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2011年03月28日

【期刊论文】ETEC肠毒素基因多重PCR检测方法的建立

张书霞, 张雪寒, , 何孔旺, 华荣虹

中国人兽共患病杂志,2003,19(2):67~70,-0001,():

-1年11月30日

摘要

肠毒素性大肠杆菌的致病性与其具有粘附性的菌毛和产肠毒素的能力密切相关。由于菌毛的血清型多而复杂,肠毒素只有不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)两种,因此成为研究的对象。用三对扩增产物分别为110bP、237bP、368bp的引物建立了检测LT和STⅠ、STⅡ毒素基因的多重PCR方法。扩增产物分别用HindⅢ、HincⅡ、sau3AⅠ限制性内切酶酶切,均得与预期一致的2个片段。对各个参考株的检测结果为100%符合。结果表明该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性。该方法可用于肠毒素性大肠杆菌腹泻病的辅助诊断以及大肠杆菌的分类检测。

肠毒素性大肠杆菌, 不耐热肠毒素, 耐热肠毒素Ⅰ、Ⅱ, 多重PCR

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2011年03月28日

【期刊论文】热应激对鸡胸腺细胞凋亡的影响及其调节机理

张书霞, 华荣虹, 鲍恩东

南京农业大学学报,2003,26(1):66~69,-0001,():

-1年11月30日

摘要

18只AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时,随机分成3组,分别进行0,5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测胸腺细胞DNA含量、细胞凋亡率以及细胞caspase-3和Bcl-2的表达。结果:应激处理O,5和10h时,(1)DNA合成期(S期)细胞比例分别是2.77%,3.28%和2.31%;(2)胸腺细胞凋亡率分别是3.99%,11.15%和3.31%:(3)caspase-3表达阳性细胞率分别为14.24%,27.01%和10.84%,Bcl-2表达阳性细胞率分别是20.59%,15.13%和27.92%;(4)应激5h与0和10h的细胞凋亡率、caspase-3和Bcl-2的阳性细胞表达率均有显著差异(P<0.05);(5)应激处理鸡的胸腺细胞凋亡率、caspase-3表达阳性细胞率从0h到5h逐渐升高,以后又逐渐下降。在高温应激过程中,胸腺细胞凋亡率与caspase-3表达阳性细胞率呈平行的变化关系,而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。这些结果均说明:高温应激能明显影响胸腺细胞凋亡,而这种细胞凋亡的变化受caspase-3和Bcl-2表达的调节。

鸡, 胸腺, 细胞凋亡, 半胱天冬酶, Bcl-2蛋白

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2011年03月28日

【期刊论文】肠毒素性大肠杆菌菌毛对产蛋鸡免疫性的研究

张书霞, 华荣虹, 何孔旺, 白文霞, 张雪寒

畜牧与兽医,2002,34(5):7~9,-0001,():

-1年11月30日

摘要

采用热抽提法提取4种肠毒素性大肠杆菌苗毛蛋白。K88、K99、F41和987p菌毛置白分别制成弗氏佐剂苗;K88还制成白油佐剂苗,氧氧化错胶苗和蜂胶佐剂苗;另将4种菌毛等比例混合制成弗氏佐剂菌。分别对产蛋鸡进行免疫。用微量凝集反应和血凝抑制试验检测卵黄抗体效价。结果表明。K88菌毛较其他3种菌毛免疫性好。诱导抗体效价最高而且能长时间维持;987p菌毛能快速诱导抗体的产生,但整体效价低。K88不同佐剂苗中。铝胶佐剂能较快地诱导抗体的产牛,蜂胶佐剂苗抗悼持续时间短,弗氏佐剂能诱导高效价的抗体产生而且能长时间持续。

肠毒素性大肠杆菌, 菌毛, 佐荆, 卵黄抗体

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2011年03月28日

【期刊论文】热应激对鸡脾脏和法氏囊细胞凋亡的影响及其调节

张书霞, 华荣虹, 鲍恩东

中国农业科学,2005,38(1):176~180,-0001,():

-1年11月30日

摘要

18只AA肉鸡于22℃饲养。30日龄时,随机分成3组,分别进行0、5和10h的41℃高温应激处理。用流式细胞仪检测应激后不同时间脾脏和法氏囊细胞DNA含量、细胞凋亡率以及Caspase-3和Bcl-2的表达。结果表明,应激处理0、5和10h时,脾脏DNA合成期(S期)细胞比例分别是4.67%、5.11%、4.78%,法氏囊S期细胞分别是30.52%、24.71%、24.04%,脾脏和法氏囊细胞凋亡率分别是0.22%、0.42%、0.32%和0.32%、0.62%、0.41%,脾脏和法氏囊caspase-3表达阳性细胞率分别为5.49%、10.36%、9.80%和8.60%、10.51%、9.41%,Bcl-2表达阳性细胞率脾脏分别是31.32%、24.01%和29.26%,法氏囊则是30.24%、27.10%、31.54%,脾脏细胞凋亡率,应激后5h与0和10h有显著差异(P<0.05),在高温应激过程中,脾脏和法氏囊的细胞凋亡率与Caspase-3表达阳性细胞率呈方向一致的变化关系,均是从0h到5h逐渐升高,以后又逐渐下降,而与Bcl-2表达阳性细胞率呈反向变化关系。据此说明高温应激能明显影响脾脏和法氏囊细胞凋亡,而这种细胞凋亡的变化受Caspase-3和Bcl-2表达的调节。

鸡,, 热应激,, 脾脏,, 法氏囊,, 细胞凋亡

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2011年03月28日

【期刊论文】bcl-2在鸡马立克氏病肿瘤中的表达

张书霞, 陈万芳

畜牧兽医学报,32(1):58~63,-0001,():

-1年11月30日

摘要

用来克亨SPF鸡复制马立氏病(Marek'sdisease,MD)肿瘤模型,取肿瘤和相应正常组织,液氮保存。AGPC(AcldGuanidiniumThiocvanate-Phenol-Chloroform)法提取组织总RNA(TR-NA),紫外测定其浓度,甲醛变性胶电泳观察其纯度。将一个含鸡bcl-21.2kb片段的质粒(PTTCB1),经转化扩增,提取质粒DNA,限制性内切酶(RE)消化,回收纯化bcl-2片段,放射性α-32P标记,制成探针。通过Nothern分子杂交检测MD肿瘤组织中bcl-2的表达,并与相应的正常组织比较。结果:鸡MD肿瘤组织和相应正常组织中均有bcl-2的表达;MD肿瘤组织中bcl-2的表达显著高于相应的正常组织。结合已进行的凋亡研究表明,bcl-2表达产物通过阻遏细胞凋亡促进MD淋巴瘤的形成。

bcl-2基因, 马立克氏病, 肿瘤, 表达

合作学者

  • 张书霞 邀请

    南京农业大学,江苏

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