目的：构建人胰岛素样生长因子腺病毒表达载体，并观察其在C17.2神经干细胞的表达。方法：实验于2004-03/11在中山在学附属第二医院林百欣医学中心完成。将胰岛素样生长因子克隆往复制缺陷性腺病毒穿梭质粒得到含水量胰岛素样生长因子的腺病毒穿梭质粒，再与腺病骨架质一在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组得到含胰岛素样生长因子的整合质料，在HEK293A细胞中包装加膜，聚合酶链反应鉴定，大量扩增病毒。将含目的基因的病毒转染C17.2神经干细胞，原位杂交检测胰岛素样生长因子mRNA，蛋白印迹检测胰岛素样生长因子蛋白的表达，酶联名疫吸附实验检测胰岛素样生长因子蛋白的表达曲线。结果：经酶切鉴定及聚合酶链反应鉴定证实腺病毒载体构建正确。原位杂交检测到胰岛素样生长因子Mrna，蛋白印迹分析检测到胰岛素样生长因子蛋白在转染了重组腺病毒的C17.2神经干细胞内表达。酶联免疫吸附实验结果显示胰岛素样生长因子蛋白在病毒转染5～d达高峰，13d仍高于转染前。结论：成功构建了含胰岛素样生长因子的重组腺病毒载体，转染了该腺病毒C17.2神经干细胞可稳定表达胰岛素样生长因子。

背景：帕金森病患者脑内黑质多巴胺能神经元变性异致芳香族氨基酸脱羧酸（aromatic L-amino acid decarboxylase, AADC）活性水平的降低及波动是产生帕金森患者临床症状和在L-dopa替代治疗时“症状波动”等不良反应出现的重要原因之一。目的：探讨AADC基因脑内移植对帕金森病的治疗作用及其在左旋多巴治疗过程中的地位，并控讨阳离子脂质体介导的基因治疗方法的有效性。设计：2×析因设计。地点和材料：中山在学附属第二医院林百欣医学研究中心，材料主要包括人嗜铬细胞瘤组织，Trlzol，真核表达载体质粒Pcdna3，阳离子脂质体，6-OHDA，阿补吗啡，AADC单克隆抗体，SD大鼠。干预：使用基因克隆、亚克隆技术构建Pcdna3-AADC真核表达框图体将帕金病模型的SD大鼠随机分为实验组与对照组，分别以Pcd-NA3-AADC重组体和Pcd-NA3空载体进行阳离子脂质体包裹后，注射浓度的L-dopa进行治疗。采用免疫组化方法确定AADC的表达。主要观察指标：①AADC基因脑内移植后两组大鼠的旋转行为。②采用一定浓度的L-dopa进行治疗对大鼠旋转行为的影响。结果：①阳离子脂质体包裹的Pcd-NA3-AADC重组体脑内注射扣，在3，7，14，21，38d时大鼠的旋转行为获得了一定的改善（p>0.05），分别改善了56.0%，62.6%，49.4%，36.3%，27.4%，以1周时最为明显，在第5周时，其旋转行为则于移植前无明显差异p>0.05）。②使用同等浓度的左旋多巴（L-dopa，10mg/kg体质量·d）冶疗后，在上述相同的时间点时，实验组较对照组明显改善模型大鼠的旋转行为（p>0.05），以1周时最为明显，其旋转行为改善达93.4%，在第5周时，两组间差异无显著意义（p>0.05）。③免疫组化方法确定AADC在纹状体区的稳定表达。结论：增加脑内AADC基因表达可有效改善帕金森病大鼠的旋转行为，并可增加L-dopa冶疗效果，有助在低剂量上长期维持L-dopa的疗效；阳离子脂质体介导师的裸基因脑内移植技术为基因治疗帕金森病提供一种手段。

目的 对严重急性呼吸综合征（SARS）合并神经精神损害的临床特点进行分析总结。方法 回顾分析325例SARS病例，其中173例出现神经精神症状，总结分析其临床资料。结果 ①SARS神经精神症状发生率约53.2%，主要有以下几类：头痛116例（67.1%），头晕50例（28.9%），意识障碍18例（10.4%），精神障碍8例（4.6%），伴神经系统局灶定位体征者1例（0.6%），抽搐2例（1.2%），情感障碍53例（30.6%），其中焦虑35例（20.2%），抑郁11例（6.4%），自杀倾向2例（1.2%），恐惧13例（7.5%）。②325例中，重症SARS56例，伴发神经精神损害者47例，其发生率明显高于轻症（[<0.01）。③例病例眼底检查显示视乳头边缘欠清晰，生理凹陷存在，静脉充盈。④例死亡病例尸体解剖脑组织病理显示：脑组织出现 不同程度的水肿，局部神经纤维出现脱髓鞘现象。结论 SARS神经精神损害症状多样，与病情轻重显著相关。病理检查可见脑水肿及神经元脱髓鞘等损害。

Persephin是转化生长因子2β家族中的一个新亚族，该亚族还有新发现的三个成员：胶质细胞源性神经营养因子、neurturin（NRTN/NTN）、enovin/artemin（EVN/ART）。它们均不同程度地对多巴胺神经元、脊髓前角运动神经元、后根神经节、颈上神经等有生长促进作用。Persephin与其他三种胶质细胞源性神经营养因子具有许多共同点，但Persephin的基因结构、分布、对多巴胺能神经元的生理作用及信号转导途径且有其独特的一面，提示其在治疗帕金森病与运动神经疾病的临床应用中可能较其他几个营养因子具有更好的应用前景。

【目的】初步鉴定C17.2神经干细胞的特性并研究不同浓度6-羟基多巴对C17.2神经干细胞毒性及NURR1基因对C17.2神经干细胞的保护作用。【方法】免疫组化检测神经干细胞特异抗原nestin，X-gal染色检测LacZ基因的表达，流式细胞仪检测剂量为0.02、0.04、0.06g/L6-羟基多巴在添加含有NURR1基因的重组复制缺陷病毒前后诱发神经干细胞的坏死和调亡。【结果】C17.2神经干细胞nestin抗原染色阳性，绝大部分细胞呈X-gal染色阳性，0.02g/L时6-羟基多巴以诱导神经干细胞调亡为主，随着剂量增加，细胞坏死增多，0.06g/L时则以神经干细胞的坏死为主，NURR1基因过表达能明显减少神经干细胞的坏死和调亡。【结论】C17.2神经干细胞具有明显的特性，6-羟基多巴诱发的C17.2神经干细胞调亡或坏死与其剂量有关，NURR1基因对神经干细胞有保护作用。