骨髓间充质干细胞（MSC）是一类存在于骨髓中的具有多向分化潜能的干细胞，在体外不 仅可以分化为间充质类细胞，而且可以分化为非间充质类细胞研究了人骨髓间充质干细胞的体 外分离、扩增和向神经细胞的定向诱导分化条件从骨髓中分离Msc，用Mesennlt培养基进行 纯化和扩增培养每扩增一代，细胞数量增加约2～3倍，在体外扩增12代后扩增约4 6×10。倍； 诱导不同扩增代数的MSC向神经细胞分化，诱导后的细胞平均有80％以上呈现典型的神经元样表 型免疫组化法检测发现，神经元样细胞强表达神经丝蛋白和神经元特异性烯醇化酶，组织化学 法检测观察到神经元特有结构尼氏体，表明MSC在体外具有向神经细胞分化的潜能

目的探讨人脐血司充质干细胞（menchymal stem cells, MSC）的体外分离、纯化、扩增和 向神经元样细胞的定向诱导分化条件。方法无菌条件下采集正常人脐血，肝素抗凝，用相对密度为 1.077的淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞，进而获得MSC 用MesencultTM培养基进行纯化和扩增 培养。用流式细胞仪检测MSC的表面标志。取扩增2，5，8代的Msc分别向神经元样细胞诱导，免疫 组化和组化法检测神经元样细胞特异性标志和结构。结果脐血Msc每扩增一代，细胞数量增加约2 ～3倍。6.6×105个人脐血原代Msc在体外扩增10代后获得9.9×108个细胞，扩增约l.5×l03倍。 流式细胞仪检测结果显示，脐血Msc不表达CD34、CD11b和CD29，强表达CD29，弱表达CD71，与骨髓MSC 表面抗原特性一致。诱导后的细胞平均有70％左右呈现典型的神经元样表型，免疫组化法检测发现 不同代数的Msc诱导后均表达神经丝蛋白（neurofilament，NF）和神经元特异性烯醇化酶（neuron—specific enolase, NSE）；组织化学法检测可看到神经元特有结构尼氏体。结论脐血Msc在体外有较强的扩增 能力，能够向非司充质类细胞分化。

本文应用光镜和透射电镜对山羊胚胎大动脉壁的发生发育过程进行了系统观察。结果表明：血管发生初期仅由一层内皮细胞构成。随着胚胎的发育，除毛细血管外，其它血管壁形成分层结构，形成内膜、中膜、外膜；胚胎大动脉内皮细胞胞质内存在着丰富的粗面内质网和游离核糖体，代谢是很活跃的；大动脉管壁的内弹性膜形成较晚，先产生小片段，然后呈连续带状；大动脉内膜和中膜内不含典型的成纤维细胞，在中膜内存在一种能产生胶原纤维的细胞，其结构类似于平滑肌细胞。

利用透射电镜观察了山羊胚胎心肌细胞分化发育过程中超微结构的变化。结果表明：26日龄的山羊胚胎心肌细胞内肌节初步形成。随着胚胎发育，心肌细胞的肌节逐步完善，心肌细胞内的线粒体数量逐渐增多，排列规则，线粒体嵴逐渐变密，心肌细胞之间的连接也随着胚胎的生长发育逐渐形成和加强；26日龄山羊胚胎心肌内可见粗面内质网；34日龄的山羊胚胎心肌细胞胞浆内可见肌浆网、肌膜下池、横小管和二联管已形成；山羊胚胎心肌细胞内糖原颗粒丰富，随着胚胎日龄的增长，胞质内散布的糖原颗粒呈减少的趋势，而肌丝之间的糖原颗粒呈增加趋势；26日龄的山羊胚胎心房肌内出现少量特殊颗粒。

应用光镜观察了山羊胚胎心脏的发生和发育过程，结果表明：15日龄20时的胚胎处于胚层分化阶段，中胚层上已有微血管发生；16～18日龄的胚胎在前肠门两侧发生两条对称的心内皮管；18～20日龄的胚胎在前肠腹面两条心内皮管合并成单管状心。同时，心管发生扭曲，心管内部开始分隔过程；20～34日龄的胚胎心脏的分隔基本完成；34～105日龄属于胚胎心脏进一步发育成熟的阶段。试验还发现山羊心骨骼中的纤维三角发生初期是由致密结缔组织构成，随着胚胎的发育转变为透明软骨，具有种特异性。