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【期刊论文】人钠/二羧酸协同转运蛋白1基因融合表达及其抗体制备
何娅妮, 陈香美*, 于志恒, 吕杨, 师锁柱, 朱晗玉, 彭丽霞
中国生物化学与分子生物学报,2002,18(3):356~360,-0001,():
-1年11月30日
利用DNA重组技术,将编码人钠/羧酸协同转运蛋白l(hNaDCI)抗原表位区(W138-Q219)的cDNA克隆至融合表达栽体pCEX-5 X-I,构建重组质粒pCEX-hNaDCL6。在大肠杆菌BI21中,经IPTC诱导,获得谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hNaDCI重组融合蛋白的表达。以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,获得纯化的CST-hNaDCI,以此为免疫原制备的抗hNaDCI抗体可特异性识别人类和大鼠肾组织以及小肠组织中天然的钠/二羧酸协同转运蛋白1。利用该抗体,首次证实了hNaDC1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘,与大鼠钠,二羧酸协同转运蛋白l(SDCTl)分布一致。
人钠/, 二羧酸协同转运蛋白1,, 融合表达,, 抗体制备
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【期刊论文】人Cubilin基因融合蛋白表达及其抗体的制备*
何娅妮, 杨聚荣, 蒋建新, 向德兵, 朱妙珍
JNephrolDialyTransplant,2005,14(2)194~196,-0001,():
-1年11月30日
hCubilin 融合蛋白表达 融合抗体制备
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何娅妮, 陈香美
生理科学进展,2003,34(3):245~247,-0001,():
-1年11月30日
钠/二羧酸转运蛋白(NaDCs)是一类负责转运枸橼酸、琥珀酸及a-酮酸等三羧酸循环中间产物的跨膜有机阴离子转运蛋白。分布于小肠、肾脏、肝脏、肾上腺、脑、肺及胎盘等组织。它不仅参与能量代谢、酸碱平衡调节,而与氨基酸及糖皮质激素的合成也有密切关系,新近研究发现它可能还是调控哺乳类寿限的重要基因之一。本文对NaDCs的生物学功能及病理生理意义做一综述。
钠/, 二羧酸转运蛋白, 有机阴离子, 肾脏
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【期刊论文】反义cubilin RNA对白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌趋化因子的影响
何娅妮, 杨聚荣, 周萍, 刘大维, 张建国, 陈晶
中华肾脏病杂志,2004,20(4):250~254,-0001,():
-1年11月30日
目的观察反义cubilin RNA对白蛋白刺激人近端肾小管上皮细胞(HK-2)表达单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、RANTES的影响。方法应用基因克隆技术构建反义及正义cubilin真核表达载体(pcDNA-ACUB、pcDNA-CUB),酶切鉴定及序列测定证实插入序列是否正确。脂质体DOTAP将其转染至HK-2细胞,流式细胞仪(FCM)检测反义cubilin RNA对HK-2细胞重吸收白蛋白的抑制作用。细胞转染72h后给予高浓度白蛋白(10g/L)刺激24h,细胞ELISA、Western印迹法检测HK-2细胞表达MCP-1、RANTES的变化。结果pcDNA-ACUB转染组白蛋白摄取率较DOTAP组显著降低(P<0.01)。与DOTAP组比较,pcDNA-ACUB转染组HK-2细胞MCP-1、RANTES的表达显著降低(P<0.001)。结论反义cubilin RNA可抑制肾小管上皮细胞对白蛋白的摄取,并能拮抗白蛋白刺激肾小管上皮细胞趋化因子的表达,提示cubilin在白蛋白介导的肾小管上皮细胞分泌趋化因子中起重要作用。
反义RNA, 趋化因子, 白蛋白, cubilin, 肾小管上皮细胞
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