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2009年03月30日

【期刊论文】转染干扰素-γ诱导蛋白-10基因构建树突状细胞前列腺癌瘤苗及其抗肿瘤免疫作用的检测

钟翠平，李博，唐孝达，夏术阶，徐东亮，张新华，鲁军，吴超群

中华实验外科杂志，2003，12（12）：1092-1094，-0001，（）：

-1年11月30日

目的将小鼠前列腺癌细胞株RM-1裂解产物加载树突状细胞（DC）后，转染干扰素一γ诱导蛋白-10（IP-lO）基因构建DC瘤苗，探讨该瘤苗对小鼠抗肿瘤免疫匣应的诱导作用。方法将RM-l细胞的裂解产物作为肿瘤抗原加载小鼠骨髓来源的Dc，并通过脂质体法转染IP-10基因，构建DC瘤苗；检测DC瘤苗的抗前列腺癌免疫治疗作用和免疫保护作用。结果转染DC强表达IP-10，其上清对淋巴细胞有较强的趋化作用；构建的DC瘤苗能诱导特异性抗前列腺癌免疫反应，经瘤苗处理的荷瘤小鼠瘤体生长减慢，存活期延长；瘤苗还具有明显的免疫保护作用。结论构建的前列腺癌DC瘤苗在体内能有效诱导抗肿瘤免疫反应和免疫保护功能。

树突状细胞，干扰素-γ，前列腺癌，免疫治疗

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2009年03月30日

【期刊论文】转化生长因子β1基因转染对大鼠骨髓树突状细胞免疫功能的影响

钟翠平，张新华，钟翠平*，周播江，顾云娣，冯久贤，吴超群

解剖学报，2004，4（2）：184-189，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的研究人转化生长因子βl（TGFβ1）基因修饰对大鼠骨髓树突状细胞（DC）免疫功能的影响。方法构建TCFβ1-pcDNA3质粒并转染未成熟DC。检测转染后DC的TGFβ1表达及其功能变化，输注l周后检测TGFβ1-DC在受者睥和淋巴结的分布、T细胞捅亡水平及T绳胞端粒酶表达。结果 TGFβ1-pcDNA3船最粒转染Dc能有效抑制DC的成熟和分化，并下调DC的多种功能。TG即1基因转染不仅能降低DC对LPS的反应，同时抑制DC在MLR中刺激T细胞增殖的能力。TGFβ1-DC输注受者后，l周内可在脾和淋巴结内形成微嵌合，并有效诱导T细胞的凋亡，抑制T细胞端粒酶的活性和表达。结论 TGFβl基因能有效抑制DC的多种功能，可用于诱导机体免疫耐受。

转化生长因子βl基因，树突状细胞，免疫功能，基因转染，大鼠

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2009年03月30日

【期刊论文】肝再生大鼠血清诱导骨髓干细胞向肝细胞分化的实验研究

钟翠平，周播江，顾云娣，张新华，梁春敏，吴超群

中华肝脏病杂志，2004，12（12）：730-733，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的观察肝大部切除大鼠再生血清和肝细胞生长因子（HGF）诱导骨髓干细胞向肝实质细胞分化的作用；探讨骨髓干细胞向肝细胞分化和增殖的体外培养条件和方法，为患者应用自身骨髓细胞修复损伤肝脏提供实验依据。方法制作肝大部切除大鼠肝再生动物模型，收集术后24h血清；分别应用鼠肝再生血清和HGF对大鼠骨髓细胞进行定向诱导分化培养；以免疫组化、RT-PCR和westernblot等方法对分化不同阶段细胞进行检测。将分化细胞经尾静脉输入同系大鼠，观察输注细胞在肝、脾内的生长情况。结果活体移植分化细胞能定向迁移至肝和脾；体外及体内分化细胞在mRNA水平和蛋白贡水平均表达白蛋白，并在一定时期内表达甲胎蛋白。结论大鼠骨髓干细胞在肝大部切除再生血清或HGF的诱导下能横向分化为肝实质样细胞。

骨髓，干细胞，肝细胞生长因子

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2009年03月30日

【期刊论文】核因子-kB对小鼠树突状细胞分化成熟及其体外刺激T细胞免疫反应的影响

钟翠平，徐东亮，唐孝达，李博，刘永，张新华，吴超群

中华器官移植杂志，2004，3（2）：89-92，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的探讨在小鼠树突状细胞（DC）成熟过程中核因子-kB（NF-kB）基因的作用。方法应用特异性NF-kB寡聚脱氧核甘酸诱骗剂（NF-kBODNDecoys）阻断NF-kB活性，观察DC形态、细胞表面分子表达以及同种T淋巴细胞增殖反应的变化，了解NF-kB其因对DC成熟及免疫生物活性的影响。结果 NF-kBODNDecoys的有效摄取，抑制了DC表面共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达和白细胞介素12（IL-12）的分泌，阻碍了DC的发育成熟，这种阻碍作用不可被脂多糖（LPS）所逆转。混合淋巴细胞反应显示，NF-kBODNDecoys的应用可诱导DC刺激同种T淋巴细胞低反应活性，抑制了T细胞IL-2和y-十扰素（IFN-y）的分泌。结论 NF-kB是DC发育成熟过程中关键性调控基因。应用NF-KbODNDecoys可抑制DC的成熟，从而为生成耐受原性未成熟DC、诱导移植免疫耐受提供了一种新的途径。

核因子-KB，寡核苷酸探针，树突细胞，免疫耐受

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2009年03月30日

【期刊论文】小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建

钟翠平，梁春敏，，钟翠平*，郑宁，吴欣，孙瑞霞，刘银坤，叶胜龙

解剖学报，2004，4（2）：147-151，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的构建含小鼠次级淋巴组织趋化因子（SLC）cDNA的重组腺相关病毒载体。方法以C57BL/6J小鼠的淋巴组织为材料抽提总RNA，用RT-PCR方法克隆小鼠SLC的成熟肽基因。PCR产物回收后经EcoRI和Xho双酶切，插人pAAv-IRES-hrTGFP质粒，用磷酸钙法，与pAAV-Rc和pHetpeR三者共同转染HEK293细胞。包装成重组的病毒颗粒，并通过绿色荧光蛋白（CFP）报告基因荧光检测及抽提病毒DNA，进行PCR扩增等进一步证实重组病毒的形成。结果约500bp的小鼠SLC成熟肽基因被成功克隆，序列分析表明，所克隆的SLC基因与基因库注册的相同，组载体的酶切及测序鉴定表明SLC基因被定向插入。重组载体转染HEK293细胞，经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测，证实已完成对重组病毒的包装。并表达GEP。结论成功构建了SLC成熟肽基因重组腺相关病毒载体。

次级淋巴组织趋化因子， RT-PCR，载体，重组腺相关病毒，小鼠

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