目的评价galE变异株免疫原性及免疫保护效力。方法分别采用galE变异株低茵量及高菌量单次或重复免疫（口服）BALB/c小鼠。ELISA方法检测动物肠液及血清中特异性sIgA及IgG的滴度。免疫后26d．用大剂量CJ攻击被免疫动物，观察galE变异株的保护效应。结果（1）低菌量及高菌量galE变异株单次或重复免疫后，动物肠液及血液中sIgA及IgG滴度均明显增高，与阴性对照组比较差异非常显著（P<0.01）；未显示低剂量与高剂量之间、单次免疫与重复免疫之间抗体水平有明显差异（P>0.05）；与亲代株免疫组比较，抗体水平也无明显不同（P>0.05）。（2）galE变异株免疫可明显降低动物受CJ攻击后的疾病指数（P<0.01），变异株的临床保护效率为79.5%～83.1%；清除CJ肠定植的能力明显高于阴性对照组（P<0.05）；低菌量与高菌量之间，单次及重复免疫清除肠道感染效力无明显差异（P>0.05）。结论（1）galLE变异株保留与亲代株相似的免疫原性及免疫保护性，可刺激动物产生特异性抗体，有效保护细菌攻击，明显降低动物疾病指数，缩短细菌肠道定植时间。（2）galE变异株仅小剂量单次口服即可产生良好的免疫效果。

目的构建唾液酸合成酶基因1（neu B1）失活、脂多糖（LPS）中唾液酸（SA）缺失的空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni，Cj）O：19 突变株，以确认Cj LPS中，含SA基团的终端GM1样结构在Cj相关格林-巴利综合征（GBS）发病机理中的关键作用。方法从已有neu B1基因失活的Cj肠炎相关菌株O：2 DNA中，将含卡那霉素抗性基因（KmR cassette）的neu B1突变片段-neu B1：KmR克隆到pGEM-T载体，形成突变载体pGEM-neu B1；KmR进一步转化到与GRS相关的CjO：19野生株，获得CjO：19突变株，行PCR和RT-PCR鉴定。SDS-PAGE分析Cj LPS过碘酸,间苯二酚和酸性茚三酮反应法分别检测 Cj LPS中SA。霍乱毒素B亚单位（CTB）结合反应检测Cj菌体裂解物及LPA中神经节苷脂GM1模拟结构。最后以突变株及其同源野生株LPS为抗原分别免疫豚鼠，第5周取坐骨神经原纤维分离。结果neu B1基因突变片段-neu B1：KmR成功克隆到pGEM-T载体中，进而构建得neu B1基因失活的Cj突变株。后者LPA已丧失SA基团且不能与CTB结合，表明其菌体裂解物和LPS中已不存在GM1模拟结构。野生株LPS免疫组中，17.3%的坐骨神经原纤维发生免疫性损伤，明显高于PBS对照组（1.6%）和突变株LPS免疫组（2.4%）；而突变株LPS免疫组与PBS对照组间差异无统计学意义。结论成功构建neu B1基因失活的Cj O：19突变株，其LPS已缺失野生株所具有的SA基团及与GM1的分子模拟特性，且不能再诱导活体动物的周围神经免疫性损伤，有力证实了关于Cj LPS诱发GBS的分子模拟推论，SA是该交叉免疫反应中抗原的重要成分。

目的探讨布洛芬-安定混合溶液（IBU-DZP）经直肠给药的实效性和安全性。方法（1）动物实验：观察IBU-DZP直肠给药后在兔体内的药动学、对戊四氮诱发的大鼠实验性惊厥发作的止惊疗效、对酵母诱导的大鼠发热退热疗效，以及对直肠黏膜的刺激性；（2）临床观察：该混合溶液直肠给药后在儿童体内的初步药动学研究。结果（1）动物实验：IBU-DZP中的IBU和DZP均能经直肠迅速吸收，在兔体内分别约（11.7±1.2）min和（9.4±2.7）min达到峰值。IBU-DZP混合液能快速有效地抑制戊四氮诱发的大鼠惊厥发作和死亡，有效降低酵母诱发的大鼠发热。该混合液连续多次直肠给药后对大鼠直肠黏膜没有明显刺激作用。（2）临床观察：IBU-DZP混合液经儿童直肠给药后IBU和DZP分别约在用药后30 min和15 min达峰值血药浓度［分别为（57.8±7.9）mg/L和（450.1±158.7）ug/L］，且在用药后5 min血药浓度就分别达到（41.4±5.5）mg/L和（321.8±53.9）ug/L，均远远超过最低有效血药浓度。结论 直肠注入 IBU-DZP溶液是一种简便、安全、快速、有效的给药途径，对发热性惊厥的现场抢救和预防有实用价值。

目的探索空肠弯曲菌（Campylobacte jejuni，CJ）致外周神经损伤的关键结构，为CJ感染相关格林,巴利综合征的分子模拟理论提供动物实验证据。方法将32只豚鼠随机分为亲代株组（10只）、变异株组（10只）、对照组（6只）、PBS组（6 只），分别用亲代株及弗氏佐剂、galE变异株及弗氏佐剂、PBS及弗氏佐剂、单纯PBS进行全身免疫；动态检测血清细胞壁脂寡糖（LOS）IgG及神经节苷脂GM1 IgG抗体水平；检查坐骨神经病理改变，包括单纤维分离、半薄切片光镜及电镜检查。结果（1）免疫后变异株组及亲代株组LOS IgG抗体水平均明显增高，两组间差异无统计学意义；（2）免疫后14/28d，亲代株组GM1 IgG抗体滴度（0.661±0.290,0.984±0.025）明显高于变异株组（0.193±0.078,0.180±0.063），差异均有统计学意义；（3）变异株组坐骨神经单纤维病变率4.9%；（98/2000），明显低于亲代株组（16%,320/2000），差异有统计学意义，后者主要为轴索变性；（4）亲代株组半薄切片显示以轴索变性为特征的病理改变；变异株组仅见极少数异常，两组间差异有统计学意义；（5）电镜检查证实光镜所见。结论与亲代株相比，galE变异株缺失神经节苷脂GM1样表位，不能诱导动物产生GM1抗体及周围神经损伤，支持CJ感染后格林-巴利综合征发生的分子模拟理论。

目的以空肠弯曲菌（campylobacter jejuni，CJ）菌体全抗原为对照，以基因重组的该菌融合黏附蛋白（TrxA/PEB1）作为CJ疫苗免疫大鼠#并对其神经安全性进行实验性评价方法分别以纯化的TrxA/PEB1和CJ Pen19菌体全抗原经全身免疫增强法免疫大鼠#初次免疫后第4/4、5周采用ELISA法动态观察抗体滴度，并分别于第3、5周分离坐骨神经原纤维及行甲苯胺蓝染色光镜观察。采用ELISA法检测第5周抗血清与GM1抗原的结合反应。神经外膜下注射抗TrxA/PEB1和抗CJ全菌抗原的特异性抗血清#观察其神经病理学改变。结果（1）经两种抗原免疫后，大鼠均产生高滴度特异性IgG，且各自与两种抗原发生交叉反应；（2）以CJ Pen19全抗原免疫后抗血清可与GM1抗原结合,而TrxA/PEB1免疫者则否（3）CJ Pen19免疫组有60%大鼠坐骨神经出现以轴索变性为主的免疫性损伤，TrxA/PEB1融合蛋白免疫者则未发生；（4）CJ Pen19免疫血清神经外膜下注射后全部大鼠均发生轴索变性为主的病变，且75%为显著病变，而TrxA/PEB1免疫血清外膜下注射后却未引起明显病变。结论CJ Pen19全菌抗原和TrxA/PEB1纯化蛋白作为免疫原均可激发大鼠有效体液免疫应答，但与CJ全菌抗原相比，TrxA/PEB1蛋白所产生的全身免疫反应未引起周围神经损伤，其抗血清不含针对GM1抗原的抗体，对外周神经无免疫损伤作用。据此可认为TrxA/PEB1作为CJ疫苗安全可靠。

目的探讨氯化锂一匹罗卡品诱发癫痫持续状态（status epilepticus，SE）后大鼠脑内神经元凋亡过程及Caspase 3活性的年龄特征。方法氯化锂一匹罗卡品诱发幼年及成年Wistar鼠持续惊厥发作，比较惊厥发作严重程度的年龄差异，应用原位末端标记,流式细胞仪和荧光分光光度法测定惊厥后脑组织神经细胞凋亡的动态变化及Caspase 3活性变化，比较研究其年龄差异特征。结果幼年鼠从给药至惊厥发作的时间为（13.3±5.63）min，而成年鼠为（22.5±5.66）min；幼年鼠的首发SE中4～5级者占68%,而成年鼠仅18%尽管SE前幼年鼠脑内凋亡细胞数较成年鼠“生理性G增多”但SE后30min，成年鼠脑内（海马CA3区,齿状回,颞叶皮层）TUNEL阳性细胞总数即已明显增多并反超幼龄鼠。分别达524±26和465±26（P﹤0.05）.即使连续观察到SE后8h，成年鼠脑内凋亡细胞计数也始终明显高于幼年鼠。经流式细胞仪检测的凋亡早期神经细胞也呈现相似变化。与幼龄鼠相比，成年鼠不仅Caspase 3活性增高的幅度大，且启动时间早。SE后仅30 min，成年鼠海马中Caspase 3活性增加的比例已明显超过幼年鼠，分别为0.1±0.07和0.003±0.04。SE后2h，两者差别更大，分别为0.39±0.2和0.1±0.2。结论由氯化锂一匹罗卡品诱发的惊厥持续状态模型再次证实SE发作中未成熟脑内呈现一个主动抑制细胞凋亡进程，对抗惊厥性脑损伤的保护性机制，并提示该保护机制作用于Caspase 3级联反应被激活前的细胞凋亡早期事件中。

目的：研究galE基因敲除后空肠弯曲菌变异株脂寡糖结构改变。方法：提取空肠弯曲菌（CJ）HB9313及galE-变异株脂寡糖，Tricine-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，分别进行银染、免疫印迹及霍乱毒素配体印迹检查。结果：与野生株比较变异株的脂寡糖分子量变小，电泳迁移速度快，不能与CJHB9313脂寡糖抗体结合，并失去与其配体结合的能力。结论：galE基因敲除变异株丧失了脂寡糖外核糖基及神经节苷脂CM1样结构，可能成为安全减毒活菌苗的有力候选者。

目的探讨空肠弯曲菌（CJ）诱发的周围神经病变中，其脂多糖（LPS）诱导的免疫学致病机理。方法以亲和层析方法，从CJ LPS全身免疫后大鼠免疫血清中，高纯度提取CJ LPS 特异性IgG 抗体；免疫组化、免疫荧光方法检测CJ LPS特异性IgG抗体与正常大鼠、人坐骨神经的亲和力；神经外膜下注射CJ LPS特异性抗体，观察其神经病理学改变；ELISA法检测CJ LPS特异性抗体及GM1抗体含量，免疫组化、免疫荧光技术检测病变神经上CJ LPS的特异性免疫球蛋白表达；免疫吸附法去除CJ LPS抗体的免疫血清作神经外膜下注射，并进行病理学检查；原位杂交法检测病变神经上TNF-αmRNA表达。结果（1）特异性CJ PLS-IgG引起健康大鼠坐骨神经显著病变，原纤维总病变率达20.7%，与对照（4.8%）比较，P﹤0.01:（2）免疫组化和免疫荧光均证实CJ LPS特异性抗体与正常人体或大鼠神经表现强阳性结合；（3）CJ LPS特异性抗体与GM1交叉反应吸光度（A）值大于正常对照的7倍；（4）轴索变性及混合病变型原纤维特异性IgG免疫组化和免疫荧光染色全部强阳性，而髓鞘脱失者仅有60%呈弱阳性；（5）经CJ菌体抗原吸附后CJ LPS免疫血清组原纤维病变率为35.0%低于未吸附组（62.5%），但仍明显高于对照组（6.0%）；（6）经CJ LPS或CJ多次免疫后，各有84%和80%病变神经上有TNF-α.mRNA高表达，对照组无明显表达。结论在CJ感染诱发的周围神经病变中，作为其致病的关键抗原成分CJ LPS,诱导其特异性抗体及TNF-α等，参与CJ相关的GBS发病过程。