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2005年02月25日

【期刊论文】钠泵抑制物噬菌体单链抗体库的构建

吕卓人, 原卫清, 王颢, 陈萍, 韩骅, 牛利国

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-1年11月30日

摘要

目的 应用噬菌体展示技术构建钠泵抑制物单链抗体库。方法 用OUA-OVA(ouabain-ovalbumin)免疫小鼠,取脾脏,分离淋巴细胞,提取mRNA,逆转录成cDNA 第一链,用简并引物经PCR 分别扩增轻、重链抗体库,经重叠延伸PCR 由Linker 将轻、重链拼接成ScFv(单链抗体),用RS 引物以ScFv 为模板进行第2 次PCR,同时在5’及3’端分别加上SfiI, NotI 酶切位点。经SfiI, NotI 酶切后,在T4 连接酶的作用下将ScFv 与Pcantab 5E噬菌粒连接,电转化进入TG1 大肠杆菌,挑取12个单菌落提取质粒用EcoR I 和Hind Ⅲ进行酶切签定,后经M13KO7 辅助噬菌体拯救,离心收集上清即为全套ScFv 基因的噬菌体表面展示文库。结果 以OUA-OVA 免疫小鼠,检测血清中抗体效价可达(1:2×106),用通用引物分别扩增出轻、重链片段的大小为325bp×1011 的转化效率转染TG1 细胞,EcoR I和Hind Ⅲ酶切后,12个单菌落所提噬菌粒DNA中有10 个切出了约为1.2×108. 经M13KO7超感染后,测噬斑滴度为9×1014pfu·L-1。结论 成功地构建了钠泵抑制物噬菌体单链抗体库。

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2005年02月25日

【期刊论文】留学生本科教育的实践与改革新思路

吕卓人, 程彦斌, 习博, 范桂香, 侯樊兴, 郭桦, 马兆明, 周玉玲, 谢晓峰, 赵安平, 熊晓放

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-1年11月30日

摘要

西安交大医学院于1995年在国内最先开设留学生医学本科教育。6年来,招生数稳步增加,形成了一定的办学规模。教育中吸取国外经验,从制定教学计划、教学大纲、教材建设到学生管理等,形成了完整的体系。最近结合2001 年教学计划的调整,又提出了多项教改革思路。通过留学生教育促进了师资队伍建设和学科发展,推动了医学教育改革的深化,促进国内外医学人才的培养。留学生教育也为我国医学教育走向世界,促进国际交流,提高我国声誉和创建世界知名大学创造了经验。

留学生教育, 医学本科教育, 实践, 教学改革

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2005年02月25日

【期刊论文】更新教育理念是创建精品课程的前提

吕卓人

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-1年11月30日

摘要

创建精品课程是提升高校教学质量的重要机遇和重大举措。创建精品课程的过程不可避免地会遭遇新旧教学理念的撞击。本文根据我校在建设国家级精品课程“诊断学”过程中的经验和教训,提出七个方面教育理念的更新是创建精品课程的前提和必要条件。

教育理念, 精品课程, 诊断学

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2005年02月25日

【期刊论文】哇巴因多克隆抗体F(ab)2片段制备及其分子量测定

吕卓人, 张明娟, 袁育康, 贺浪冲, 王颢

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-1年11月30日

摘要

目的 制备哇巴因多克隆抗体F(ab)2 片段,并对其进行分子量的测定。方法 免疫家兔制备哇巴因多克隆抗体,在适宜的条件下,用胃蛋白酶酶解哇巴因多克隆抗体,制备F(ab)2 片段。酶解产物经HPSEC 分析、纯化,ELISA法检测其免疫学活性。并在适宜的色谱条件下,分别测定三种标准蛋白的洗脱体积,绘制标准曲线,测定其分子。结果100mg哇巴因多克隆抗体在2mg 胃蛋白酶消化18h,反应体系pH3.0的条件下消化,制备出了活性的F(ab)2 片段,其相对分子质量为107kD。结论 用胃蛋白酶消化哇巴因多克隆抗体,可制备出活性的F(ab)2片段,同时其相对分子质量的测定为其进一步研究提供了依据。

哇巴因, 抗体, F(, ab), 2 片段, 制备, 相对分子量

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2005年02月25日

【期刊论文】哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达影响的研究

吕卓人, 原卫清, 王颢

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-1年11月30日

摘要

目的 对比研究哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵(Na+-k+-ATP 酶)α亚单位基因表达的影响。方法 长期给予大鼠注射小剂量哇巴因(20μg·kg-1·d-1)与地高辛(32μg·kg-1·d-1),分别应用分子生物学RT-PCR 及免疫组织化学技术分析大鼠心肌钠泵α1、α2 及α3 亚单位mRNA 及蛋白水平基因表达的改变。结果 长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高,而地高辛对大鼠血压无影响。无论是在mRNA 水平还是在蛋白水平,哇巴因组大鼠心肌钠泵α1亚单位表达减弱,α3亚单位表达增强,而α2亚单位表达无改变;地高辛组大鼠心肌钠泵α3亚单位表达增强,而α1与α2亚单位表达无改变。结论 哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变。

哇巴因, 地高辛, 心肌, 基因

合作学者

  • 吕卓人 邀请

    西安交通大学,陕西

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