中国科技论文在线

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2006年11月16日

詹希美，王轶

中国人兽共患病杂志，2000，16（2）：72-73，-0001，（）：

-1年11月30日

目的分离日本血吸虫雌虫特异性序列，为研制抗生殖痘苗打下基础。方法应用代表差异性分析方法利用雄虫基因扣除雌虫基因，从而获得雌虫特异性序列，约562bp。结果谈序列为探针与，Solllllenl转印的酶切后的雌、雄虫基西组DNA及检测子和驱动于杂交，免疫学检测，显示只有检测于（tester）濂道有杂交区带，驱动于（dxiver）区带没有此带。结论初步说明所获序剐为雌虫特异性序列。

日本血吸虫， RDA， DNA杂交

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2006年11月16日

【期刊论文】恙虫病东方体Karp株56kD表膜蛋白基因的表达及免疫诊断应用研究*

詹希美，赖延东，郑小英，李秀英，何蔼，吴瑜，李卓雅

中国人兽共患病杂志，2004，20（10）：829-832，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的实现恙虫病东方体56kD表膜蛋白的原核表达并评价重组蛋白作为抗原的免疫诊断价值。方法亚克隆技术构建原核表达质粒载体pGEX-Sta56。转化宿主茵BL21（DE3），JPTG诱导表达GST-Sta56融合蛋白。亲和层析纯化融合蛋白，应用ELISA以评价其免疫诊断价值。结果pGEX-StY6经测序鉴定Sta56基因以正确的表达框架连入载体，经过诱导表达得到正确大小的融合蛋白，应用纯化的GST-Sta56的ELISA检测结果与全细胞抗原有很高线性相关性，在小鼠血清检测中敏感性，特异性和准确性分别大于90%，70%和80%。结论成功表达重组的56kD表膜蛋白并可能替代传统的全细胞纯化蛋白。为建立快速、敏感和特异的免疫学诊断奠定了基础。

恙虫病东方体Karp株， 56kD表膜蛋白，原核表达，酶联免疫吸附试验

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2006年11月16日

【期刊论文】鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建、筛选和鉴定

詹希美，陈代雄，陈新宇

动物医学进展，2004，25（3）：85-87，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

构建鼠源性抗日本血吸虫噬茵体抗体文库，以探索制备抗日本血吸虫单克隆抗体的新方法。用文库构建试剂盒，以感染小鼠脾脏为材料，建立了抗日本血吸虫噬茵体抗体文库，并对该抗体库进行了富集、筛选和鉴定。构建的噬茵体抗体库库容为1.07×10；从抗体库随机挑取的72个克隆中最终筛选到特异性抗日本血吸虫阳性克隆2个。SDS—PAGE和Westernblot-ring分析结果显示：两个克隆表达的单链抗体大小均为3.1万，且具有良好的特异性。日本血吸虫噬茵体抗体库的成功建立为进一步的应用奠定了基础。

日本血吸虫，噬茵体抗体库，构建，筛选，鉴定

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L1基因的编码区全序列分析及克隆

詹希美，雷智刚，孟锦绣，何蔼，李卓雅，易冰

中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2002，20（6）：325-327，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的分析日本血吸虫组织蛋白酶LI（SjCL1）基因编码区的完整序列，并定向克隆到真核表达质粒pcD。NA3中。方法从日本血吸虫成虫提取总RNA，进行反向巢式RT-PCR，T载体克隆后测序。PCR扩增SjCL1基因的编码区序列，并将扩增产物克隆到pcDNA3质粒的BamHI和XhoI位点上。结果通过反向巢式RT-PCR扩增出332bpSjCL1基因5端序列，测序后与报道的SjCL1基因部分序列拼接，可得到一个编码317个氨基酸的完整编码区序列。PCR特异性扩增出SjCL1编码区基因序列，其大小约为1kb。经酶切、PCR鉴定和测序表明所构建的质粒pcDNh-SiCL1中含有所扩增的基因序列。结论构建了含SjCL1基因的编码区序列的真核表达质粒pcDNA。SjCL1。

RT-I，日本血吸虫，组织蛋白酶L，基因克隆

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2006年11月16日

【期刊论文】日本血吸虫组织蛋白酶L2基因扩增及克隆*

詹希美，雷智刚，何蔼，李卓雅，孟锦绣，易冰

中国人兽共患病杂志，2003，19（6）：34-37，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2（SjeL2）的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中，为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA，RT-PCR扩增目的基因。将扩增产物定向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT-PCR特异性扩增出S）CL2编码区基因序列。其片段大小为lkb左右，经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA一CL2中含有所扩增的基因序列。结论RT-PCR扩增的SCL2编码区基因序列与预期长度相符合，成功构建了含CL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA-SfCL2。

日本血吸虫，组织蛋白酶， RT-PCR，基因克隆

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