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汪以真, 王友明, 傅剑云
中国兽医学报,2002,22(3):309~310,-0001,():
-1年11月30日
通过大鼠、小鼠急性经口毒性试验,大鼠蓄积毒性试验,致突变试验(小鼠微核试验和小鼠精子畸形试验),探讨了盐酸甜菜碱作为畜禽饲料添加剂的安全性。结果表明,盐酸甜菜碱属实际无毒类物质,无明显蓄积作用,无致突变性,是一种安全的饲料添加剂。
盐酸甜菜碱, 安全性, 评价, 饲料添加剂, 小鼠, 大鼠
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【期刊论文】小白鼠乳铁蛋白基因片段克隆及不同泌乳阶段乳铁蛋白基因表达的差异
汪以真, 韩菲菲, 黄海青
浙江大学学报(农业与生命科学版)30(1):83~88,2004,-0001,():
-1年11月30日
从泌乳期小白鼠乳腺组织中提取总RNA,用反转录酶反转录为cDNA后,根据已报道的小白鼠乳铁蛋白(LF)cDNA设计一对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增,获得一条897bp的片段,克隆于pGEM2TVector后进行序列分析表明,该片段为LF基因cDNA的部分序列,编码299个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的主体部分。本研究得到的基因片段与已报道的小白鼠子宫LFcDNA部分序列的同源性达到99%L以LF基因片断的成功克隆为基础,本实验室构建了一优化的半定量RT2PCR法,以B-actin为内标,研究不同泌乳阶段小白鼠乳腺组织LF基因表达的差异L结果显示,不同泌乳阶段小白鼠LF基因表达有差异,在泌乳第1日,LF基因的表达量较高,从泌乳第1日到泌乳第10日和第18日,LF基因表达量呈下降趋势,到乳腺组织退化的干乳期(泌乳第25日),LF基因表达量又明显升高。
乳铁蛋白, 小白鼠, 乳腺, 基因克隆, 半定量RT-PCR, 基因表达
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汪以真, 胡彩虹*, 许梓荣
分析华学,2001,11(29):1269~1272,-0001,():
-1年11月30日
建立了毛细管电泳法快速测定猪体组织中甜菜碱含量的方法。甜菜碱首先转化为苯甲酰甲基酯后直接上样测定。pH为3.0的磷酸缓冲溶液使甜菜碱酯化物和甜菜碱结构类似物酯化物之间以及酯化物和酯化剂之间都能很好地分离,这也省去了反应混合液的前处理。该法标准曲线的线性范围为4~600mgPL,相关系数r为0.9999,最低检测限为1mgPL,相对标准偏差为2.2%~4.7%,标准加入回收率为95.9%~98.4%。
甜菜碱,, 猪,, 毛细管电泳,, 体组织
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【期刊论文】抗菌肽Protegr in-1基因的PCR扩增和克隆及序列分析
汪以真, 刘光富, 初晓娜, 韩菲菲
浙江大学学报(农业与生命科学版) 30 (3): 336~339, 2004,-0001,():
-1年11月30日
从杜长嘉猪的骨髓中提取基因组RNA,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增抗菌肽Protegrin-1(PPG-1)基因,获得一条565bp的片断,以pGEM2TEasyvector为载体,将该基因片断克隆到大肠杆菌中L从筛选到的阳性克隆中分离出Protegrin-1基因,测定其序列,并由此推导出氨基酸序列L结果表明:①该片断长565bp,为Protegrin-1基因cDNA的部分序列,序列同源性比较表明,该基因序列与GeneBank登录的Protegrin-1基因序列具有较高的同源性,达到98.8%L②根据所测序列推导其成熟肽由18个氨基酸残基组成,其氨基酸序列与GeneBank登录的Protegrin-1的成熟肽序列完全一致。
猪, 骨髓, PPG-1, RT-PCR, 基因克隆, 序列分析
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