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2007年05月22日

张龙现，，宁长申，蒋金书

动物学研究/Zoological Research 2001, Dec., 22 (6): 511-515，-0001，（）：

-1年11月30日

取2日龄海兰雏鸡50只,分为5组,分别接种0、0.8×106、116×106、312×106、614×106个鸭源贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)卵囊。接种后在不同的时间间隔内剖杀雏鸡,取法氏囊、气管和喉头。扫描电镜观察发现贝氏隐孢子虫主要寄生在鸡的喉头、法氏囊、气管。裂殖体有2种类型:Ⅰ型裂殖体含8个裂殖子,Ⅱ型裂殖体含4个裂殖子。子孢子或裂殖子在钻入过程中,虫体逐渐由香蕉形过渡到鼓槌形,最后形成球形的滋养体。带虫空泡分为有球形残体的带虫空泡和无球形残体的带虫空泡。观察到小配子的释放和虫体寄生于杯状细胞的现象。贝氏隐孢子虫寄生于气管引起纤毛倒伏、排列紊乱、纤毛融合、脱落; 致使法氏囊上皮肿胀, 法氏囊粘膜表面形成皱褶,微绒毛脱落、融合、排列紊乱,粘液性分泌物增多,炎性细胞渗出。

贝氏隐孢子虫，鸡，内生发育虫体，病理形态，扫描电镜

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2007年05月22日

【期刊论文】巢式PCR检测隐孢子虫卵囊的研究

张龙现，，蒋金书，刘群，宁长申，朱引洁，吴绍强

畜牧兽医学报/Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica 2003, 34 (5), 509-514，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

隐孢子虫病是一种重要的人畜共患原虫病。为了在临床样品中更准确、快速地检测隐孢子虫卵囊,从初步纯化的含有不同数量隐孢子虫卵囊的样品中和含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取DNA或用DNA纯化试剂盒对提取的奶牛粪便中卵囊DNA进行纯化之后用作起始PCR( Primary-PCR)模板,以起始PCR的产物为模板进行巢式PCR(Nested-PCR),用2对人工合成寡核苷酸分别作为两个PCR的引物,扩增片段大小分别为1325 bp和820 bp。优化了Mg2+浓度、引物浓度和dNTP浓度,并进行了特异性检验。建立的巢式PCR具有隐孢子虫属特异性,不仅扩增出新鲜样品DNA提取物中的目的片段,而且扩增出放置6年之久的DNA提取物中的目的片段。样品经过初步纯化之后,起始PCR和巢式PCR最低检测值卵囊分别为2186×103个/ml和≤2186个/ml;从含有隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中提取DNA,尔后经过DNA纯化试剂盒纯化,其起始PCR和巢式PCR 粪便中卵囊最低检测值分别为2186×107个/g和≤2186个/g。有望发展为试剂盒。

隐孢子虫卵囊，巢式PCR

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2007年05月22日

【期刊论文】从病理变化角度探讨黄艾美耳球虫活虫苗不同免疫程序的免疫保护性

张龙现，林昆华

畜牧兽医学报/Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica 1995, 26 (5), 426-434，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用黄艾美耳虫重复免疫2月龄新西兰品种无球虫兔，设计3种免疫程序：（1）均等中剂量，免疫3次，间隔10d，2000个卵囊/只·次；（2）均等低剂量，免疫5次间隔5d，200个卵囊/只·次；（3）加倍递增剂量免疫程序，免疫5次，间隔5d，起始剂量为200个卵囊/只·次。在30000个孢子化卵囊攻虫后的17d，对所有实验动物各段肠道取样，用扫描电镜进行观察，结果发现，　家兔名段肠道杯状细胞分泌旺盛，可见到大量的分泌物，粘液团块及由粘液所形成的假膜覆盖在肠粘膜表面。在肠粘膜表面见到较多的大肠杆菌。小肠肠绒毛萎缩、变短、有的胀肿，大肠肠粘膜表面的纵行皱折萎缩。相比而言，低剂量免疫的家兔小肠肠绒毛萎缩和大肠粘膜的纵行皱折萎缩均较严重，而且有较严重的卡他性肠炎。中剂量和加倍递增剂量免疫的家兔病变程度较接近。

家兔，黄艾美耳球虫，免疫，扫描电镜，病理变化

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2007年05月22日

【期刊论文】家兔黄艾美耳球虫苗免疫的血清抗体消长规律研究

张龙现，林昆华，杨汉春，殷偑云

中国农业科学/Scientia Agricultura Sinica 1995, 28（增刊）：183-189，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

应用建立的ELISA成功地检测了家兔黄艾美耳球虫免疫后的血清IgG抗体水平。结果表明，在首免15d说可检测到血清IgG抗体，首免25d左右血清IgG抗体达到高峰值，二免30~35d左右又测到一个高峰徝。攻虫后血清IgG抗体明显升高；重复免疫所诱发的血清抗体IgG水平明显高于一次免疫所诱发的血清抗体IgG水平；但是血清IgG水平与保护率无相关性。孢子化的可溶性卵囊抗原同非孢子化的可溶性卵囊抗原比较测定结果表明，卵囊制作抗原方便易行，孢子化卵囊的抗原性更强，孢子化卵囊的可溶性抗原更适于作为ELISA包被抗原。

黄艾美耳球虫， ELISA， IgG抗体

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2007年05月22日

【期刊论文】家兔黄艾美耳球虫血清抗体ELISA检测法的建立

张龙现，林昆华，杨汉春，殷偑云

中国兽医学报1995年6月第15卷第2期/Chinese Journal of Veterinary Science June., 1995, Vol. 15, No. 2，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

应用制备的孢子化卵囊可溶性抗原作为包被抗原了兔球虫血清抗体的ELISA检测法。其最适条件为：抗原包被浓度，200μg/mL;包被温度，370C（2h）；血清反应时间，1.5h；酶标抗体标准工作浓度，1：1000；反应时间，1h；待检血清稀释度，1：100；ELISA试验的规定吸收值为0.06。隐隐化卵囊可溶性抗原非孢子化卵囊可溶性抗原更适于作为ELISA包被抗原。

ELISA，黄艾美耳球虫，免疫，兔，球虫病

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