[目的]建立小鼠粗线期精母细胞T型ca2+通道电流膜片箝记录方法，并观察拟除虫菊酯类杀虫剂氰戊菊酯的作用。 [方法]应用膜片箝技术，全细胞方式下记录小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流，并用各种特异的通道阻断剂和激动剂确定电流特性，与体细胞T型ca2+通道电流比较；通过胞外给药，观察氰戊菊酯对T型ca2+通道电流影响。[结果]当以Cs+、TEA+阻断K+电流，记录到一-60mv激活，-20～～30mv达到最大值的内向电流，该电流呈快速激活快速失活。加入Na+通道阻断剂TⅨ，对记录的内向电流无影响，表明该内向电流不含有Na+电流成分，是由ca2+通道开放产生。另该电流对L型ca2+通道激动剂BayK8644不敏感，但对cd2+、NifPdiD-ne两种ca2+通道阻断剂较敏感，提示其为T型ca2+通道电流。与体细胞典型T型ca2+通道比较，粗线期精母细胞T型ca2+通道有自身特点。研究氰戊菊酯对记录的T型ca2+通道电流的作用显示：50μm/L-1氰戊菊酯在加入后3～5min开始抑制T型ca2+通道电流，于9～10min达到最大抑制作用，并有明显的剂量一反应关系。[结论]小鼠粗线期精母细胞主要存在T型ca2+通道，而不含有L型ca2+通道，但与典型T型ca2+通道电流比较，精母细胞的T型ca2+通道电流又有许多不同之处，如较特异的T型ca2+通道阻断剂HⅡberadil只有在较高浓度下，才显示抑制作用。相反，其对二氢吡啶类化合物（DHP）较敏感。氰戊菊酯对粗线期精母细胞T型ca2+通道电流的抑制作用提示，作为农业生产中一种广泛使用的杀虫剂，应重视它对男性生殖健康的影响。

应用机械分离获得小鼠单个精母细胞，采用全细胞膜片箝技术记录Ca2+离子通道电流。结果表明：①阻断K+电流后，当钳制电位-90mV、指令电压-60～+10mV、步阶电压10mV时，可记录到内向电流；②内向电流在-30～-40mV达到最大值；③在细胞外液中加入4Lmol/LTTX，对记录电流无影响，表明此电流不含有Na+电流成分，为Ca2+电流。

In this study, primary serum-free cultured rat granulosa cells(rGCs)were used as a cellular model to investigate the effects of fenvalerate on progesterone production. Various concentrations(0, 1, 5, 25, 125 and 625μM)of fenvalerate were added to the cell cultures for 24 h. rGCs were stimulated by compounds such as follicle-stimulating hormone(FSH), 8-bromo-cAMP or 22(R)-hydroxycholesterol(22R-HC). Progesterone production and intracellular cAMP content were measured in control and treated groups. Expression of P450 side chain cleavage enzyme(P450scc)and steroidogenic acute regulatory protein(StAR)were monitored by real-time PCR and Western blotting. Results showed that fenvalerate inhibited basal progesterone production in rGCs in the absence of stimulators. This inhibition was stronger in the presence of FSH and was not fully reversed by 8-bromo-cAMP or 22R-HC. The increase of cAMP content, stimulated by FSH, was inhibited by fenvalerate implicating that the intracellular cAMP-dependent signal pathway was involved. Fenvalerate reduced mRNA and protein expression of P450scc. These results suggested that multi-site inhibition of progesterone production by fenvalerate including a cAMP-dependent protein kinase pathway and reduction on P450scc gene expression and/or its enzymatic activity in rGCs.

目的 观察氰戊菊酯对小鼠精子顶体反应的影响并探讨其作用机理。方法 采用顶体反应诱导试验结合细胞染毒，以考马斯亮蓝染色法判定精子顶体反应。结果 孕酮或A23187诱导的小鼠精子顶体反应，可被2mmol·L-1 EDTA和1.8 mmol·L-1 Mn2+相应地完全抑制；50µmol·L-1氰戊菊酯则有明显抑制作用。实验还发现氰戊菊酯在精子获能前或后加入，对孕酮诱发顶体反应的抑制率不同，获能前抑制率低，二者存在显著性差异。结论 氰戊菊酯对小鼠精子顶体反应有抑制作用，对小鼠精子获能可能有一定的促进作用。

获能是哺乳动物精子受精前必须经历的一个生理过程。获能涉及精子膜性质的改变、Ca2+通道活化、胞内cAMP增加，以及蛋白酪氨酸磷酸化（PTP）等。实验证明，HCO3-在该过程中起重要作用。本文旨在介绍HCO3-介导的cAMP信号转导途径。