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【期刊论文】鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建、筛选和鉴定
詹希美, 陈代雄, 陈新宇
动物医学进展,2004,25(3):85-87,-0001,():
-1年11月30日
构建鼠源性抗日本血吸虫噬茵体抗体文库,以探索制备抗日本血吸虫单克隆抗体的新方法。用文库构建试剂盒,以感染小鼠脾脏为材料,建立了抗日本血吸虫噬茵体抗体文库,并对该抗体库进行了富集、筛选和鉴定。构建的噬茵体抗体库库容为1.07×10;从抗体库随机挑取的72个克隆中最终筛选到特异性抗日本血吸虫阳性克隆2个。SDS—PAGE和Westernblot-ring分析结果显示:两个克隆表达的单链抗体大小均为3.1万,且具有良好的特异性。日本血吸虫噬茵体抗体库的成功建立为进一步的应用奠定了基础。
日本血吸虫, 噬茵体抗体库, 构建, 筛选, 鉴定
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詹希美, 雷智刚, 何蔼, 李卓雅, 孟锦绣, 易冰
中国人兽共患病杂志,2003,19(6):34-37,-0001,():
-1年11月30日
目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2(SjeL2)的编码区基因序列,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA,RT-PCR扩增目的基因。将扩增产物定向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT-PCR特异性扩增出S)CL2编码区基因序列。其片段大小为lkb左右,经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA一CL2中含有所扩增的基因序列。结论RT-PCR扩增的SCL2编码区基因序列与预期长度相符合,成功构建了含CL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA-SfCL2。
日本血吸虫, 组织蛋白酶, RT-PCR, 基因克隆
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【期刊论文】抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的抗原定位和初步应用*
詹希美, 陈代雄, 孟锦绣, 易冰, 何蔼, 李卓雅, 张瑞琳
中国人兽共患病杂志,2003,19(4):63-65,-0001,():
-1年11月30日
目的将获得的抗日本血吸虫循环抗原的单链抗体进行抗原定位和用于诊断。方法用间接荧光抗体试验(IFA)对2株可溶性单链抗体所针对的抗原进行定位;将可溶性单链抗体进行生物素标记后,用于检测急、慢性血吸虫病人血清标本。结果两个特异性单链抗体分别于日本血吸虫成虫的肠管和生殖系统呈现明显的荧光反应。检测急性血吸虫病人血样20份,慢性血吸虫病人血样30份,正常人血样20份。结果用其中1株单链抗体检测急性病人的敏感度为60%,慢性病人的敏感度为36.7%,特异度为90%;以2株单链抗体混合检测急性病人的敏感度为75%,慢性病人的敏感度为56.7%,特异度为85%。结论经抗体库技术制备的单链抗体可用作日本血吸虫病的诊断,单抗组合较单株单抗可提高免疫学检测的敏感性。
日本血吸虫, 循环抗原, 单链抗体, 抗原定位, 检测
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詹希美, 梁瑜, 王轶, 何蔼, 李道宁, 俞慕华, 李卓雅, 张瑞琳
中国人兽共患病杂志,2003,19(2):34-37,-0001,():
-1年11月30日
目的构建广州管圆线虫成虫cDNA文库。方法提取广州管圆线虫成虫总RNA,用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,然后通过长距离PCR方法合成双链cDNA并扩增;PCR产物与kTripIEX2载体连接并包装,建成未扩增文库;检测未扩增文库滴度和重组效率后,进行文库扩增及测定扩增文库的滴度。结果经测定,未扩增文库滴度为9.7×10pfu/ml,重组效率达99.2%以上,文库扩增后滴度达9.13×10pfu/ml。结论已成功构建了广州管圆线虫成虫cDNA文库。
广州管圆线虫, cDNA文库, 构建
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詹希美, 申川军, 杨绍基, 何蔼, 郑焕钦, 张瑞琳, 李卓雅, 曹爱莲
中国人兽共患病杂志,2003,19(5)128~129,-0001,():
-1年11月30日
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