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2006年04月19日
王任直， DOU Wan-chen， WANG Ren-zhi， LI Gui-lin， WANG Xin， LI Xue-kun， ZHAN GBo， TIAN Shi-qiang， YAO Yong
中国应用生理学杂志，2004，20（2）：166～170，-0001，（）：
-1年11月30日
目的：探讨重组腺相关病毒2型（rAAV2）对神经干细胞球的转染能力。方法：①将FITC标记的rAAV（FITC2rAAV2）分成两组，A组直接与神经干细胞球混合，B组与肝素混匀后再与神经干细胞球混合，孵育30min后在荧光显微镜下观察；②含有GFP报告基因的rAAV2（rAAV2-GFP）与神经干细胞球孵育30min后，分成两组：A组继续在培养箱内培养，B组分散成单细胞后移植到大鼠脑内，一个月后分别在荧光显微镜下观察神经干细胞球和大鼠脑组织切片中报告基因的表达情况；③将含有低氧启动子（低氧应答元件，HRE）、VEGF和GFP的rAAV2（rAAV2-HRE-VEGF-GFP）转染神经干细胞球后分为两组：A组在低氧条件下培养，B组在常规条件下培养，72h后观察报告基因的表达情况。结果：①FITC-rAAV2转染神经干细胞球的结果：A组有明亮的绿色荧光，B组基本无绿色荧光；②rAAV2-GFP转染神经干细胞球后一个月，A、B两组均可以看到绿色荧光；③rAAV2-HRE-VEGF-GFP转染神经干细胞球后72h，A组可见绿色荧光，B组无绿色荧光。结论：rAAV2可以与神经干细胞球特异性结合，rAAV2携带的外源基因在体内和体外均可以有效表达，rAAV2携带外源基因的表达可以人为调控。
rAAV2， 转染， 神经干细胞球
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2006年04月19日
王任直， Kong Yan-guo#， Ren Zu-yuan， Su Chang-bao， Wang Ren-zhi， Xing Bing
Acta Aead Med Sin, 2004, 26 (2): 164～167，-0001，（）：
-1年11月30日
目的 探讨外周血中血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor， VEGF）的表达水平是否可反映垂体腺瘤的生物行为。方法以203例垂体腺瘤患者、22例垂体增生患者、7例垂体Rathke囊肿患者及例垂体脓肿患者为研究对象，并以85例正常献血者为对照组，用酶联免疫吸附法测定各组外周血中VEGF水平。结果在 垂体疾病患者中，垂体腺瘤患者的血清VEGF水平为（366.8±211.1）pg/ml，垂体增生患者为（286.8±107.6）pg/ml，分别高于垂体Rathke囊肿患者（180.5±61.7）pg/ml、垂体脓肿患者（147.5±46.3）pg/ml和正常对照组（180.8±56.2）pg/ml，差异均具有显著性（P<0.05）。在垂体腺瘤患者中，大腺瘤（380.0±234.5）pg/ml和巨大腺瘤（380.1±280.3）pg/ml分别高于微腺瘤（294.6±111.6）pg/ml和垂体增生，差异有显著性差异（P<0.05）。而血清VEGF在垂体腺瘤是否具有侵袭性生长、卒中、囊性变和激素分泌类型上表达无差异（P<0.05）。结论 外周血VEGF水平可反映垂体腺瘤生长大小的生物学行为，不能反映垂体腺瘤是否具有侵袭性生长、出血卒中、囊性变及激素分泌类型。检测外周血中VEGF水平对垂体腺瘤与垂体Rathke囊肿、垂体脓肿的鉴别可能具有一定的参考价值。
垂体肿瘤， 血管内皮生长因子
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2006年04月19日
王任直
《中国医刊》，2004，39（2）：41～42，-0001，（）：
-1年11月30日
目的 总结脑肿瘤卒中的临床特点，探讨其发病机制，促进对其诊断的认识，从而提高治疗水平。方法 回顾分析28例脑肿瘤卒中的临床资料。结果 脑肿瘤卒中主要见于垂体腺瘤、胶质瘤、转移瘤等。卒中表现为颅内血肿、蛛网膜下腔出血。结论 了解脑肿瘤卒中的临床特点，有利于早期诊断和治疗。
脑肿瘤， 卒中， 临床特点
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2006年04月19日
王任直， Zhang Bo， Wang Ben-zhi*， Li Gui-lin， Yao Yong， Dou Wan-chen， Li Shi-fang， Tian Shi-qiang， Yin Jian
中国医学科学院学报，2004，26（1）：8～11，-0001，（）：
-1年11月30日
目的 研究成年大鼠脑梗死后自体神经干细胞的原位增殖，并探讨其可塑性。方法雄性Wistar大鼠共68只，分对照组（n=8），脑梗死后1、3、7、14、28d组，每组12只。免疫组织化学方法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶（BrdU）、Brdu/多唾液酸神经细胞黏附分子（PSA-NCAM）的表达。结果 与对照组相比，室下区和海马BrdU阳性细胞在脑梗死后1d开始增加（P<0.05），7d达到高峰，14d后开始下降，但仍高于对照组（P<0.05），28d后接近正常水平；室下区和海马BrdU/PSA-NCAM阳性细胞在脑梗死后7d开始增加（P<0.05），14d达到高峰，28d后开始下降，但仍高于对照组（P<0.05），大约占同期BrdU阳性细胞数60%。结论 脑梗死可激活自体神经干细胞原位增殖，并且大多数增殖的神经干细胞具有可塑性。
脑梗死， 神经干细胞， 增殖， 可塑性
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2006年04月19日
王任直， TIAN Shi-qiang， WANG Ren-zhi， LI Gui-lin， et al.
基础医学与临床，2004，24（3）：331～334，-0001，（）：
-1年11月30日
为了深入研究二型谷氨酸羧肽酶（glutamatecarboxypeptidaseⅡ，GCPⅡ）功能和了解其在兴奋性氨基酸代谢过程中作用，拟构建GCPⅡ的表达载体，建立稳定表达细胞株；采用聚合酶链反应，酶切连接，和蓝白筛选的方法，构建表达载体；磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞，G418筛选阳性细胞克隆；逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株。采用PCR方法扩增出GCPⅡ；构建含有GCPⅡ基因的表达载体—pcDNA3112NA；建立了细胞株HEK2932NA。成功构建了GCPⅡ的表达载体，建立了稳定表达细胞株，为深入研究该酶的功能和兴奋性氨基酸毒性作用奠定了基础。
二型谷氨酸羧肽酶， 表达载体， 稳定表达细胞株
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