rag；具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论：表达质粒-nm23HI能高效表达重组人NDPK-A，纯化工艺简便，产物活性与天然NDPK-A无异。

目的：研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后，小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法：灭活的SARS冠状病毒F69株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍，制备灭活疫苗。接种6周龄SPF级BALB/C小鼠。定时采血，分析小鼠外周血中CD4 、CD8 T细胞亚群动态变化，同时测定鼠血清中特异性IsG抗体及抗体的病毒中和活性。结果：由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后，CIM 、CD8 T细胞百分比升高或无明显改变，CIM/CD8比值无显著性改变。其中，寸鲁一佳剂疫苗免疫小鼠的CIM T细胞百分比升高较明显，且在一段时间内，维持在一个较高的水平；铝佐剂疫苗免疫小鼠后，未观 到明显 I‘细胞亚群改变；而cpG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8 T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是种爰茁均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IsG抗体，并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第3-4天，3种佐剂抗体滴度分别为1∶12800、1∶3200和1∶1600，中和效价分别为1∶2560、1∶960和1∶320。结论：SARS灭活疫苗接种小f 可诱导较强的体液免疫反应，同时轻度上调CD4+、CD8+T细胞活性，程度因佐剂而异。

目的 研究重组人源抗HBsAg单链抗体（HBscFv）在HBV转基因小鼠体内的活性作用，探讨HBV转基因小鼠作为HBsAg特异性抗体的结合活性评价模型的可行性。方法 工程菌表达的HBscFv包涵体经固定化金属螯合层析和分子排阻层析两步纯化后，分步透析复性。复性后的HBscFv（0.9g/L）经尾静脉注射HBV转基因小鼠，一定时间后测定鼠血清中HBsAg的浓度，计算抗体注射前后HBsAg浓度下降的百分比（结合率），同时以人血源HBsAb IgG（40U/ml）和生理盐水作为对照。结果 两步纯化获得纯度达到98%的重组HBscFv。HBscFv制品能够结合转基因小鼠体内的HBsAg，其结合率为（30.47±9.85）%，与生理盐水组差异有显著性（P<0.001），与HBsAb IgG组差异无显著性（P>0.05）；对照品HBsAb IsG的结合率为（39.00±7.43）%，与生理盐水组差异也有显著性（P<0.001）。比较HBscFv和HBsAb IgG的结合率及其浓度，求得HBscFv的结合效价为31.58U/mg。结论 HBscFv在转基因小鼠体内具有特异性结合HBsAg活性，HBV转基因小鼠可发展为评价HBsAs特异性抗体的体内结合活性的候选模型。