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2009年11月01日

王亚平，陈笛，王莎莉，王璐，姜蓉

免疫学杂志，2003，19（6）：411～414，-0001，（）：

-1年11月30日

目的研究人参总皂甙（TSPC）对人淋巴细胞表达CM-CSF的影晌，及其与人粒细胞，巨噬细胞系血细胞发生调控的关系。方法采用造血祖细胞、胸腺细胞和脾细胞体外培养、造血生长因子生物学括性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果TSPG能显著刺激粒细胞-巨噬细胞系造血祖细胞（CFU-GM）增殖；经TSPG诱导制备的胸腺细胞和脾细胞条件培养液富含GM-CSF样活性；TSPC能显著促进胸腺细胞和脾细胞的CM-CSF蛋白和mRNA表达。结论TSPG可能通过直接和/或间接途径促进淋巴细胞合成和分泌CM-CSF，进而促进CFU-CM的增殖分化。

人参总皂甙，粒细胞，巨噬细胞系造血祖细胞，粒细胞，巨噬细胞集落刺激因子

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2009年11月01日

【期刊论文】人胚胎生殖细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上的生长

王亚平，刘永刚，韩兵，陈地龙，李芳菲，王亚平*，王莎莉

解剖学报，2005，36（3）：716～719，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的探讨以人胚胎成纤维细胞为饲养层分离、培养人胚胎生殖细胞的方法和条件。方法分离、培养3-4月胚胎成纤维细胞，取3～15代细胞经丝裂酶素处理后铺板备用；分离6～11周胚胎原始生殖细胞，将其置于人胚胎成纤维细胞饲养层上，在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞；用免疫细胞化学方法检测胚胎生殖细胞表面标志SSEA-1和SSEA-4；钙，钴法检测碱性磷酸酶活性；RT-PCR检测转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎成纤维细胞可连续传代25代以上（6月），3～15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落，并能连续在体外培养超过8代。集落未分化标志检测显示SSEA-1、SSEA-4呈阳性，碱性磷酸酶活性呈强阳性，Oct-4表达阳性。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

胚胎生殖细胞，胚胎成纤维细胞，细胞培养，免疫细胞化学，逆转录聚合酶链反应，人胚

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2009年11月01日

【期刊论文】人原始生殖细胞的迁移及表面标志物变化的实验研究

王亚平，刘永刚，陈地龙，李芳菲，王莎莉

笫三军医大学学报，2005，27（8）：716～719，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的探讨人胚胎原始生殖细胞向生殖嵴迁移及其细胞标志物改变。方法人胚生殖嵴或生殖腺经石蜡切片；HE染色，光镜观察；免疫组化方法检测阶段特异性胚胎抗原SSEA-4和SSEA-1的表达；钙一钴法检测碱性磷酸酶（AP）活性；RT-PCR检测4.5、7、9、11用人胚胎生殖嵴中转录因子Oct-4的表达。结果人胚胎第4.5周生殖嵴未见有碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSFA-1阳性细胞，且不表达转录因子Oct-4；第5～11周胚胎生殖嵴中持续存在碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞，且表达转录因子Oct-4；第12周胚胎生殖嵴中阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-l阳性细胞数量明显减少，但存在碱性磷酸酶阳性细胞。结论人胚胎原始生殖细胞自第5周后开始迁移至生殖嵴，直至第II周后完全分化，其形态学特征为碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性，且表达转录因子Oct-4。

原始生殖细胞，生殖嵴，人

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2009年11月01日

【期刊论文】骨髓CD34+造血干/祖细胞的分离、纯化及鉴定①

王亚平，王建伟，王莎莉，姜蓉

解剖学杂志，2004，27（3）：328～330，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

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2009年11月01日

【期刊论文】人参总皂苷对骨髓造血细胞冷冻损伤的可恢复性研究

王亚平，王建伟，王莎莉，姜蓉

中草药，2004，35（4）：420～423，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的探讨骨髓造血细胞的冷冻保存效果及人参总皂苷（TSPG）降低冷冻损伤的作用。方法以5%二甲基亚砜（DMSO）为冷冻保护剂，采用逐步降温法将骨髓造血细胞在液氮中保存3～5个月，复苏后应用台盼蓝拒染法、集落形成试验、CD34+及细胞总数回收率等，测定骨髓造成细胞生物学活性的变化；将不同剂量的TSPG与复苏的骨髓造血细胞共培养，应用集落形成试验、MTT比色分析法及流式细胞术等方法检测TSPG对骨髓造血细胞冷冻损伤可恢复性的影响。结果骨髓造血细胞在低温保存时一部分细胞会失去增殖能力，但这种损伤并不与保存时间成正比。细胞复苏后，加入合适剂量的TSPG（25μg/mL），可明显提高冻存骨髓造血细胞的集落产率；TSPG在一定浓度范围内（25～50μg/mL）能促进冻存骨髓造做细胞的增殖；TSPG（25μg／mL）能促进冻存骨髓造血细胞进入细胞增殖周期。结论TSPG能促进冷冻骨髓造血细胞的复苏、增殖，提高骨髓细胞冷冻损伤的可恢复性，对应用冻存骨髓造血细胞进行造血移植有一定意义。

人参总皂苷，造血细胞，冷冻保存

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