目的探讨吲哚美辛抗结肠癌作用是否呈p53依赖性及其部分分子机制。方法采用含突变型p53的SW480细胞株为研究对象，利用基因转染技术，将野生型p53转染SW480细胞。不同浓度的吲哚美辛进行干预，采用吖啶橙、溴化乙锭荧光染色，荧光显微镜及透射电镜下观察wtp53/SW480细胞凋亡；Western斑点免疫印迹检测wtp53/SW480细胞中Bcl-2、Bax及p21WAF1/CIPI蛋白表达。结果吲哚美辛诱导野生型p53转染的wtp53/SW480细胞凋亡，出现形态学改变：即细 胞核固缩、裂解，核碎片及凋亡小体形成。凋亡细胞计数显示该作用呈浓度-时间依赖性，其中600μmol/LIN作用于wtp53/SW480细胞72h，其凋亡细胞百分率为（60.1±2.5）%；而对照组其凋亡细胞百分率为（5.0±2.0）%，P＜0.01，两者比较有显著性差异。吲哚美辛作用于wtp53/SW480细胞24h，其Bcl-2蛋白表达水平下调，呈浓度依赖性，而Bax蛋白表达无改变；未转染的SW480细胞中Bcl-2，Bax蛋白均无影响。吲哚美辛作用于wtp53/SW480细胞24h，其p21WAF1/CIPI蛋白表达水平随着一定范围内吲哚美辛浓度的增加而逐渐上调，以400μmol/L吲哚美辛作用最强，600μmol/L吲哚美辛作用后回到基础水平。而在未转的SW480细胞中p21WAF1/CIPI蛋白的表达无明显改变。结论IN通过下调bcl-2蛋白，上调p21WAF1/CIPI蛋白的表达来诱导wtp53/SW480细胞凋亡。

AIM: It has been reported that regular consumption of nonsteroidal anti-inflammatory drugs like indomethacin decreases the incidence and mortality rate of a number of gastrointestinal cancers. We aimed to explore the efficacy and possible mechanisms of indomethacin on tumor growth and tumor angiogenesis of human colon cancer xenografts in nude mice. METHODS: MTT (thiazolyl blue) assay was used to assessthe effect of indomethacin on cultured human colorectalcancer cell line HCT116. HCT116 cells were inoculated subcutaneously into BALB/c-nu/nu mice. After oraladministration of indomethacin, 3 mg/kg

A nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID)--indomethacin (IN), was found to induce apoptosis and inhibit proliferation of K562 cells and primary culture bone marrow cells from six chronic myelogenous leukemia (CML) patients. IN induced cells apoptosis and inhibited cells proliferation in a dose-and time-dependent manner, the optimum IN concentration and incubation time for eliciting these effects were 400 micromol/l and 72h, respectively. A synergic effect on Vp-16 (2.5 microg/ml) induced apoptosis was observed when combined with 100 micromol/l IN in K562 cells. RT-PCR results showed that IN down-regulated Bcl-2 mRNA expression, and did not change Bax mRNA expression; Western blot results confirmed that IN inhibited Bcl-2 protein expression, no influence was found on the translative level of bax protein. Our study indicate that IN induce apoptosis of CML cells by down-regulating Bcl-2 expression partially, and there is a potential significance in the treatment of CML.

目的 观察塞来昔布-一种选择性COX-2抑制剂对大肠癌细胞株HT-29的凋亡诱导作用，并通过分析塞来昔布作用后的HT-29细胞的细胞色素C（Cytochrome C）、Caspase-9和PARP蛋白表达的变化，探讨其诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制。方法 大肠癌细胞凋亡用吖啶橙/溴化乙啶染色结合荧光显微镜、流式细胞仪（FCM）技术测定，Cytochrome C、Caspase-9和PARP蛋白表达用Western印迹技术检测。结果荧光染色法显示塞来昔布在0μmol/L～120μmol/L浓度范围内呈浓度和时间依赖性诱导HT-29结肠癌细胞凋亡。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰”，凋亡率分别为（7.31±2.37）%～（48.30±2.86）%。塞来昔布诱导Cytochrome C从线粒体释放入胞浆，激活Caspase-9，继而裂 解活化PARP。结论 塞来昔布可诱导大肠癌细胞株HT-29细胞的凋亡，其机制涉及到Cytochrome C依赖性凋亡调节信号通路。

目的 分析吲哚美辛（Indomethacin，IN）对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响，为研究IN抗结肠癌作用的相关蛋白提供新的方法。方法 应用固相pH梯度（Immobilized pH gradient，IPG）双向凝胶电泳技术（two-dimensional gel electrophoresis，2-DE）分离IN－处理组和未处理组HCT116细胞的总蛋白，银染显色，ImageMaster 2D图像分析软件比较分析IN－处理组和未处理组HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质。结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱，IN-未处理组与处理组蛋白质点数为：1256±50，1169±36；匹配率为：93.0%，90.6%。IN-未处理组的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性，不同胶间蛋白质点在等电聚焦（Isoelectric focusing，IEF）方向的偏差是0.896±0.177mm，在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodiumdo-decylsufate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）方向的偏差为1.106±0.289mm。比较分析IN-处理组和未处理组HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱，发现IN-处理组和未处理组共有45个差异点，IN-处理组有9个蛋白质点表达上调，34个蛋白质点表达下调，2个蛋白质点仅在IN-未处理组表达。结论 首次建立了IN-处理和未处理HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱，识别了45个差异表达的蛋白质点，对这些差异蛋白质点的鉴定将为揭示IN抗结肠癌作用的机理提供实验依据。