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焦新安

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姓名：焦新安
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担任导师情况：
学位：
学术头衔：

博士生导师
职称：-
学科领域：

海洋化学
研究兴趣：

个人简介

焦新安，1964年9月生，扬州大学副校长，教授，博士，博士生导师，全国优秀博士学位论文获得者。工作以来，先后主持承担国家863、国家基金、国家杰出青年基金、国家攻关、国际合作及部省级各类课题20余项，有8项成果获部省级科技进步二、三等奖，申请发明专利4项。在Journal of Immunology、Infection and Immunity、Vaccine 等国内外学术刊物上发表论文160余篇（SCI收录10篇），出版著作9部。培养博、硕士研究生40余名。先后与法国巴斯德研究所、美国国立卫生研究院、美国康奈尔大学等有关实验室建立了稳定的科研合作关系。在国际上首次揭示树突细胞在起始抗分枝杆菌特异T细胞应答和自然免疫中的关键作用，并发现DC也是分枝杆菌的贮存细胞；首次发现MalE蛋白T细胞表位的功能多样性。建立了单抗介导的ELISA和PCR相结合的联合检测沙门氏菌新技术，建立了适于血清流行病学调查的抗体竞争ELISA试验；确立沙门氏菌耐药性监测技术体系，阐明了上世纪六十年代至今的沙门氏菌分离株耐药性变化规律；探讨了免疫预防鸡群沙门氏菌的新途径。建立了系列的能检测沙门氏菌、产单核细胞增生症李斯特菌、大肠杆菌O157、空肠弯曲杆菌、产气荚膜梭菌等检测新技术，为食品安全评价提供了优良的候选方法。

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2005-04-29

【期刊论文】重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

焦新安， Richard LO-man， Edith Dériaud， Sophie Burgaud Brigitte Gicquel， Nathalie Winter， Claude Leclere，刘秀梵

中华微生物学和免疫学杂志，2002，22（1）：53～57，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位。方法用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位。结果重组BCG. MalE功能性表达了MalE蛋白的4种H-2d限制性T细胞表位。结论在4种表位中，p68～82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位，而其余3个为次要表位。

重组卡介苗， MalE蛋白， T细胞表位

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2005-04-29

【期刊论文】直接酶联免疫吸附法和聚合酶链反应联合检测沙门菌的应用

焦新安，黄金林，潘志明，文其乙，孙林，刘秀梵

中华预防医学杂志，2004，38（5）：331～334，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的通过比较试验，得到准确、快速的沙门菌检测方法。方法 228株沙门菌经过前增菌、选择性增菌后，采用在聚合酶链反应（PCR）和酶联免疫吸附法（ELISA）同时检测，并将2种快速检测方法进行比较研究。结果 PCR法的敏感性优于直接ELISA法，2种方法的检测符合率达99%以上。直接ELISA结合PCR法对饮食行业工作人员健康检查的1546份人粪便样品进行检测，同时以国家标准方法为参照，直接ELISA法的敏感性和特异性达100%和97.14%，PCR法的敏感性和特异性均为100%。结论优化的沙门菌检测程序是对大量样品采用直接ELISA筛检，除去大量阴性样品，阳性样品用PCR法作进一步鉴定；血清型的确定用国家标准方法。

沙门菌，聚合酶链反应，酶联免疫吸附测定

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2005-04-29

【期刊论文】原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建

焦新安，张晓明，，潘志明，张小荣，马丽，顾健，郭荣，刘秀梵

扬州大学学报（农业与生命科学版），2000，24（1）：1～4，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

将原核启动子Ptrc和加强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因从EGFP原核表达质粒pYA 33342EGFP上切下，然后将其插入至真核表达质粒pVAX1真核启动子Pcmv的下游，构建成具有真核和原核启动子的双表达杂合质粒pVAXD2EGFP，其长度为3823bp。将pVAXD2EGFP分别转化鼠伤寒沙门氏菌X4550和转染CO S27细胞，应用流式细胞术、可见光谱扫描、SDS2PAGE测定EGFP原核表达；应用荧光显微镜观察EGFP在CO S27细胞内的表达。重组鼠伤寒沙门氏菌X4550（pVAXD2EGFP）表达EGFP的量与仅以原核方式表达EGFP的X4550（pYA 33342EGFP）相当；将质粒pVAXD2EGFP转染CO S27细胞，EGFP可在CO S27细胞核和胞浆表达，在荧光显微镜下发出强烈荧光。结果表明：不仅成功地构建原核、真核表达集中于同一质粒的新型质粒pVAXD2EGFP，而且原核、真核目的蛋白表达量达到很高水平，显示其在新型重组细菌疫苗方面有着诱人的应用前景。

加强型绿色荧光蛋白，双表达质粒，鼠伤寒沙门氏菌

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2005-04-29

【期刊论文】沙门氏菌Ⅱ相鞭毛蛋白基因在减毒株中的表达

焦新安，张国强，焦新安*，倪振亚，高崧，文其乙，张如宽，刘秀梵

JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION), 2000, (1): 23～26，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

应用转化转导法把含有沙门氏菌Ⅱ相鞭毛蛋白基因FljBenx的重组质粒pHI104导入无鞭毛的减毒株SL5928（△aro, FliCgp∷Tn10）中获得表达；经电镜观察、玻板凝集试验及动力抑制试验证实重组菌表达了相应的外源鞭毛蛋白，SDS PAGE测得表达产物分子量为52 kd；westtern-blot试验中表达产物可与H-2enx单因子血清发生特异性反应；体内外试验表明重组菌很稳定，口服免疫小鼠能诱导产生针对表达产物的特异性抗体。

鞭毛蛋白基因，表达，沙门氏菌减毒株

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2005-04-29

【期刊论文】大肠杆菌猪水肿毒素B亚单位基因的克隆与鉴定*

焦新安，倪振亚，焦新安*， *，高崧，彭大新，张如宽，刘秀梵

农业生物技术学报，2000，8（1）：76～78，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

根据巳知大肠杆菌志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体B亚单位（SLT-ⅡVB）基因序列，设计并合成3条2对引物，以大肠杆菌O138基因组为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）分别扩增出204bp的基因序列及包含一段信号肽的261bp基因序列。将这两段DNA分别克隆进表达性载体质粒PYA3334的且EcoR1和胁HI位点之间，经地高辛标记探针进行Southem杂交和酶切分析鉴定，并对两条扩增片段进行序列测定。结果表明，扩增产物的大小与设计相符，扩增与克隆的片段为SLT-ⅡvB基因的特异性片段。

大肠杆菌， SLT-ⅡvB基因，克隆，序列测定

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2005-04-29

【期刊论文】LOS诱导的特异性抗体分泌细胞的ELISPOT法检测

焦新安，， Hirano Takashi ， Gu Xin-xing

细胞与分子免疫学杂志，2004，20（3）：366～369，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：动态测定卡他性莫拉氏菌（Moraxella catarrhalis, M. cat）脱毒脂寡糖（dLOS）蛋白质结合疫苗诱导的抗体分泌细胞的应答状态。方法：以M. cat dLOS蛋白质结合疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠。应用酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测免疫小鼠不同免疫诱导部位和免疫效应部位，包括：鼻相关淋巴组织（NALT）、脾脏、颈部淋巴结、鼻内容物、肺脏和派伊尔氏结的特异性抗体分泌细胞，并同时测定血清、鼻冲洗液、肺泡灌洗液、唾液及粪便提取液中特异性IgA、IgG和IgM的水平。结果：M. cat dLOS蛋白质结合疫苗免疫小鼠的NALT、脾脏、颈部淋巴结、鼻内容物、肺脏和派伊尔氏结中，均测出分泌LOS特异抗体的抗体分泌细胞，以鼻内容物中IgA分泌细胞的数目最多，其次是在NALT和肺脏中，这与特异性抗体测定的结果相一致。结论：M. cat dLOS蛋白质结合疫苗经滴鼻免疫，能刺激产生LOS特异的黏膜和全身抗体分泌细胞的应答。ELISPOT试验具有快速、灵敏、特异的优点，为动态分析单个抗体分泌细胞应答规律提供了新方法。

抗体分泌细胞， ELISPOT，卡他性莫拉氏菌

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2005-04-29

【期刊论文】应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

焦新安，刘文博，高崧，张扬，潘志明，王芳，张如宽，刘秀梵

畜牧兽医学报，2003, 34 (2), 183-187 ，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针，应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆，最终进行定位。经三轮筛选后，用斑点印迹法检测，得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了24个阳性克隆，再以斑点印迹、竞净ELISA进一步鉴定阳性克隆，证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTTE，将其与沙门氏菌共毛蛋白氨基酸序列相比较，同源性较小，但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的I区高度保守序列为RAXXT，且这种序列排列的几率为1/205，因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外，以阳性克隆免疫Balb/c小鼠，并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定，结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性，这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。

沙门氏菌，鞭毛蛋白，属共同抗原表位，模拟表位，噬菌体肽库，表位定位

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2005-04-29

【期刊论文】应用ELISPOT试验测定重组卡介苗诱导的T细胞应答

焦新安，焦新安*，， Richard Lo-man， Edith D'eriaud， Brigitte Gicquel， Nathalie Winter， Claude Leclerc，刘秀梵

中国预防兽医学报，2001，23 （1）：46～49，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

应用免疫磁性分离技术去除免疫小鼠脾脏细胞中CD4+或CD8+T细胞后，在酶联免疫斑点试验中证实表达大肠杆菌MalE蛋白的重组卡介苗（Rbcg·MalE）诱导的T细胞应答是CD4+T细胞依赖的。对MalE、PPD特异T细胞应答的动态分析结果表明，Rbcg·MalE、BCG诱导的特异CD4+T细胞应答存在Th1/Th2平衡转换现象，即起始阶段为Th1应答，一段时间后出现Th2应答，并逐步形成Th1/Th2混合应答。这些结果，为分析杆菌T细胞应答规律提供了新的认识，同时，亦表明BCG是优良的外源搞原表达与运送载体。

ELISPOT，重组BCG， Th1/， Th2应答

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2005-04-29

【期刊论文】利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位*

焦新安，张扬**，焦新安***刘文博，潘志明，高崧，张如宽，刘秀梵

中国人兽共患病杂志，2003，19 （1）：60～63，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体（3-47-O）作为分子探针，从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位，从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果经过三轮的亲和筛选，得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm62和gm68，其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争SLISA实验表明，1010转导单位噬菌体gm68对肠炎沙门氏菌与3-47-O结合的抑制率达到65%，而噬菌体gm62的抑制率仅为20%且gm68可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体，而gm62则不能。结论实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。

沙门氏菌， O9抗原，模拟表位，噬菌体展示肽库

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2005-04-29

【期刊论文】鸡白痢沙门氏菌耐药性的监测研究

焦新安，潘志明，刘文博，高崧，倪振亚，张扬，刘学贤，张如宽，刘秀梵

畜牧兽医学报，2002，33（4）：377-383，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

采用WHO推荐的Kiby-Bauer法对我国部分地区1962～1999年间346株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明，在近40年时间里，鸡白痢沙门氏菌苄青霉素、壮观霉素、复方磺胺、磺胺异恶唑、甲氧苄代嘧啶、羧苄青霉素、四环素、链毒素、青霉素的耐药率显著增强（P<0.01）。菌株的多重耐药明显增加。60年代以二耐菌株为主（37.0%），70年代四耐、子耐菌株居多（60.5%），80年代五耐、六耐、七耐菌株占大多数（80.2%），90年代仅七耐以上菌株就达83.7%。不同年代菌株显示出不尽相同的耐药谱，且呈现出不断增宽的趋势。通过流行病学调查发现，60年代到90年代，鸡白痢沙门氏蓖对青霉素、链毒素、磺胺类药物、四环素、卡那霉素、氯霉素、庆大霉素等药的的耐药性大多呈现出显著增强的变化趋势，这充分说明细菌耐药性的形成和发展与搞菌药物长期反复使用有着极为密切的关系。研究对于指导临诊合理用药及控制疾病流行具有重要的现实意义。

鸡白痢沙门氏菌，耐药性，变化趋势，监测，流行病学调查

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2005-04-29

【期刊论文】原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建

焦新安，张晓明，，潘志明，张小荣，马丽，顾健，郭荣，刘秀梵

扬州大学学报（农业与生命科学版），2000，24（1）：1～4，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

加强型绿色荧光蛋白，双表达质粒，鼠伤寒沙门氏菌

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2005-04-29

【期刊论文】重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

焦新安， Richard LO-man， Edith Dériaud， Sophie Burgaud Brigitte Gicquel， Nathalie Winter， Claude Leclere，刘秀梵

中华微生物学和免疫学杂志，2002，22（1）：53～57，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

重组卡介苗， MalE蛋白， T细胞表位

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2005-04-29

【期刊论文】沙门氏菌Ⅱ相鞭毛蛋白基因在减毒株中的表达

焦新安，张国强，焦新安*，倪振亚，高崧，文其乙，张如宽，刘秀梵

JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION), 2000, (1): 23～26，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

鞭毛蛋白基因，表达，沙门氏菌减毒株

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2005-04-29

【期刊论文】直接酶联免疫吸附法和聚合酶链反应联合检测沙门菌的应用

焦新安，黄金林，潘志明，文其乙，孙林，刘秀梵

中华预防医学杂志，2004，38（5）：331～334，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

沙门菌，聚合酶链反应，酶联免疫吸附测定

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2005-04-29

【期刊论文】鸡白痢沙门氏菌耐药性的监测研究

焦新安，潘志明，刘文博，高崧，倪振亚，张扬，刘学贤，张如宽，刘秀梵

畜牧兽医学报，2002，33（4）：377-383，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

鸡白痢沙门氏菌，耐药性，变化趋势，监测，流行病学调查

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2005-04-29

【期刊论文】应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

焦新安，刘文博，高崧，张扬，潘志明，王芳，张如宽，刘秀梵

畜牧兽医学报，2003, 34 (2), 183-187 ，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

沙门氏菌，鞭毛蛋白，属共同抗原表位，模拟表位，噬菌体肽库，表位定位

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2005-04-29

【期刊论文】运送鹅源新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌及其免疫原性*

焦新安，潘志明， **，张小荣，张晓明，黄金林，万洪全，刘秀梵

农业生物技术学报，2004，12，（4）：412～415，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

根据GenBank中发表的新城疫病毒融合（F）基因序列，设计一对引物，通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因，约1700bp，测序确认后，将其克隆人真核表达载体Pvax1，得到候选DNA疫苗Pvax1-F。将pvax1-F转化减毒伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）X4550，获得运送DNA疫苗的重组沙门氏菌X4550（Pvax1-F）。以2×108CFU/只的剂量两次CD1小鼠，免疫小鼠可以检测至特异性针对NDVF蛋的血清抗体应答，X4550（Pvax1-F）免疫组抗体水平显著高于X4550（Pvax1）组（P<0.05），表明该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒，并能够剌激机体产生免疫应答。

减毒沙门氏菌， DNA疫苗，新城疫病毒，免疫原性

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2005-04-29

【期刊论文】DNA疫苗的安全性与免疫效力

焦新安，张小荣，焦新安*，潘志明，张晓明，黄金林，张如宽，刘秀梵

中国兽医学报，2004，24（6）：531～533，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

将运送H5亚型高致病力禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550（pVAXl-HA）和X4550（asdpVAX1-HA）以IX10 10CFU的剂量腹腔注射1日龄SPF白莱航雏鸡，结果表明，二者均具有良好的安全性。对SPF白莱航鸡的免疫原性试验结果表明，这2种细菌均能刺激鸡体产生高水平的肠道粘膜免疫应答，但是不能有效地激发血清抗体应答。对商品代伊莎揭蛋鸡的免疫效力试验初步结果显示，X4550（asd-pVAX1-HA）免疫鸡能够抵杭强毒的攻击，保护指数为77.8，而X4550（pVAXl-HA）则未产生免疫保护。

减毒沙门氏菌， DNA疫苗， H5亚型禽流感病毒，安全性，免疫效力

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2005-04-29

【期刊论文】大肠杆菌猪水肿毒素B亚单位基因的克隆与鉴定*

焦新安，倪振亚，焦新安*， *，高崧，彭大新，张如宽，刘秀梵

农业生物技术学报，2000，8（1）：76～78，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

大肠杆菌， SLT-ⅡvB基因，克隆，序列测定

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2005-04-29

【期刊论文】鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用的效果

焦新安，潘志明，张小荣，刘文博，甘军纪，高获，张如宽，刘秀梵

中国兽医学报，2003，23（2）：155～156，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与2种不同的派生态制刘配合叶AA肉鸡实施免疲。结果表明，弱毒苗单独应用组、联合应用1组和2组的免疾保护效率分别为75%，90%和90写，均与攻毒时照组（柏写）存在显著差异（r<0.05）；攻毒20d后所有存活鸡细菌分离结果显示，上述3个试脸组细菌分离率分别为53.5%，55月和5.5纬，也均与攻毒对照组（75%）存在显著性差异（P<0.05）。由此认为，该弱毒苗与上述徽生态制别联合应用的效果明显，具有较好的应用前景。

鸡沙门氏菌弱毒苗，微生态制剂，免痰效力

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