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2006年11月16日

詹希美，郑斌，余南，李卓雅，郑焕钦，何蔼，詹希美*， *

中国人兽共患病杂志，2005，21（2）：119～121，-0001，（）：

-1年11月30日

目的将克隆入pGEX-4T-1的致密颗粒蛋白基因进行表达并对表达产物的免疫反应性进行评价。方法将重组表达质粒pGEX-4T-1/GRA7转入大肠埃希菌BL21，经IPTG诱导进行SDS变性蛋白质电泳，分别以Anti-GSTAn-tibodv、免抗弓形虫阳性血清和人抗弓形虫阳性血清为-抗进行WesternBlot分析。用GSTrapFFHiTrapaffinitycolumns纯化重组蛋白，以此蛋白作为包被抗原，BLISA法检测抗弓形虫阴性、阳性血清。结果SDS变性蛋白质电泳显示在43KDa66KDa蛋白条带之间有特异蛋白的表达，蛋白分子量大小与理论值相符。WesternBlot分析表明该重组蛋白为GST融合蛋白．且该蛋白能被人抗弓形虫阳性血清、免抗弓形虫阳性血清所识别。ELISA结果表明该蛋白能与人抗弓形虫阳性血清、免抗弓形虫阳性血清特异结合，而与抗弓形虫阴性血清无反应。结论弓形虫致密颗粒蛋白基因在大肠埃希菌中得到表达；该重组蛋白具有良好的免疫反应性。

刚地弓形虫，致密颗粒蛋白7，基因表达，免疫反应性，酶联免疫吸附试验

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2006年11月16日

【期刊论文】广州管圆线虫成虫cDNA文库抗原基因的筛选*

詹希美，孟锦绣，李卓雅，吴长有，沈浩贤，梁瑜，张瑞琳，何蔼

中国人兽共患病杂志，2004，20（11）：934-937，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的从广州管圆线虫成虫cDNA文库中筛选特异性抗原基因。方法用大鼠感染血清做免疫探针，筛选广州管圆线虫成虫cDNA文库，对筛选得到的阳性克隆作交叉反应试验，PCR扩增外源基因插入片段并测序，用在线生物信息学软件进行同源性比对，推导氨基酸序列和蛋白质结构及进行功能分析。结果获得15个阳性克隆，分属三种基因，1个属中间纤维(IF)家族基因，3个与旋盘尾丝虫和秀丽杆线虫的真皮抗原同源，11个属主要精原蛋白(MSP)家族基因。其中1种基因表达产物没有发生明显交叉反应。结论从广州管圆线虫成虫cDNA文库中初步筛选出1个潜在特异性抗原基因和1个可能的主要抗原基因。

广州管圆线虫， cDNA文库，免疫筛选，抗原

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2006年11月16日

【期刊论文】广州管圆线虫Y-丁基甜菜碱羟化酶基因的获得与分析*

詹希美，孟锦绣，梁瑜，何蔼，李卓雅，雷智刚，易冰，张瑞琳

中国人兽共患病杂志，2004，20（3）：186-189，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的对广州管圆线虫成虫cDNA文库的插入片段进行研究。方法铺平板培养广州管圆线虫成虫cDNA文库，从中挑选生长、分离良好的噬菌斑进行PCR扩增，根据PCR产物电泳结果挑选较大的cDNA插入片段进行克隆、测序和原核诱导表达，对表达产物进行免疫学鉴定，用生物信息学方法分析其结构和功能。结果获得了国内外尚未见报道的广州管圆线虫全长基因，该基因长1416bp，编码由421个氨基酸组成的7-丁基甜菜碱羟化酶（gsmma-butyrobetaine,2-oxoglu-tarateclioxygenase。GAMMA-BBH,EC1.14,11.1)；免疫学鉴定结果显示GAMMA-BBH不能与大鼠的抗血清结合。结论首次获得广州管圆线虫成虫GAMMA～BBH表达基因，为广州管圆线虫的研究提供实验室依据。

广州管圆线虫， eDNA文库，克隆， 7-丁基甜菜碱羟化酶，生物信息学

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2006年11月16日

【期刊论文】基于概率神经网络的寄生虫卵显微图像识别

詹希美，郭晓敏，伍小明

计算机工程与应用，2005，15：198-223，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

病原体（虫卵）检测是诊断寄生虫病的最常用和最可靠的方法。该文对寄生虫卵显微图像的自动识别进行了研究，设计了一个基于概率神经网络的分类器。通过对血吸虫等9种寄生虫卵的显微图像进行自动识别，取得了平均正确识别率为99.23%的较好结果。

寄生虫卵，图像识别，概率神经网络

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建*

詹希美，易冰，何蔼，雷智刚，郑小英，张瑞林，孟锦绣，中川军，李卓雅

中国人兽共患病杂志，2004，20（5）：390-393，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的扩增SjCL2基因，构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZB-SjCL2，为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法运用RT-PCR技术，从日本血吸虫（中国大陆株）成虫总RNA中扩增获得SCL2基因；将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB质粒；经KpnI、xbaI双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆，测序分析SCL2基因并确定其读码框的正确插入。结果利用RT—PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的S]CL2基因，通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB中。结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB-CL2质粒。

日本血吸虫，组织蛋白酶L2，基因克隆，巴氏毕赤酵母表达载体

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