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储卫华

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姓名：储卫华
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岩土力学
研究兴趣：

个人简介

储卫华，男，1971年11月生，江苏东台人，2002年博士毕业于南京农业大学，2006年从南京理工大学化学工程与技术博士后流动站生物化工专业出站到中国药科大学任教。长期从事微生物与免疫学方面的教学与科研工作。中国微生物学会永久会员，中国水产学会会员。参加国家级和省级课题多项，主持江苏省博士后基金项目“新型抗菌物质—抗菌肽基因的克隆与表达”，中国药科大学引进人才基金“食源性病原菌的快速检测方法的研究”，南京市科技发展计划项目“产细菌素益生素的研制”等项目。获南京市第五届自然科学论文三等奖。

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2007-11-20

【期刊论文】Adjuvant effect of propolis on immunisation by inactivated Aeromonas hydrophila in carp (Carassius auratus gibelio)

储卫华， Wei-Hua Chu

Fish & Shellfish Immunology 21 (2006) 113-117，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Propolis， Adjuvant， Aeromonas hydrophila， Carassius auratus gibelio

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2007-11-20

【期刊论文】Multiplex PCR assay for the detection of pathogenic Aeromonas hydrophila

储卫华， W-H Chu， C-P Lu

Journal of Fish Diseases 2005, 28, 437-441，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Aerogene， Aeromonas hydrophila， detection， 16Sr DNA， Dot-ELISA， multiplex PCR

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2007-11-20

【期刊论文】PCR扩增特异性16S rDNA 和溶血素基因检测致病性嗜水气单胞菌

储卫华，陆承平

水产学报2005年2月第29卷第1期/JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Feb., 2005, Vol. 29, No. 1，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

根据已发表的气单胞菌16S rDNA 基因序列及气单胞菌气溶素(aerolysin) 基因序列，设计了2对引物，建立了检测致病性嗜水气单胞菌的PCR方法。通过对12 株气单胞菌的检测，发现16S rDNA 引物具有高度的特异性，仅对嗜水气单胞菌扩增阳性。而Aero 基因引物检测结果与采用生物学方法(鲜血平板法) 检测的结果符合率为97.2 %，且具有高度的敏感性，可检测最低1fg 的模板。将16S rDNA 与Aero 基因结合PCR方法检测致病性嗜水气单胞菌与用致病性嗜水气单胞菌检测试剂盒的符合率为94.4 %。该方法的建立为致病性嗜水气单胞菌的检测提供了一种简便、快速的途径，是一种比较实用的致病性嗜水气单胞菌的检测方法。

嗜水气单胞菌， 16S rDNA，气溶素基因，聚合酶链式反应，检测

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2007-11-20

【期刊论文】抗菌肽基因在毕赤酵母中分泌表达及其条件优化

储卫华，李大力，汪信

农业生物技术学报Journal of Agricultural Biotechnology 2006, 14 (6): 976-980，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽cecropin A(1-8) -melittin( 1-18) 基因片段，合成片段与酵母表达载体pPIC9K 重组，构建胞外分泌表达载体pPIC9K-came，电击法转化毕赤酵母(Pichia pastoris) SMD1168 宿主菌，对CAME抗菌肽重组酵母菌的摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明，酵母表达抗菌肽具有抗菌活性且溶血活性显著降低；重组酵母在含2%葡萄糖pH 7.0 的YPD 培养液中，250 r/min 震荡培养24 h 后，重组酵母菌的A600 为6.0 时，经0.5%甲醇在28 ℃条件下诱导48 h 能够诱导产生较高抗菌活性的抗菌肽。

抗菌肽，天蚕素-蜂毒素，摇瓶发酵，抗菌活性，优化

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2007-11-20

【期刊论文】卵黄抗体被动免疫防治仔猪产肠毒素大肠杆菌性腹泻

储卫华，高国峰

中国兽医学报2006年11月第26卷第6期/Chin J Vet Sci Nov., 2006, Vol. 26, No. 6，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用ETECK88 菌株C83907对120日龄待开产蛋鸡进行免疫，获得高免卵黄抗体粉。选用3日龄和21日龄的杜×长×大三元杂交早期断奶仔猪，人工感染C83907 大肠杆菌，口服含抗产肠毒素大肠杆菌抗体的卵黄粉进行被动免疫。结果显示，3日龄仔猪服用抗 ETEC 卵黄抗体粉后，72 h 腹泻停止，而服用普通蛋黄粉组却仍然腹泻并且有6617%的死亡率；服用抗ETEC卵黄抗体粉的 21日龄仔猪仅有短暂腹泻现象，存活率 100%，试验期间总体质量有所增加，而对照组表现严重腹泻伴有脱水现象，试验期间有部分猪只死亡；临床应用表明，喂以3 g和5 g抗ETEC卵黄粉组的治愈率与抗生素治疗组相当。研究结果表明，卵黄抗体对早期断奶仔猪有一定的促进生长和防止腹泻的效果。

卵黄抗体( IgY)，产肠毒素大肠杆菌，腹泻，仔猪

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2007-11-20

【期刊论文】培养条件对嗜水气单胞菌胞外蛋白酶合成与分泌的影响

储卫华，陆承平

南京农业大学学报 Journal of Nanjing Agricultural University 2001, 24 (3): 65-68，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

对体外培养嗜水气单胞菌的胞外蛋白酶 (ECPase) 产生条件进行了优化。结果发现，其产量与碳源、氮源、培养温度、培养基初始pH值等有关。蔗糖能促进蛋白酶的产生， NH4+抑制蛋白酶的产生。其最佳产酶条件为: pH 7.5 的0.02 mol·L-1KC1，0.06 mol·L-1 K2HPO4，5 g·L-1的蔗糖和5 g·L-1的胰蛋白胨水，28 ℃，150 r·min-1 摇床培养 65 h。在此条件下酶活性可达2018 U·mL -1。

嗜水气单胞菌，胞外蛋白酶，培养条件

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2007-11-20

【期刊论文】筛选产类细菌素乳酸菌及类细菌素特性研究

储卫华，曹映海，高国峰

微生物学杂志2006年1月第26卷第1期/JOURNAL OF MICROBIOLOGY Jan., 2006, Vol. 26, No. 1，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

从健康鸡肠道内容物及新鲜粪便中分离到21株乳酸菌，通过单层琼脂平板扩散实验，筛选出1株对藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和枯草杆菌(Bacillus subtilis)等革兰氏阳性菌和大肠杆菌(Escherichia coli)等革兰氏阴性菌有明显抑菌活性代谢产物的乳酸菌，经细菌鉴定为乳杆菌属。排除酸和过氧化氢的干扰后，发酵液上清对指示菌仍有抑菌活性；用胰蛋白酶和蛋白酶 K处理后抑菌活性明显降低，而胃蛋白酶对其活性无影响；用过氧化氢酶作用上清液，抑菌效果不变，说明过氧化氢未起作用；pH在 2. 0～7. 0 时，发酵上清液有抑菌活性；培养液粗提物经 120 ℃处理 20 min仍有部分活性，表明培养上清中有蛋白质类细菌素。

乳酸菌，类细菌素，特性

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2007-11-20

【期刊论文】筛选用转座子Tn916诱变的具有免疫原性的嗜水气单胞菌蛋白酶缺失株

储卫华，陆承平

水产学报2001年6月第25卷第3期/JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Juen., 2001, Vol. 25, No. 3，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

以携带质粒pAM120(Apr、Tcr/Tn916)的大肠杆菌CG120株为供体菌，与受体菌嗜水气单胞菌J-1株，采用滤膜接合法进行接合转移，在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选，筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase-)，ECPase-菌株其生长速度，对正常鲫血清的抗性降低，用脱脂奶平板法及底物法检测，蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比，突变株致病力降低，对鲫的半数致死量大于108(J-1株对鲫的半数致死量为5×103)。用ECPase-突变株MJ-1株的18h培养物(5×106CFU)接种健康鲫，不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-I活菌免疫鲫，在第5周产生较高的凝集抗体，且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子，ECPase-突变株仍具有免疫原性。

嗜水气单胞菌，胞外蛋白酶， Tn916诱变

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2007-11-20

【期刊论文】嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的化学修饰

储卫华，陆承平

中国生物化学与分子生物学报Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 2001年6月17(3): 372-375，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

蛋白酶是嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila)的重要致病因子。为研究其结构与功能之间的关系，用DEPC、 EDC、 PMSF、 N-AI等9种化学修饰剂处理嗜水气单胞菌J-1 株胞外蛋白酶 ECPase54，然后检测残余酶活力，借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系。结果表明，羧基、丝氨酸、ε-氨基、胍基等残基与酶活性无关；半胱氨酸残基与酶活性也无直接关系；而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链以及二硫键的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降，说明色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基以及二硫键是酶活力所必需的基团。

嗜水气单胞菌，胞外蛋白酶，化学修饰，酶活性

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2007-11-20

【期刊论文】嗜水气单胞菌侵袭力与宿主细胞信号转导和骨架的关系

储卫华，陆承平

微生物学报2003年12月第43卷第6期/Acta Microbiologica Sinica December 2003, Vol. 43, No. 6，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Invasion of Aeromonas hydrophila strain Ah J-1 isolated from diseased fish to cultured HEp-2cells monolayer was evaluated by the recovery of gentamincin-resistant (Gmr) bacteria from Triton X-100 cell lysates. The invasive efficiency ( IE) could reach to 0.2 % at 37℃. In addition, potential signal transduction pathways that precede bacterial internalization were studied by using signal transduction inhibitors. Bacterial internalization of Ah J-1 involved microfilaments and protein tyrosine kinase since cytochalasin D (an inhibitor of microfilament polymerization) and genistein (an inhibitor of protein tyrosine kinase) prevented internalization. Staurosporine (a protein kinase C inhibitor) and Sodium orthovanadate (a protein tyrosine phosphatase inhibitor) accelerated internalization of Ah J-1 into HEp-2 cells.

嗜水气单胞菌，侵袭，信号转导，细胞骨架

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2007-11-20

【期刊论文】Multiplex PCR assay for the detection of pathogenic Aeromonas hydrophila

储卫华， W-H Chu， C-P Lu

Journal of Fish Diseases 2005, 28, 437-441，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Aerogene， Aeromonas hydrophila， detection， 16Sr DNA， Dot-ELISA， multiplex PCR

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2007-11-20

【期刊论文】Adjuvant effect of propolis on immunisation by inactivated Aeromonas hydrophila in carp (Carassius auratus gibelio)

储卫华， Wei-Hua Chu

Fish & Shellfish Immunology 21 (2006) 113-117，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

Propolis， Adjuvant， Aeromonas hydrophila， Carassius auratus gibelio

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2007-11-20

【期刊论文】抗菌肽基因在毕赤酵母中分泌表达及其条件优化

储卫华，李大力，汪信

农业生物技术学报Journal of Agricultural Biotechnology 2006, 14 (6): 976-980，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

抗菌肽，天蚕素-蜂毒素，摇瓶发酵，抗菌活性，优化

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【期刊论文】筛选产类细菌素乳酸菌及类细菌素特性研究

储卫华，曹映海，高国峰

微生物学杂志2006年1月第26卷第1期/JOURNAL OF MICROBIOLOGY Jan., 2006, Vol. 26, No. 1，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

乳酸菌，类细菌素，特性

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【期刊论文】PCR扩增特异性16S rDNA 和溶血素基因检测致病性嗜水气单胞菌

储卫华，陆承平

水产学报2005年2月第29卷第1期/JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Feb., 2005, Vol. 29, No. 1，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

嗜水气单胞菌， 16S rDNA，气溶素基因，聚合酶链式反应，检测

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2007-11-20

【期刊论文】卵黄抗体被动免疫防治仔猪产肠毒素大肠杆菌性腹泻

储卫华，高国峰

中国兽医学报2006年11月第26卷第6期/Chin J Vet Sci Nov., 2006, Vol. 26, No. 6，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

卵黄抗体( IgY)，产肠毒素大肠杆菌，腹泻，仔猪

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2007-11-20

【期刊论文】天蚕素A-蜂毒素杂合肽基因表达载体的构建及其分泌表达

储卫华，，李大力，汪信

南京理工大学学报2007年4月第31卷第2期/Journal of Nanjing University of Science and Technology Apr., 2007, Vol. 31, No. 2，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

根据天蚕素 A ( cecropin A, CA)N端第 1 - 8个氨基酸残基和蜂毒素 (m elittin, ME)N端第 1 - 18个氨基酸残基，用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的杂合肽 CA (1 - 8)ME (1-18)基因。DNA序列分析表明,合成的基因与设计的一致。该基因插入毕赤氏酵母整合型质粒 pPIC9K中，置于AOXⅠ启动子的控制下，并通过电转化将重组质粒 pPIC9K-came导入 Pichia pastoris SMD1168宿主菌，在含有 G418的 YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子，转化子在 BMMY培养基中经甲醇诱导表达，发现 Tricine-SDS-PAGE有明显条带。比浊法初步测定表明，表达产物came对 E coli DH5α具有抗菌活性。

抗菌肽，天蚕素 A，蜂毒素，毕赤氏酵母，分泌表达