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2005年03月08日

【期刊论文】旋毛虫pcDNA3.1/Ts87重组质粒的构建和表达

诸欣平, 杨雅平, 诸欣平*, 杨静, 张路平, 徐旭娜, 黄松, Pascal BOireau

中国寄生虫学一寄生虫病杂志,2003,2(21):93~95,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 构建和表达旋毛虫重组质粒。方法 PCR法在旋毛虫抗原基因,Ts87两端加上合适的酶切位点和KOZAK序列,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1/Ts87重组质粒。采用Lip。fect锄ine介导的细胞外源DNA转染法,把重组质粒导人COs7细胞。分别用肌肉注射和基因枪免疫小鼠。结果和结论成功构建pcD-NA3.1/Ts87重组质粒,并在COs7细胞和BALB/c小鼠体内表达。

旋毛虫, DNA质粒, 基因枪, 构建, 表达

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2005年03月08日

【期刊论文】免疫血清、巨噬细胞及补体对体外培养旋毛虫肌幼虫的杀伤作用★

诸欣平, 王少华, 诸欣平**, 杨雅平, 杨静, 姜洪杰

寄生虫与医学昆虫学报,2003,1(10):7~10,-0001,():

-1年11月30日

摘要

为进一步了解旋毛虫成虫抗原免疫血清在体外对旋毛虫肌幼虫的杀伤情况,采用体外培养方法进行了免疫血清、免疫血清与巨噬细胞、免疫血清与巨噬细胞及补体对旋毛虫肌幼虫的杀伤试验。结果显示:单纯免疫血清对体外培养的旋毛虫肌幼虫无明显杀伤作用,而免疫血清与巨噬细胞或免疫血清与巨噬细胞及补体联合对体外培养的旋毛虫肌幼虫均有杀伤作用,以免疫血清联合巨噬细胞及补体的作用最显著。

旋毛虫肌幼虫 免疫血清 巨噬细胞 补体 体外杀伤

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2005年03月08日

【期刊论文】旋毛虫Ts87抗原的免疫学特性及保护性的初步研究*

诸欣平, 杨静, 诸欣平**, 杨雅平, 雷丽萍

动物学杂志,2003,3(38):52~55,-0001,():

-1年11月30日

摘要

应用Western blot 和ELISA 方法对纯化的重组蛋白PET-28a(+)/Ts87 进行免疫学特性鉴定及保护性研究。Westernblot和ELISA结果显示,Ts87抗原可被人工感染旋毛虫的兔血清、病猪血清、病人血清及抗Ts87的兔血清所识别。Ts87抗原免疫BABLPc小鼠,较对照组减虫率为29%,说明Ts87抗原可作为旋毛虫免疫诊断和疫苗的候选抗原。

旋毛形线虫, Ts87抗原, 诊断, 保护性免疫, ELISA

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2005年03月08日

【期刊论文】旋毛虫成虫抗原基因的原核表达及表达产物的特性分析

诸欣平, 杨静, 杨雅平, PascalBoireau, 詹斌, 冯建军, Peter Hotez

中国寄生虫病防防治杂志,2003,1(21):16~19,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 获得旋毛虫成虫抗原基因的原核表达产物并对其进行纯化及免疫特性分析。方法 旋毛虫成虫Ts87基因片段亚克隆入PET228a(+)表达载体,异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。亲和层析和电洗脱法纯化表达产物,SDS-PAGE、ELISA和Western blotting对表达产物进行分析鉴定,并将纯化的表达产物人工免疫兔。结果SDS-PAGE 结果显示,表达产物为分子量约为40kDa的重组蛋白。纯化后免疫兔获得高滴度的抗血清。该基因重组蛋白可被感染旋毛虫的猪、兔血清及人工免疫兔血清所识别,与感染囊尾蚴、棘球蚴的患者血清或感染日本血吸虫的兔血清不发生交叉免疫反应。结论 获得一个新的旋毛虫成虫T s87基因重组蛋白,该蛋白具有特异的抗原性。

旋毛虫, 基因表达, 纯化, 重组蛋白, 抗原, 鉴定

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2005年03月08日

【期刊论文】旋毛虫抗原基因Ts88的克隆及鉴定*

诸欣平, 杨雅平, 杨静, 雷丽萍, Pascal Boireau

中国人兽共患病杂志,2004,20(1):19~21,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 获取旋毛虫具有抗原性的新基因。方法 应用旋毛虫免疫血清和人工感染血清对旋毛虫成虫cDNA文库约3×105重组噬菌斑进行筛选。基因克隆、DNA测序及5’-RACE 获cDNA全长;采用ESEE、DNAstar软件及核苷酸序列数据库(GenBank)进行cDNA序列分析。结果 与结论免疫筛选成虫cDNA文库,获得3个阳性克隆。其中的Ts88克隆cDNA全长为1966bp,编码484个氨基酸,含有一个PWWP功能结构域及多个抗原表位。Ts88cDNA是一个尚未见报道的旋毛虫抗原新基因。

旋毛虫, cDNA文库, 基因克隆, 筛选, cDNA末端快速扩增

合作学者

  • 诸欣平 邀请

    首都医科大学,北京

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