中国科技论文在线

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2009年02月20日

肖敏，陆宇，赵晗，王勤鹏，陈忠民，钱新民

，-0001，（）：

-1年11月30日

短双歧杆菌（Bifidobacterium breve 203）α-D-半乳糖苷酶基因（agal）被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV220中，构建重组质粒pBV-agal，转入到大肠杆菌中进行温度诱导表达，得到重组酶Agal在大肠杆菌D115a、DH10B和BL21中的比活分别为28.08units/mg、19.44 units/mg和13.85 uni ts/mg。重组质粒pBV-agal在E.coliBL21中稳定性较好。纯化后的重组酶蛋白亚基分子量约为67 KDa，最适反应温度为40～45℃，酶在40℃以下稳定，60℃仅剩余5%的酶活性，70℃时失去所有的酶活性：最适反应pH为4.0～4.4，酶在pH 3.6～6.0范围内稳定。酶对p-硝基苯酚α-Q-半乳糖苷的（K=1.43retool/L，Vmax=35.71μmoll/（L•min）；对蜜二糖的Ko=261mmol几，Vmax=63.69μmol/（L•min）。结果说明本研究中的Agal与已经报道的短双歧杆菌的α-D-半乳糖苷酶有较大差异，是一种存在于同一菌体中新发现的α-D-半乳糖苷酶。

双歧杆菌， α-D-半乳糖苷酶，温度诱导，表达

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2009年02月20日

【期刊论文】光合细菌中番茄红素的研究

肖敏，钱卫，王肇颖，韩波，杜桂彩，李永贵

山东大学学报（理学版），2004，6（3）：111～115，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

番茄红素是一种具有多种生理功能的类胡萝卜素，通常从番茄的果实中提取，价格昂贵。一些光合细菌也可以产番茄红素，从而使得利用微生物发酵法生产低成本番茄红素成为可能。本文通过正交实验等方法研究了1株紫色非硫细菌7-1的生长及产番茄红素的最佳培养条件在以0.4%的乳酸钠为碳源，0.05%的谷氨酰胺为氮源，Mg2+10ppm，并添加0.1%的酵母粉作为生长因子的改良RcvBN培养基中，7-1茵发酵液在72h内茵浓度可达5.08×1010个/mL，紫外吸收光谱表明细胞内番茄红素的含量明显提高，高效液相色谱法测定出细胞内番茄红素的含量为398.7 mg/100g茵体干重。

番茄红素，光合细菌，培养条件，高效液相色谱

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2009年02月20日

【期刊论文】Reassembled Biosynthetic Pathway for a Large-scale Synthesis of CMP-Neu5Ac

肖敏， Jing Song， Hesheng Zhang， Bingyuan Wu， Yingxin Zhang， Hanfen Li， Min Xiao and Peng George Wang， *

Mar. Drugs 2003, 1, 34-45，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

CMP-Neu5Ac is an important sugar nucleotide for biosynthesis of sialic acid and its conjugates. In this paper, a large-scale production system of CMP-Neu5Ac by a single strain is reported. The co-expression of Neu5Ac aldolase (EC4.1.3.3) and CMPNeu5Ac synthetase (EC 2.7.7.43) was achieved by constructing individual genes into one plasmid and having a single culture that has both NeuAc aldolase and CMP-Neu5Ac synthetase activities. Overall this system only employed N-acetylmannosamine, excess of pyruvate and CTP to produce CMP-Neu5Ac. This work has demonstrated that a largescale synthesis of sialic acid-derived oligosaccharides could be achieved economically and efficiently through a single, biosynthetic pathway engineered microorganism.

biosynthesis， cytidine β-monophospho-N-acetylneuraminic acid， NeuAc aldolase， CMP-NeuAc synthetase

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2009年02月20日

【期刊论文】一株曲霉 (Aspergillus sp1 AF)β-半乳糖苷酶的转糖基活性研究

肖敏，袁绍鹏，肖，敏，孙正，钱新民

食品与发酵工业，（11）：31～34，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

确定了1株曲霉的β-半乳糖苷酶产酶培养基的氮源为蛋白胨1%、酵母膏0.3%、KNO3 0.2%，碳源为葡萄糖1%，培养条件为30℃摇床培养48h。碳源实验证明，β-半乳糖苷酶在该菌株中属组成型表达。研究了该菌株的β-半乳糖苷酶转糖基反应体系中的pH、乳糖浓度、反应温度、反应时间对转糖基作用的影响，并利用薄层层析、高效液相层析技术分析了转糖基反应的产物。

β-半乳糖苷酶，转糖基作用，低聚半乳糖