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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建*

詹希美, 易冰, 何蔼, 雷智刚, 郑小英, 张瑞林, 孟锦绣, 中川军, 李卓雅

中国人兽共患病杂志,2004,20(5):390-393,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的扩增SjCL2基因,构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZB-SjCL2,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法运用RT-PCR技术,从日本血吸虫(中国大陆株)成虫总RNA中扩增获得SCL2基因;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB质粒;经KpnI、xbaI双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序分析SCL2基因并确定其读码框的正确插入。结果利用RT—PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的S]CL2基因,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB中。结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZaB-CL2质粒。

日本血吸虫, 组织蛋白酶L2, 基因克隆, 巴氏毕赤酵母表达载体

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2006年11月16日

【期刊论文】抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的抗原定位和初步应用*

詹希美, 陈代雄, 孟锦绣, 易冰, 何蔼, 李卓雅, 张瑞琳

中国人兽共患病杂志,2003,19(4):63-65,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的将获得的抗日本血吸虫循环抗原的单链抗体进行抗原定位和用于诊断。方法用间接荧光抗体试验(IFA)对2株可溶性单链抗体所针对的抗原进行定位;将可溶性单链抗体进行生物素标记后,用于检测急、慢性血吸虫病人血清标本。结果两个特异性单链抗体分别于日本血吸虫成虫的肠管和生殖系统呈现明显的荧光反应。检测急性血吸虫病人血样20份,慢性血吸虫病人血样30份,正常人血样20份。结果用其中1株单链抗体检测急性病人的敏感度为60%,慢性病人的敏感度为36.7%,特异度为90%;以2株单链抗体混合检测急性病人的敏感度为75%,慢性病人的敏感度为56.7%,特异度为85%。结论经抗体库技术制备的单链抗体可用作日本血吸虫病的诊断,单抗组合较单株单抗可提高免疫学检测的敏感性。

日本血吸虫, 循环抗原, 单链抗体, 抗原定位, 检测

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2006年11月16日

【期刊论文】基于概率神经网络的寄生虫卵显微图像识别

詹希美, 郭晓敏, 伍小明

计算机工程与应用,2005,15:198-223,-0001,():

-1年11月30日

摘要

病原体(虫卵)检测是诊断寄生虫病的最常用和最可靠的方法。该文对寄生虫卵显微图像的自动识别进行了研究,设计了一个基于概率神经网络的分类器。通过对血吸虫等9种寄生虫卵的显微图像进行自动识别,取得了平均正确识别率为99.23%的较好结果。

寄生虫卵, 图像识别, 概率神经网络

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2006年11月16日

【期刊论文】广州管圆线虫成虫cDNA文库抗原基因的筛选*

詹希美, 孟锦绣, 李卓雅, 吴长有, 沈浩贤, 梁瑜, 张瑞琳, 何蔼

中国人兽共患病杂志,2004,20(11):934-937,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的从广州管圆线虫成虫cDNA文库中筛选特异性抗原基因。方法用大鼠感染血清做免疫探针,筛选广州管圆线虫成虫cDNA文库,对筛选得到的阳性克隆作交叉反应试验,PCR扩增外源基因插入片段并测序,用在线生物信息学软件进行同源性比对,推导氨基酸序列和蛋白质结构及进行功能分析。结果获得15个阳性克隆,分属三种基因,1个属中间纤维(IF)家族基因,3个与旋盘尾丝虫和秀丽杆线虫的真皮抗原同源,11个属主要精原蛋白(MSP)家族基因。其中1种基因表达产物没有发生明显交叉反应。结论从广州管圆线虫成虫cDNA文库中初步筛选出1个潜在特异性抗原基因和1个可能的主要抗原基因。

广州管圆线虫, cDNA文库, 免疫筛选, 抗原

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2006年11月16日

【期刊论文】广州管圆线虫成虫eDNA文库构建*

詹希美, 梁瑜, 王轶, 何蔼, 李道宁, 俞慕华, 李卓雅, 张瑞琳

中国人兽共患病杂志,2003,19(2):34-37,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的构建广州管圆线虫成虫cDNA文库。方法提取广州管圆线虫成虫总RNA,用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,然后通过长距离PCR方法合成双链cDNA并扩增;PCR产物与kTripIEX2载体连接并包装,建成未扩增文库;检测未扩增文库滴度和重组效率后,进行文库扩增及测定扩增文库的滴度。结果经测定,未扩增文库滴度为9.7×10pfu/ml,重组效率达99.2%以上,文库扩增后滴度达9.13×10pfu/ml。结论已成功构建了广州管圆线虫成虫cDNA文库。

广州管圆线虫, cDNA文库, 构建

合作学者

  • 詹希美 邀请

    中山大学,广东

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