中国科技论文在线

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2004年12月28日

杨文博，冯波*，佟树敏

微生物学能报，1997，24（2）：84～88，-0001，（）：

-1年11月30日

由链霉菌（Streptomyces sp.）S01菌株产生的几丁质酶（Chitinase）经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析、Sephadex G-100柱层析分离纯化后，得到SDS-PAGE均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后的几丁质酶分子量为41Ku，用PAGEIEF测得等电点PI为5.4。酶反应的最适pH值为6.0，最适温度为50℃，在pH5.O～9.O、温度30～50℃时酶活性比较稳定。在相当于0.1mol/L NaCl的离子强度下酶活性最高。金属离子中的Mg2+、Ca2+、Mn2+对酶有较强的激活作用，而Fe3+、Hg2+则有强烈的抑制作用。S01菌几丁质酶对胶体几丁质的Km及Vmax分别为0.91mg·ml-1和262.13μmol·min-1·mg-1。

几丁质酶,，链霉菌S01菌株

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2004年12月28日

【期刊论文】β-甘露聚糖酶水解植物胶条件的研究*

杨文博，佟树敏，时薇，张彩

，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

由地衣芽孢杆菌（Bocillus Licheniformis）KN-27菌株产生的胞外β-甘露聚糖酶在40℃，pH值6.5～7.0，酶液终浓度10μ/g的条件下，酶解1%魔芋粉和瓜儿豆胶胶液1h后，所获得的酶解产物经薄板层板（展层剂∶正丁醇∶吡啶∶水=6∶4∶3，显色剂：笨胺-二苯胺-磷酸）检测表明为单糖和低聚糖。

β-甘露聚糖酶,，酶解条件,，低聚糖

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2004年12月28日

【期刊论文】刺梨、火棘复合复合果汁饮料的加工工艺

杨文博，蔡金腾，丁筑红，朱庆刚

食品科学，1996，17（12）：37～37，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

介绍了刺梨、火棘的果实的取汁方法以及刺梨、火棘复合果汁的配比和制作方法。

刺梨，火棘、混合果汁

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2004年12月28日

【期刊论文】5, 5'-二硫硝基苯甲酸柱前衍生高效液相色谱法测定酶促反应液中的L-半胱氨酸

杨文博，刘忠，金永杰，白钢

色谱，2004，22（3）：231～233，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

以5, 5'-二硫硝基苯甲酸（DTNB）为柱前衍生试剂对酶促反应液进行衍生化，用C18色谱柱在室温下采用二元梯度洗脱，于330nm波长下检测，同时以2-巯基乙醇和二硫苏糖醇（DTT）为对照，对L-半胱氨酸的分离峰进行确认，并对酶促反应液中的L-半胱氨酸进行分离测定。L-半胱氨酸浓度为5～950μmol/L时，其浓度与峰面积呈显著的线性关系。高、中、低浓度水平的L-半胱氨酸加标回收率为99.7%～100.5%，相对标准偏差小于1.3%，检测限为0.8μmol/L。方法简便、快速、可靠。用于样品分析，结果令人满意。

高效液相色谱法， 5,， 5'， -二硫硝基苯甲酸，柱前衍生， L-半胱氨酸，酶促反应液

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2004年12月28日

【期刊论文】利用淀粉的碱性蛋白酶工程菌的培养条件*

杨文博，冯耀宇，何志敏

微生物学报，1997，37（6）：473～476，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

自70年代开始，国内曾筛选出短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）289、209两株产碱性蛋白酶的菌株。由于这两个菌株以葡萄糖为速效碳源，菌株产碱性蛋白酶的能力受培养基中总糖的制约，且两株菌易受短小芽孢杆菌烈性噬菌体PP1-PP10的感染，因而不利于作为碱性蛋白酶制剂生产用菌。作者已从制革厂毛泥池中分离得到一株碱性蛋白酶产生菌——短小芽孢杆菌c172，该菌株对PP1-PP10噬菌体不敏感，对地衣芽孢杆菌pL1噬菌体亦无交叉感染，是野生型的噬菌体抗性菌株[1]。c172菌无淀粉酶基因，仍以葡萄糖为碳源。为解除培养基中总糖含量对c172菌株产碱性蛋白酶的不利影响，采用原生质体转化手段将带有淀粉酶（Amy）、卡那霉素抗性（Kmr）和氯霉素抗性（Cmr）基因的pBX 96质粒导入c172菌株中，获得了c172（pBX 96）转化子。该转化子能够以玉米粉为碳源，经Amy基因编码的糖化型α-淀粉酶水解玉米粉后，水解物可为菌体生长和生产碱性蛋白酶持续提供碳源。本文报道c172（pBX 96）转化子碱性蛋白酶发酵条件的研究结果。

Bacillus pumilus,， Fermentation,， Alkaline proteinase

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